薛婷
- 作品数:3 被引量:17H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:全球变化研究国家重大科学研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 一种基于适配体的快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的方法被引量:7
- 2015年
- 目的提出一种可快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的方法。方法构建重组质粒P16INK4A-pET28a,在大肠埃希菌中表达P16INK4A,利用亲和层析纯化,Western blot法验证。以纯化的重组蛋白作靶标,利用指数级富集配体的系统进化技术(SELEX)筛选其特异性适配体,通过分析其亲和力最终选出一条高亲和力、高特异性的适配体。枸橼酸钠还原法制备13nm纳米金颗粒并表征。建立基于免标记纳米金和适配体的分析方法,并对其进行方法学的考察。结果成功表达并纯化了P16INK4A蛋白,筛选出一条抗重组P16INK4A的高亲和力、高特异性的适配体,利用该适配体和免标记的纳米金建立了一种可快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的分析方法。结论该方法具有较好的准确度和精密度,有望显著提高早期宫颈癌的检出率。
- 徐雯薛婷余娟杨振德韩晓群俞薇卢斯霞廖芳
- 关键词:P16INK4A适配体纳米金宫颈癌肿瘤标志物
- 脂多糖通过调控树突状细胞存活和分泌细胞因子促进CD4^+T细胞增殖被引量:9
- 2016年
- 目的探索脂多糖(LPS)调节树突状细胞(DC)的功能,促进T细胞免疫反应的机制。方法应用CDllc^+免疫磁珠分离小鼠脾脏DC。LPS处理DC后。流式细胞术检测DC表面的共刺激分子CD80和CD86的表达,ELISA检测DC培养上清中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-6、IL-12p40、IL-12p70、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测DC凋亡,Phos-flow技术检测核因子κB P65(NF-κB P65)磷酸化水平,实时定量PCR检测基因芯片变化差异明显基因的mRNA水平,DC经OVA323-329多肽处理后与和CD4^+T细胞共培养,流式细胞术检测CD4^+T细胞的增殖。结果利用CD11 c磁珠分离,可获得纯度为93%的DC,LPS可以上调DC表面CD80和CD86的表达,增强DC介导的CD4^+T细胞的增殖。并且LPS能促进促炎细胞因子IL-12 p40、TNF-α和IL-6的分泌,同时通过NF-κB通路抑制DC的凋亡。结论 LPS通过调节DC的存活和细胞因子的产生促进DC介导的CD4^+T细胞的增殖。
- 陈松卢利莎王伟强薛婷余娟孙志娜赵春晓廖芳
- 关键词:脂多糖CD4+T细胞
- TGF-β刺激对小鼠脾脏树突状细胞功能的影响被引量:1
- 2017年
- 目的探索转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)通过调节树突状细胞(dendritic cells,DCs)的功能从而抑制CD4^+ T细胞增殖活化的可能作用机制。方法应用CD11c+免疫磁珠分选小鼠脾脏DCs,并检测其纯度。TGF-β处理DCs后,进行基因芯片检测。实时定量PCR验证基因芯片结果。DCs经TGF-β处理后和CD4^+ T细胞共培养,流式细胞术检测CD4^+ T细胞的活化和增殖。结果CD11c磁珠分选DCs纯度可以达到95%。TGF-β处理DCs后,抑制DCs表面CD53、CD69、CD33、CD74、CD93分子的表达;抑制趋化因子Ccl3、Ccl5、Ccl9、Ccl6、Ccl17、Cxcl10、Ccl22、Ccl4、Ccr7、Ccl2、Cxcl9、Ccl7的表达;抑制IL-2ra、IL-12rb2、IL-15ra、IL-1b、IL-15炎性细胞因子及其受体的表达;抑制CD4^+ T细胞的增殖和活化。结论TGF-β可以抑制DCs部分重要的表面CD分子、趋化因子及其受体、细胞因子及其受体的表达,最终抑制CD4^+T细胞的促活化和增殖。
- 杨菲薛婷陈松刘静茹黄慧芳罗悦晨廖芳冯晓明
- 关键词:转化生长因子Β基因芯片树突状细胞CD4^+T细胞