陈雪璐
- 作品数：7 被引量：0H指数：0
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
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- 免疫荧光检测p53与线粒体共定位的实验方法探索
- 2020年
- 目的探索研究p53与线粒体共定位的最佳免疫荧光条件,为检测蛋白质与线粒体共定位的研究提供参考。方法低氧处理HeLa细胞,免疫印迹检测p53表达;分别使用甲醇固定HeLa细胞、甲醇:丙酮混合液(体积比1∶1)固定HeLa细胞、4%多聚甲醛固定HeLa细胞,前二者不作通透处理,后者用0.1%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton-X 100)通透,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,降低Triton-X 100浓度至0.05%、0.025%、0.01%和0.005%,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,Triton-X 100浓度降至0.01%和0.005%,通透标记p53后再次使用0.1%Triton-X 100重新通透细胞器膜染色线粒体。结果低氧后p53表达上调(P<0.01),可用于后续免疫荧光实验。使用甲醇和混合液固定组均可同时在细胞核及细胞质内观察到明显的p53信号,并可观测到其与线粒体的共定位,混合液组共定位更明显。多聚甲醛固定组用0.1%Triton-X 100通透后p53信号主要在细胞核内,未能观察到共定位;使用4%多聚甲醛固定后,降低Triton-X 100浓度至0.05%和0.025%在一定程度上削弱p53核内信号,增强共定位信号,但细胞核内信号仍强于细胞质,当降低至0.01%和0.005%,细胞质内检测到p53信号,细胞核内未检测到p53信号,提示此条件下核膜未被通透,但同样也未能通透线粒体膜,导致线粒体标记失败;二次通透完全规避p53核内信号,并成功标记线粒体,检测到p53与线粒体的共定位。结论使用甲醇或混合液固定可观察到p53与线粒体共定位,其中混合液效果更佳;使用4%多聚甲醛固定结合2次通透可有效避免核内信号,检测到p53和线粒体的共定位。
- 龙丹冯莉陈雪璐李胜富周彦妮
- 关键词：P53线粒体共定位免疫荧光
- 雷公藤通过mTOR通路抑制CD4~+CD25~-效应性T细胞增殖并促进调节性T细胞诱导
- 研究背景与目的:雷公藤有抗炎、免疫抑制作用,并广泛用于临床移植排异和多种自身免疫性病的治疗。研究报道:雷公藤对T细胞有抑制作用,并能促进foxp3表达,诱导调节性T细胞(i Tregs)生成。但其作用信号机制尚未见详细报...
- 张家碧陈雪璐单娟李胜富李幼平
- 关键词：雷公藤T细胞增殖
- 文献传递
- 瘦素通过mTOR通路促进CD4+CD25-效应性T细胞增殖和Th17诱导
- 目的：Th17/Treg失衡是类风湿关节炎的重要病理机制，但其失衡原因和机制尚不明确。本研究旨在探讨瘦素对T细胞增殖及Th17/Treg平衡调控的作用和信号机制。
- 单娟陈雪璐张家碧陈玮金虹徐艳程晓刚
- 关键词：瘦素STAT3
- 雷公藤通过mTOR通路抑制CD4+CD25效应性T细胞增殖并促进调节性T细胞诱导
- 研究背景与目的：雷公藤有抗炎、免疫抑制作用,并广泛用于临床移植排异和多种自身免疫性病的治疗.研究报道：雷公藤对T细胞有抑制作用,并能促进foxp3表达,诱导调节性T细胞(iTregs)生成.但其作用信号机制尚未见详细报道...
- 张家碧陈雪璐单娟李胜富李幼平
- 关键词：雷公藤调节性T细胞T细胞增殖
- 雷帕霉素通过mTOR-Smad2/3-STAT5通路促进TGF-β对iTreg的诱导
- 目的 :探讨雷帕霉素和TGF-β对CD4+CD25-效应T细胞的作用及诱导iTreg的信号机制。方法 :免疫磁珠分选获得Balb/c小鼠CD4+CD25-效应T细胞,CFSE标记后接种,加入anti-CD3和antiCD...
- 陈雪璐单娟张家碧李幼平李胜富冯莉
- 关键词：雷帕霉素TGF-Β
- 文献传递
- 瘦素通过mTOR通路促进CD4~+CD25~-效应性T细胞增殖和Th17诱导
- 目的 :Th17/Treg失衡是类风湿关节炎的重要病理机制,但其失衡原因和机制尚不明确。本研究旨在探讨瘦素对T细胞增殖及Th17/Treg平衡调控的作用和信号机制。方法 :磁珠分选小鼠CD4+CD25-效应性T细胞,CF...
- 单娟陈雪璐张家碧陈玮金虹徐艳程晓刚
- 关键词：瘦素STAT3
- 文献传递
- 雷帕霉素通过mTOR-Smad2/3-STAT5通路促进TGF-β对iTreg的诱导
- 目的：探讨雷帕霉素和TGF-β对CD4+CD25-效应T细胞的作用及诱导iTreg的信号机制。方法：免疫磁珠分选获得Balb/c小鼠CD4+CD25-效应T细胞,CFSE标记后接种,加入anti-CD3和anti-CD2...
- 陈雪璐单娟张家碧李幼平李胜富冯莉
- 关键词：雷帕霉素TGF-Β
