王成世
- 作品数:7 被引量:3H指数:1
- 供职机构:四川大学华西医院更多>>
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- 大鼠糖尿病肾病模型早期病变的代谢组学研究
- 背景:糖尿病肾病(DN)是糖尿病最严重的并发症之一,也是终末期肾病主要原因。由于其发病机制复杂、病情进展隐蔽,目前临床早期诊断和治疗干预均存在较大困难。如能通过系统方法研究DN发病过程中的病理、生化代谢变化趋势,筛选出能...
- 刘敬平王成世王丹刘书云李兰张杰陈又男刘芳陆燕蓉程惊秋
- 关键词:糖尿病肾病代谢组学核磁共振纤维化
- 文献传递
- 异基因恒河猴胰岛骨髓腔内移植治疗1型糖尿病
- 王成世王莉李红霞李新丽程惊秋陆燕蓉杜晓炯何斯荣陈又南刘敬平田伯乐张爽麦刚赵久茗
- 恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定被引量:3
- 2012年
- 目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4~5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5~8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类Tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+T淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+T淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+Tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及Tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性T淋巴细胞(effective T cells,Teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+T淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+T淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(P<0.05)。后续CD4+CD25+Tregs分选采用阳性分选法获得的CD4+T淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+Tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后Tregs均对ConA刺激的Teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+Tregs。
- 张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉
- 关键词:调节性T淋巴细胞免疫磁珠分选恒河猴
- BMSCs对猪胰岛缺氧再给氧损伤的保护作用
- 2013年
- 目的研究恒河猴BMSCs在缺氧再给氧环境下对新生猪胰岛活性和功能的保护作用。方法取健康成年恒河猴5只,体重6~10 kg,取骨髓采用骨髓单核细胞贴壁培养法筛选获得BMSCs;取3~5日龄新生长白猪5只,取胰腺以Ⅴ型胶原酶消化制备新生猪胰岛。将实验分为胰岛正常组(A组)、胰岛加BMSCs正常组(B组)、胰岛缺氧再给氧组(C组)、胰岛加BMSCs缺氧再给氧组(D组),观察比较常规培养和缺氧(1%O2)12 h再给氧24 h或48 h条件下,胰岛的功能活性变化:二乙酸荧光素/碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色计算胰岛成活率;细胞计数试剂盒8法检测新生猪胰岛的代谢活性;膜联蛋白V-FITC/PI标记后流式细胞仪检测胰岛凋亡率;葡萄糖刺激法分析胰岛功能糖刺激指数(stimulation index,SI)。结果 C组较A、B组胰岛团更为分散,死亡细胞增多;D组较C组胰岛团完整,成活率更高。A、B、C、D组胰岛成活率分别为90.2%±9.1%、88.3%±5.9%、52.3%±12.1%、71.4%±11.5%,C、D组显著低于A、B组(P<0.05),D组显著高于C组(P<0.05)。D组BMSCs以1∶10和1∶20比例与胰岛缺氧再给氧共培养后,代谢活性显著高于C组(P<0.05)。A、B、C、D组胰岛凋亡率分别为27.1%±3.2%、24.0%±1.0%、64.3%±1.8%、46.2%±1.4%,C、D组显著高于A、B组(P<0.05),但D组显著低于C组(P<0.05)。各时间点A、B组SI比较差异均无统计学意义(P>0.05),C组显著低于A、B组(P<0.05),在24 h和72 h时D组显著高于C组(P<0.05)。结论 BMSCs对缺氧再给氧诱导的新生猪胰岛活性和功能损伤具有保护作用。
- 赵久茗何斯荣王成世刘敬平李胜富陈又南陆燕蓉程惊秋
- 关键词:BMSCS胰岛缺氧再给氧恒河猴
- 骨髓腔是胰岛移植治疗恒河猴1型糖尿病的有效位点
- 目的 肝脏是目前临床胰岛移植广泛采用的移植部位.最近有啮齿类动物实验表明胰岛的骨髓腔内移植也可以获得理想的治疗效果.因此本研究对糖尿病猴骨髓腔和经肠系膜静脉的肝内同种异体胰岛移植效果进行比较.方法 通过静脉注射80 mg...
- 王成世王莉李宏霞韩鹏飞康裕建程惊秋陆燕蓉杜晓炯何斯荣陈又南刘敬平史梅梅麦刚陆慧敏杨光
- 异基因恒河猴胰岛骨髓腔内移植治疗1型糖尿病
- 目的肝脏门静脉系统目前临床胰岛移植的常用移植部位,但肝脏存在生理和解剖特征上的缺陷,且易引发血液介导的急性炎症反应,寻找更理想的移植位点成为胰岛移植研究的热点。近年来有研究表明,骨髓腔能够为大小鼠胰岛移植提供一个分布广泛...
- 王成世杜晓炯何斯荣陈又南刘敬平田伯乐张爽麦刚赵久茗王莉李红霞李新丽程惊秋陆燕蓉
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞通过调节炎症治疗大鼠糖尿病肾病的研究
- 目的 慢性炎症在糖尿病肾病(DN)的发展中发挥重要作用.间充质干细胞(MSCs)是一类具有免疫调节功能的细胞.本研究旨在探讨骨髓来源的MSC移植能否通过降低炎症反应,减缓糖尿病大鼠肾病进展.
- 李媛旻刘敬平廖光能张杰李兰李丽陈波王成世史梅梅赵焜陆燕蓉程惊秋