李伟庆
- 作品数：6 被引量：17H指数：2
- 供职机构：山东农业大学林学院更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株降解杀虫剂啶虫脒的细菌菌株分离鉴定及降解性能测试
- 2017年
- 桑园中残留的大量农药,有通过桑树富集最终对家蚕造成不良影响的潜在风险。采用富集培养和平板划线分离的方法,从长期被农药污染的桑园土壤中筛选分离到一株可降解对家蚕有极高风险性的杀虫剂啶虫脒的细菌菌株H2。对分离菌株H2进行形态和生理生化特征及16S r DNA序列分析,鉴定其为产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)。该菌株对啶虫脒的最高耐受浓度为1 200 mg/L;菌株在含300 mg/L啶虫脒的无机盐培养基中培养,0~1 d为生长延迟期,1~4 d为对数生长期,4~6 d为稳定期,6 d后进入衰亡期;菌株在啶虫脒初始质量浓度为300 mg/L的无机盐培养基中培养9 d,对啶虫脒的降解率为62.7%。同时发现H2菌株在分别含1 000 mg/L吡虫啉、1 000 mg/L烯啶虫胺、1 000 mg/L噻虫啉和500 mg/L辛硫磷的无机盐培养基中也能够生长,说明H2菌株能有效降解多种烟碱类农药和有机磷类农药,有望进一步开发为桑园残留烟碱类及有机磷类农药的微生物降解制剂。
- 孙永亮李伟庆李二兰任春久王彦文牟志美高绘菊
- 关键词：桑园土壤农药污染啶虫脒菌株分离降解性能
- Paraconiothyium variable GHJ-4木质素降解酶的酶学性质被引量：2
- 2017年
- 【目的】研究木质素降解子囊菌Paraconiothyrium variabile GHJ-4分泌的漆酶(laccase)、锰过氧化物酶(MnP)和木质素过氧化物酶(LiP)3种木质素降解酶的酶活性变化规律及其酶学性质,为利用该菌株进行木质素降解酶的工业化生产和应用提供依据。【方法】分别以愈创木酚、2,6-二甲基苯酚和黎芦醇为底物测定laccase,MnP和LiP的酶活性,研究3种酶的最适反应温度和pH、温度和pH稳定性及金属离子对其活性的影响。【结果】GHJ-4菌株发酵18,15和21天后,分别获得laccase,MnP和LiP最高酶活为1 390.3,30.3和52.5 U·mL^(-1)。laccase的最适反应温度为55℃左右,最适反应pH为5.5左右,在55℃以下、pH 4.0~7.0的范围内较为稳定;MnP的最适反应温度为60℃左右,最适反应pH为5.0左右,在55℃以下、pH 4.0~9.0的范围内较为稳定;LiP的最适反应温度为40℃左右,最适反应pH为3.0左右,在40℃以下、pH 2.0~4.0的范围内较为稳定。Mg^(2+),Zn^(2+),Cu^(2+),K^+对laccase起促进作用,Na^+和Zn^(2+)对LiP起促进作用,Mn^(2+)对MnP起激活作用,而Fe^(3+),Ca^(2+),Pb^(2+),Co^(2+),Al^(3+)对3种酶均起抑制作用,其中尤以5 mmol·L^(-1)Fe^(3+)对3种酶的抑制作用最强。【结论】温度、pH及金属离子对Paraconiothyrium variabile GHJ-4 3种木质素降解酶的酶学特性均有着不同程度的影响。
- 王凤娟李伟庆牟志美王彦文刘庆信高绘菊
- 关键词：漆酶锰过氧化物酶木质素过氧化物酶酶学性质
- Paraconiothyrium variabile GHJ-4产漆酶发酵培养基优化及酶学性质研究被引量：1
- 2016年
- 为了提高木质素降解子囊菌Paraconiothyrium variabile GHJ-4产漆酶的能力,采用响应面分析法优化其产酶培养基。最优的发酵培养基组成为:麸皮30 g·L^(-1),可溶性淀粉58.08 g·L^(-1),牛肉浸膏3.39 g·L^(-1),NaNO_3 1 g·L^(-1),KH_2PO_4 3 g·L^(-1),CuSO_4 0.554 g·L^(-1)。采用该优化培养基,GHJ-4菌株的漆酶酶活达到410.04 U·m L^(-1),比优化前提高9.5倍。以愈创木酚为底物,该菌株纯化漆酶的最适反应温度为50°C,最适反应pH为5.0,米氏常数Km为62.07μmol·L^(-1),最大反应速度Vmax为68.97 mmol·(L·min)-1;该漆酶在55°C以下、pH3.5~6.5的范围内较为稳定,Cu^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)对漆酶酶活有明显促进作用,而Hg^(2+)、Fe3+、Ag+对漆酶酶活有显著抑制作用。结果表明,Paraconiothyrium variabile GHJ-4是一株高效的漆酶产生菌株,具有潜在的工业化应用前景。
- 高绘菊王凤娟王维乐李伟庆黄露牟志美
- 关键词：漆酶培养基优化酶学性质
- 木质纤维素降解白腐菌的蛋白质组学研究进展被引量：2
- 2016年
- 木质纤维素是生物能源领域颇具潜力的原料,其复杂的结构组成是制约高效降解利用这一资源发展生物炼制的瓶颈。白腐菌作为自然界最主要的木质纤维素降解菌之一,揭示其降解的分子机制是阐明自然界木质纤维素降解过程和该生物质资源得以高效利用的基础。近年来,蛋白质组学技术在木质纤维素生物降解菌方面的研究取得许多成果,为深入研究木质纤维素的生物降解机理提供了重要信息。从木质纤维素降解白腐菌的胞内蛋白质组学、亚蛋白质组学和分泌蛋白质组学,以及木质纤维素降解过程降解酶之间的相互作用等方面综述了近年来的研究进展,以期从蛋白质组学角度阐明木质纤维素生物降解的分子机制。
- 王凤娟李伟庆牟志美王彦文刘庆信高绘菊
- 关键词：白腐菌
- 应用原生质体融合技术构建纤维素发酵产油脂菌株的试验被引量：4
- 2017年
- 原生质体融合(protoplast fusion)技术是将遗传性状不同的亲本原生质体融合杂交的基因重组技术。从健康桑树根系中分离到一株产油脂内生真菌MOD-1,采用酶解方法制备内生真菌MOD-1和产纤维素酶菌株绿色木霉TP4、T44及长柄木霉TL的原生质体,获得4个菌株的原生质体产量分别为7.02×10~6个/m L、4.43×10~6个/m L、6.35×10~6个/m L和4.35×10~6个/m L,再生率分别为4.90%、3.26%、4.51%和4.12%。优化亲本原生质体灭活条件为:MOD-1菌株经紫外线照射10 min或加热15 min,TP4菌株经紫外线照射25 min或加热20 min,T44菌株经紫外线照射25 min或加热25 min,TL菌株经紫外线照射30 min或加热25 min。在上述条件下各亲本原生质体的灭活率均达到100%。将灭活的MOD-1菌株原生质体分别与不同方式灭活的TP4、T44、TL菌株原生质体融合,经初筛和复筛获得了一株兼具MOD-1与TP4双亲优良性状的融合菌株MP-1,其油脂产量、油脂含量(质量分数)分别为0.082 4 g/L、14.46%,显著高于亲本菌株MOD-1。融合菌株MP-1传代培养10代后,油脂产量与油脂含量的遗传稳定性分别达到92.84%和95.00%。
- 张淑君李伟庆牟志美王彦文高绘菊
- 关键词：木霉原生质体融合
- 桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病大鼠胰腺组织氧化应激的保护作用被引量：8
- 2017年
- 用从桑叶中分离提取的粗多糖MLPⅡ连续5周灌胃给药治疗Ⅱ型糖尿病模型大鼠,在电子显微镜下观察大鼠胰岛β细胞超微结构,采用免疫组化法检测核转录因子κB(nuclear transcription factorκB,NF-κB)的表达变化,并利用Western blot、半定量RT-PCR法分别检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和胰岛素2(insulin 2,INS-2)在蛋白质表达水平和基因转录水平的变化。与糖尿病模型对照组大鼠相比,桑叶多糖MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛β细胞超微结构损伤程度明显减轻,胰岛β细胞中NF-κB的表达明显降低,胰腺组织中TNF-α蛋白的表达和基因mRNA的转录显著下调(P<0.01),而INS-2蛋白的表达和基因mRNA的转录显著上调(P<0.01)。试验结果表明,桑叶多糖MLPⅡ可明显改善Ⅱ型糖尿病模型大鼠胰腺组织氧化应激损伤,其作用机制可能与下调胰腺组织NF-κB和TNF-α的表达有关。
- 任春久孙永亮李伟庆崔为正王彦文高绘菊牟志美
- 关键词：胰腺组织氧化应激核转录因子ΚB肿瘤坏死因子Α
