- 柠檬酸铁铵通过活性氧途径影响人丙型肝炎病毒的蛋白翻译
- 2017年
- 目的研究铁对HCV IRES依赖的病毒蛋白翻译的影响,以及其与细胞ROS活性变化的关系。方法以脂质体细胞转染法,将双荧光素酶报告基因表达载体p CI-Rluc-HCV IRES-Fluc转染人肝癌细胞系Huh-7细胞。在0、50和300μmol/L浓度的柠檬酸铁铵(FAC)作用24 h后,双荧光素酶报告基因检测系统检测HCV IRES依赖的病毒蛋白翻译的变化。ROS荧光染色方法检测细胞ROS活性变化,Western blot法检测细胞中Nrf2蛋白表达的变化。加入100μmol/L的DPI后,检测300μmol/L FAC实验组中HCV蛋白翻译的变化和细胞ROS的变化。结果与对照组相比,FAC增加了Huh-7细胞HCV IRES依赖的病毒蛋白翻译、增加了ROS活性,并且可以引起核转录因子Nrf2表达增加(P<0.05)。加入ROS抑制剂DPI后,可以显著抑制FAC诱导的HCV IRES依赖的病毒蛋白翻译及Nrf2蛋白的表达(P<0.05)。结论 FAC可以诱导细胞HCV IRES依赖的病毒蛋白翻译增加,可能与FAC促进Huh-7细胞产生过多的ROS有关。
- 冯琼王强史云湘周季平方旭庞东卫刘一萍
- 关键词:丙型肝炎病毒内部核糖体进入位点活性氧
- 铁对三阴性乳腺癌细胞体外血管生成拟态的影响被引量:1
- 2016年
- 目的研究铁对三阴性乳腺癌细胞体外血管生成拟态(VM)的影响及其机制。方法将细胞分为6组:对照组、30和300μmol/L含羞草氨酸组、500μmol/L去铁胺组及50和500μmol/L乳酸亚铁组。用MTT法检测细胞增殖活力,三维培养和PAS染色鉴定细胞形成VM的能力,免疫荧光染色法检测ROS变化,Western blot检测p-ERK1/2表达。结果去铁胺、含羞草氨酸均可显著抑制血管样结构形成(P<0.05),乳酸亚铁可促进其形成(P<0.05),并且血管样结构表现为PAS染色阳性。细胞血管样结构形成能力与胞内ROS及p-ERK1/2表达水平变化相一致。加入PD98059可以显著抑制其形成(P<0.05)。结论铁诱导生成ROS促进VM的形成,ERK1/2的异常激活可能是主要调节机制。
- 张强史云湘史杪崔永峰冯琼王强和彦苓
- 关键词:铁血管生成拟态P-ERK1/2
- 铁过载对人乳腺癌细胞c-MYC蛋白表达的影响被引量:1
- 2016年
- 目的研究铁过载催化的氧化应激对乳腺癌细胞中癌前因子c-MYC影响。方法分别以0、50和500μmol/L硫酸亚铁溶液培养人乳腺癌MCF-7细胞系24 h后,以细胞荧光染色法检测ROS活性,Western blot检测IRP1、IRP2、c-MYC、p-ERK1/2、GSK和PP2A蛋白的表达。加入NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)后检测ROS活性和c-MYC蛋白表达。结果随着铁剂量的增加,MCF-7细胞内ROS活性和IRP2蛋白表达均显著增加(P<0.05),IRP1无明显改变。铁过载还显著增加c-MYC蛋白表达,促进ERK1/2的磷酸化,降低GSK、PP2A蛋白表达(P<0.05)。加入DPI后,铁诱导的ROS活性及c-MYC蛋白表达被显著抑制(P<0.05)。结论铁过载可以通过诱导细胞内ROS活性的增强上调乳腺癌细胞c-MYC蛋白的表达。
- 史云湘史杪冯琼周季平方旭王强潘桂兰
- 关键词:乳腺癌细胞ROSC-MYC