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王文
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
徐州医学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
柴强
山东省医学科学院
夏大云
南京医科大学附属无锡人民医院
孙曼青
南京医科大学附属无锡人民医院
王湘芸
南京医科大学附属无锡人民医院
吴莹
南京医科大学附属无锡人民医院
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徐州医学院
作者
2篇
季圆
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钱玲玲
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王如兴
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党时鹏
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吴莹
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王湘芸
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孙曼青
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夏大云
2篇
王文
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柴强
传媒
1篇
中华心律失常...
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中华心血管病...
年份
2篇
2016
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n-3多不饱和脂肪酸对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的激活作用及其机制
2016年
目的探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)激活作用及其机制。方法酶消化法分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞,采用膜内向外型单通道膜片钳实验技术分别记录不同浓度二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)灌流后BK通道开放概率(NP0)。采用Western Blot和qRT-PCR分别测定未灌胃组和低、高剂量n-3 PUFA灌胃组大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道α亚单位和β1亚单位基因及蛋白表达。结果在电极外液钙离子浓度为1μmoVL和刺激电压60mV条件下,EPA浓度为0、10、30、100、300和1000pmo/L时,BK通道NP0分别为0.0616±0.0938、0.1090±0.0957.0.1303±0.0964、0.2250±0.1804、0.3803±0.2472和0.4080±0.2705,呈浓度依赖性增加(P〈0.05,n=4);而DHA浓度为0、0.01、0.1和1μmol/L时,BK通道NP0分别为0.1200±0.0086、0.1190±0.0734、0.1250±0.0921和0.2890±0.0616,NP。无明显增加(P〉0.05);继续增加DHA的浓度,当DHA浓度为3、5、7.5和10μmol/L时,BK通道NP。分别为0.6326±0.0478、1.0980±0.0643、1.1587±0.0676和1.1640±0.0926呈浓度依赖性增加(P〈0.05,n=4)。BK通道仪亚单位蛋白表达分别为0.7929±0.1794、0.7760±0.0599和0.7905±0.0596(P〉0.05,n=24),β1亚单位蛋白表达分别为0.8971±0.2976、1.1407±0.1516和1.2392±0.2337(P〉0.05,n=24)。未灌胃组和低、高剂量n-3PUFA灌胃组大鼠冠状动脉平滑肌细胞上BK通道α亚单位基因表达分别为0.6403±0.2470、0.6301±0.2290和0.9217±0.0907(P〉0.05,n=24),B1亚单位基因表达分别为0.8531±0.3687、0.9919±0.2250和1.0865±0.3632(P〉0.05,n=24)。结论n-3PUFA并非通过影响BK通道亚单位表达增加BK通道激活,而是通过与BK通道作用后直接激活,从而扩张冠状动脉。
汤徐
季圆
钱玲玲
党时鹏
孙曼青
王湘芸
吴莹
夏大云
王文
柴强
王如兴
关键词:
N-3多不饱和脂肪酸
冠状动脉
大电导钙激活钾通道
单通道
膜片钳
二十二碳六烯酸通过磷脂酶C-三磷酸肌醇-钙离子途径激活正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道
被引量:2
2016年
目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)激活正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的机制。方法采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;全细胞膜片钳实验技术记录正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流;膜内向外型单通道膜片钳实验技术记录不同钙离子浓度条件下BK通道电流,并计算开放概率(NP1);钙离子成像技术测定不同浓度DHA作用后及分别采用磷脂酶(CPLC)受体抑制剂和三磷酸肌醇(IR)受体抑制剂预孵育冠状动脉平滑肌细胞后细胞内钙离子浓度变化。结果1μmol/LDHA可激活BK通道;在刺激电位60mV,电极外液钙离子浓度为0、0.01、0.1、1、3、10、50和100μmol/L条件下,BK通道NP。分别为0.0027±0.0004、0.0060±0.0014、0.0972±0.0106、0.1379±0.0329、0.4687±0.1637、2.0971±0.3104和3.1204±0.2427(P〈0.05,n=4)。未加DHA时,细胞内钙离子浓度荧光信号比值(R值)为0.51±0.01;加入0.001和0.01μmol/LDHA后,R值分别为0.53±0.02和0.55±0.01,与未加DHA相比差异无统计学意义(P〉0.05,n/〉5);当加入的DHA浓度为0.1、0.3、1、3、5和10μmol/L时,其R值分别为0.64±0.01、0.65±0.01、0.70±0.01、0.69±0.01、0.68±0.01和0.67±0.02,ECEn为(0.04±0.02)μmol/L,与未加DHA比较,差异有统计学意义(P〈0.05,nI〉4)。分别采用PLC受体抑制剂U73122和IR受体抑制剂2-APB预孵育冠状动脉平滑肌细胞,测定加入0.1μmol/LDHA后R值分别为0.52±0.01和0.49±0.02,低于未加抑制剂的R值(0.64±0.01,P〈0.05,n≥4)。结论DHA可通过PLC—IP,Ca^2+途径增加正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞内钙离子浓度激活BK通道,从而扩张血管,对心血管系统有一定的保护作用。
孙曼青
钱玲玲
党时鹏
吴莹
汤徐
季圆
王湘芸
夏大云
王文
柴强
陆彤
王如兴
关键词:
冠状血管
大电导钙激活钾通道
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