刘慧
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- TaqMan探针法实时荧光定量PCR检测西瓜潜隐病毒被引量：9
- 2021年
- 【目的】西瓜潜隐病毒(Citrullus lanatus cryptic virus,CiLCV)是近年来新发生的一种重要种传病害,研究旨在建立基于TaqMan探针法的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR with TaqMan probes,TaqMan-qPCR)检测技术,为开展种子、种苗带毒鉴定和病害防控提供技术支撑。【方法】通过基于小RNA高通量测序技术在北京西瓜产地发现了CiLCV,并克隆CiLCV的dsRNA1和dsRNA2全长序列,设计特异性引物建立RT-PCR和TaqMan-qPCR检测方法。以黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottled mosaic virus)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus)、甜瓜内源病毒(Cucumis melo endornavirus)、瓜类褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus)、南瓜花叶病毒(squash mosaic virus)、番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus)、西瓜花叶病毒(watermelon mosaic virus)、小西葫芦黄花叶病毒(zucchini yellow mosaic virus)8种常见病毒为对照进行检测方法特异性分析;利用建立的实时荧光定量标准曲线对方法灵敏度进行评价;进一步利用TaqMan-qPCR和RT-PCR技术监测我国葫芦科作物主产区的西瓜、黄瓜、甜瓜和南瓜(砧木)种苗带毒情况。【结果】通过分析获得的高质量小RNA数据,发现17条组装的contig与CiLCV基因组有较好同源性。进一步克隆获得CiLCV的dsRNA1和dsRNA2序列全长(分别为1603和1466 nt),发现其与河南省鉴定出的CiLCV同源性高达99.4%和99.8%(GenBank number KY081285、KY081284)。建立的RT-PCR检测技术对CiLCV有单一扩增条带;建立的TaqMan-qPCR检测技术具有较好特异性和灵敏度,且能够检测到最低拷贝数为2×10^(3)的病毒,灵敏度是RT-PCR的100倍。同时,发现有1份来自北京的西瓜种苗检出了CiLCV,而其余地区的西瓜、黄瓜、甜瓜和南瓜(砧木)种苗均未检出该病毒,表明我国葫芦科作物主产区种苗带毒情况总体不高。【结论】建立的TaqMan-qPCR检测CiLCV技术特异性强、灵敏度高,适用于口岸和实
- 赵立群邱艳红张晓飞刘慧杨静静张建张海军徐秀兰温常龙
- 关键词：实时荧光定量PCR葫芦科作物种传病害
- 延庆大棚圆茄越夏长季节栽培品种筛选试验被引量：1
- 2016年
- 为筛选适宜大棚生长的圆茄品种,从不同品种生育周期、植株性状、抗病性和产量等方面考查6个引进圆茄品种的大棚生长适应性和表现。结果表明:京茄6号667 m^2产量9 152 kg,较对照增产20.2%;京茄1号667 m^2产量8 844 kg,较对照增产16.2%;京茄黑骏667 m^2产量8 712 kg,较对照增产14.5%,且三者综合性状优良,在延庆地区大棚生产中表现良好,适合大面积推广种植。
- 刘兴明刘慧张亮屈广琪
- 关键词：大棚圆茄
- 延庆春大棚番茄长季节栽培品种筛选试验
- 2016年
- 为筛选适宜延庆春大棚生长的番茄品种,特引进15个番茄品种,对比观测各个品种的生育周期、主要植株性状、抗病性及产量。结果表明:秋展16每667 m^2产量13 777 kg,较对照增产21.7%;抗硬粉8号每667 m^2产量12 972 kg,较对照增产14.6%;春展33每667 m^2产量11 983 kg,较对照增产5.9%,且三者综合性状优良,在延庆地区表现良好,适合大面积推广。京番101早熟性突出,建议可以适度种植,抢早上市。强丰101等品种综合性状表现一般,不建议在延庆地区推广种植。
- 刘兴明刘慧张亮屈广琪
- 关键词：番茄大棚
