施思
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
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- 酪醇对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及SIRT1/AMPK/eNOS信号通路在其中的作用被引量：2
- 2019年
- 目的探讨酪醇对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及沉默调节蛋白1(SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路在其中的作用。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠,体重200~220 g,采用腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg制备糖尿病模型。取糖尿病模型制备成功的大鼠56只,采用随机数字表法分为4组(n=14):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、心肌缺血再灌注+酪醇组(I/R+T组)和心肌缺血再灌注+酪醇+SIRT1抑制剂EX527组(I/R+T+E组)。I/R+T组和I/R+T+E组灌胃法连续45 d给予酪醇20 mg·kg^-1·d^-1,其他2组给予等体积生理盐水。I/R+T+E组于缺血前连续3 d腹腔注射EX527 5 mg·kg^-1·d^-1,并于再灌注前20 min时腹腔注射EX527 5 mg/kg。采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。采用TTC法测量心肌梗死体积,ELISA法检测血清CK-MB、LDH、15-F2t-isoprostane和心肌组织SOD水平,Western blot法检测心肌组织SIRT1、AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOS)的表达水平。结果与S组比较,I/R组血清CK-MB、LDH和15-F2t-Isoprostane的水平升高,心肌梗死体积增加,心肌组织SOD活性和SIRT1表达水平降低,I/R+T组和I/R+T+E组血清CK-MB、LDH和15-F2t-Isoprostane的水平升高,心肌梗死体积增加,心肌组织SOD活性和SIRT1表达水平降低,p-AMPK和p-eNOS表达上调(P<0.05);与I/R组比较,I/R+T组血清CK-MB、LDH和15-F2t-Isoprostane的水平降低,心肌梗死体积减少,心肌组织SOD活性和SIRT1、p-AMPK、p-eNOS的表达水平升高(P<0.05),I/R+T+E组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与I/R+T组比较,I/R+T+E组血清CK-MB、LDH和15-F2t-Isoprostane的水平升高,心肌梗死体积增加,心肌组织SOD活性和SIRT1、p-AMPK、p-eNOS表达水平降低(P<0.05)。结论酪醇可减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与激活SIRT1/AMPK/eNOS信号通路,抑制氧化应激反应有关。
- 施思雷少青刘慧敏赵博夏中元
- 关键词：心肌再灌注损伤蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 利多卡因预处理通过影响时钟基因BMAL1改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤被引量：1
- 2019年
- 目的:用甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞进行利多卡因预处理后进行缺氧/复氧(H/R)处理,探究利多卡因预处理是否通过影响时钟基因BMAL1改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤。方法:将H9C2细胞培养分为4组:即正常对照(N)组、甲基乙二醛(MGO)组、MGO+H/R组、MGO+H/R+LP组(缺氧/复氧前培养液中加入利多卡因20μmol/L)。收集各组细胞,用CCK-8法测定细胞活力;收集细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;超声破碎收集细胞匀浆测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;Western Blot测定BMAL1表达。结果:与N组相比,其余各组CCK-8检测细胞活性降低,LDH检测乳酸脱氢酶漏出量增多,SOD活性降低(P<0. 01),凋亡率增高(P<0. 01),BMAL1表达降低,与MGO组比较,MGO+H/R组CCK-8检测细胞活性降低,LDH漏出量增多,SOD活性降低(P<0. 01),凋亡率增高(P<0. 01),BMAL1表达降低(P<0. 01),MGO+H/R+LP组以上指标降低不明显。结论:利多卡因预处理可能通过上调时钟基因BMAL1蛋白表达,以改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧后的细胞损伤。
- 李源夏中元雷少青苏娃婷施思王凯
- 关键词：利多卡因BMAL1心肌细胞
- 大黄素预处理对LPS/ATP诱导的人脐静脉内皮细胞焦亡的影响被引量：15
- 2019年
- 目的探究大黄素(emodin,EMO)预处理对LPS/ATP诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响。方法将生长状态良好的HUVEC随机分为三组(n=6):正常对照组(C组)、LPS和ATP处理组(LPS/ATP组)、大黄素预处理组(EMO组)。C组为正常生长的HUVEC细胞; LPS/ATP组用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激细胞24 h,再用5. 5 mmol/L三磷酸腺苷(ATP)刺激细胞4 h; EMO组先用大黄素60μmol/L预处理细胞24 h,然后用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激细胞24 h,再用5. 5mmol/L三磷酸腺苷(ATP)刺激细胞4 h。用ELISA法检测细胞上清中LDH、ROS的水平,采用Western blot方法检测细胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白的变化。结果与C组相比较,LPS/ATP组细胞上清中LDH、ROS水平明显升高(P <0. 05),细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达明显增加(P <0. 05);与LPS/ATP组相比较,EMO组细胞上清中LDH、ROS水平明显降低(P <0. 05),细胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达明显下降(P <0. 05)。结论大黄素可以抑制细胞焦亡,减轻细胞损伤,其机制可能与大黄素抑制细胞内ROS的作用有关。
- 吴树宁王凯施思夏中元
- 关键词：大黄素人脐静脉内皮细胞脂多糖三磷酸腺苷
- 抑制CD36过表达减轻糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤
- 2018年
- 目的：探讨抑制CD36过表达在糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用和机制。方法：成年雄性健康大鼠,体重210-240g。大鼠糖尿病模型采取腹腔注射1%链脲佐菌素60mg/kg制备。大鼠冠状动脉左前降支分结扎30min后再灌注2h来制备心肌缺血/再灌注模型。正常大鼠和造模成功的糖尿病大鼠被分为3组（n=16）：非糖尿病心肌缺血/再灌注组（IR组）、糖尿病心肌缺血/再灌注组（DIR组）,CD36的抑制剂SSO处理的糖尿病心肌缺血/再灌注组（DIRS组）。再灌注结束,获取心肌组织和血样本。Western Blot法检测心肌CD36表达,TTC法检测心肌梗死面积,HE染色观察心肌组织病理变化,检测血糖,血清中胰岛素、甘油三酯（TGs）和游离脂肪酸（FFAs）。检测血清15-F2t-isoprostane、LDH、CK-MB及BNP。结果：DIR组的心肌CD36表达明显高于IR组而低于DIRS组（P〈0.05）,DIRS组的心肌缺血面积和梗死面积均减少（P〈0.05）;DIR和DIRS组糖尿病大鼠的胰岛素、TGs和FFAs的浓度均高于非糖尿病大鼠IR组（P〈0.05）,SSO处理的大鼠血清中胰岛素、TGs和FFAs的浓度均有不同程度下降（P〈0.05）。DIR组的15-F2t-isoprostane、LDH、CK-MB和BNP浓度均高于IR组（P〈0.05）,而经SSO处理后,DIRS组这些指标的浓度均有所下降（P〈0.05）。结论：SSO部分抑制CD36过表达,减轻了糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤。
- 刘慧敏施思孟庆涛陈榕李维唐玲华吴洋雷少青夏中元
- 糖尿病心肌损伤与酪蛋白激酶CK1ε参与调控的时钟基因Per2的关系被引量：4
- 2019年
- 目的探索糖尿病心肌损伤与时钟基因Per2的关系及具体机制。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠50只,随机分为非糖尿病(NDM)组20只和糖尿病(DM)组30只,其中NDM组分为ZT23(NDM+A)亚组、ZT11(NDM+P)亚组,DM组分为ZT23(DM+A)亚组、ZT11(DM+P)亚组、ZT23时酪蛋白激酶CK1ε抑制剂PF-670462干预(DM+PF)亚组,所有亚组均为10只。同时建立昼夜节律模型,交替给予大鼠12 h光照/12 h黑暗周期环境。苏木素伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化;免疫组织化学法分析心肌组织的病理形态学改变及时钟基因Per2的表达情况;实时定量PCR法检测CK1ε、Per2在基因水平上的表达情况;Western blot法检测CK1ε、Per2在蛋白水平上的表达情况;组间比较采用单因素方差分析法及t检验法进行统计学分析。结果与NDM+A亚组相比,DM+A亚组CK1ε、Per2在mRNA水平和蛋白水平上表达均增高(t=2.84、3.96,P<0.05;t=4.00、5.33,P<0.05);与NDM+P组相比,DM+P组CK1ε在mRNA和蛋白水平上表达增高(t=6.04、3.41,P<0.05),Per2在mRNA水平上表达降低(t=3.90,P<0.05),在蛋白水平上表达增高(0.715±0.111比0.998±0.162,t=2.55,P<0.05);与NDM+A组相比,NDM+P组Per2在mRNA水平上表达增高(t=5.35,P<0.05),在蛋白水平上表达降低(1.105±0.173比0.715±0.111,t=3.54,P<0.05);与DM+A亚组相比,DM+P亚组Per2在mRNA和蛋白水平上表达均降低(t=3.24、4.32,P<0.05),PF-670462干预亚组心肌CK1ε、Per2蛋白表达水平均降低(t=2.92、4.11,P<0.05);HE染色显示,NDM组心肌纤维排列整齐未见明显异常,DM组心肌排列紊乱,间质水肿并伴有炎性细胞浸润,提示DM各亚组心肌伴有损伤改变;免疫组化结果提示,与NDM各亚组相比,DM各亚组时钟基因Per2在心肌呈强阳性表达。结论糖尿病病理状态下心肌损伤的发生可能与时钟基因Per2昼夜表达节律异常有关,其机制可能与病理状态引起CK1ε信号上调相关。
- 黄琴夏中元雷少青冷燕施思邱珍王凯
- 关键词：糖尿病心肌损伤
- 糖尿病心肌后处理失保护机制及药物研究进展被引量：1
- 2016年
- 糖尿病是以高血糖和内源性胰岛素产生或分泌不足为特点的代谢性疾病。糖尿病增加了急性心肌梗死等缺血性心脏病的发生率。心血管疾病的危险因素中,糖尿病可能降低心肌后处理中的心肌保护作用。目前,糖尿病心肌后处理中的影响机制仍不是十分清楚。因此,明确糖尿病心肌后处理中的作用机制,增强心肌对缺血再灌注损伤的耐受力,研究探索心肌保护的理想药物,具有非常重要的临床意义。本文就糖尿病心肌后处理失保护机制及药物研究进展等方面做一综述。
- 施思刘慧敏夏中元
- 关键词：糖尿病缺血-再灌注损伤缺血后处理药物后处理心肌保护
- 右美托咪定联合舒芬太尼在年轻患者术后谵妄中的应用被引量：4
- 2017年
- 目的观察右美托咪定联合舒芬太尼在年轻患者术后谵妄的中的效果。方法选取笔者医院40例术后谵妄入ICU的年轻患者,随机分为4组,右美托咪定组(D组),舒芬太尼组(S组),右美托咪定联合舒芬太尼组(DS1组),小剂量联合组(DS2组),记录患者术后入ICU T1(0h)、T2(1h)、T3(2h)、T4(4h)、T5(8h)各时间点生命体征、视觉模拟评分(VAS)、镇静-躁动评分(SAS)、CAM-ICU评分、舒芬太尼总用量及呼吸遗忘次数。结果与D组相比较,其余3组在T2、T3、T4、T5时刻VAS,SAS和谵妄的发生率降低,差异有统计学意义(P<0.05);在T3、T4、T5其余3组心率,血压降低,差异有统计学意义(P<0.05);与S组相比较,DS1组在T3,T4,T5时刻VAS,SAS和谵妄的发生率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。DS2组舒芬太尼使用量,呼吸遗忘明显低于S组和DS1组(P<0.05)。结论对已发生谵妄的年轻患者,抑制疼痛可能是降低谵妄发生的基础,右美托咪定可以减少阿片类药物的使用,从而减轻其不良反应。
- 赵博雷少青刘恋施思袁泉
- 关键词：舒芬太尼谵妄
- 大黄素对缺氧条件下人脐静脉内皮细胞焦亡的影响被引量：10
- 2018年
- 目的观察大黄素(EMO)对缺氧条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响并探讨其机制。方法离体培养HUVEC,分为4组:对照组、缺氧12 h组、缺氧24 h组、EMO处理组,检测各组活性氧(ROS)水平,采用Western blotting方法检测各组核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)、Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白的变化。结果缺氧12 h后细胞内ROS水平,NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达无明显改变(P> 0.05),缺氧24 h后细胞内ROS水平升高,NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达增加(P <0.05),加入大黄素后,细胞内ROS水平下降,NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达下降(P <0.05)。结论缺氧可以诱导细胞焦亡,大黄素可以减轻缺氧条件下细胞焦亡水平,减轻细胞损伤,其机制可能与大黄素清除细胞内ROS有关。
- 王凯施思雷少青夏中元
- 关键词：缺氧大黄素HUVEC
- 糖尿病对心肌时钟基因Bmal1/Per2昼夜表达影响的研究
- 2018年
- 目的探索糖尿病对心肌时钟基因Bmal1/Per2昼夜表达的影响。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠44只,依据随机数字法分为非糖尿病组和糖尿病组,其中非糖尿病组采用随机数字法分为授时时间(ZT) 23亚组11只、ZT11亚组11只,糖尿病组分为ZT23亚组11只、ZT11亚组11只。糖尿病组大鼠腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型,待糖尿病模型成功后喂养4周;同时建立昼夜节律模型,给予大鼠12 h光照/12 h黑暗周期环境。苏木素-伊红(HE)染色观察时心肌组织形态学变化;免疫组织化学实验检测ZT23时心肌病理组织学改变及时钟蛋白Bmal1和Per2在心肌的表达情况; Western bloting法检测Bmal1和Per2在蛋白水平上的表达情况。结果与非糖尿病ZT23亚组相比,糖尿病ZT23亚组Per2表达增高,Bmal1表达下降(P <0. 05);与非糖尿病ZT11亚组相比,糖尿病ZT11亚组Per2、Bmal1表达降低(P <0. 05);与非糖尿病ZT23亚组相比,非糖尿病ZT11亚组Per2表达增高,Bmal1表达降低(P <0. 05);而与糖尿病ZT23亚组相比,糖尿病ZT11亚组Per2、Bmal1表达均降低(P <0. 05)。HE染色分析心肌组织结构发现,与非糖尿病组相比,糖尿病组心肌结构排列紊乱;免疫组织化学结果提示,糖尿病ZT23亚组心肌Bmal1、Per2呈阳性表达。结论糖尿病对心肌时钟基因Bmal1/Per2的昼夜表达产生影响,其可能是糖尿病心肌损伤的原因。
- 黄琴夏中元雷少青冷燕施思邱珍
- 关键词：糖尿病BMAL1PER2心肌节律
