王焕景
- 作品数:16 被引量:15H指数:2
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 水牛精子蛋白质图谱的构建及生物信息学
- 2016年
- 以水牛为研究对象,应用SDS-PAGE电泳分离和LTQ-Orbitrap高分辨率组合式质谱构建水牛精子蛋白质图谱,鉴定出了1 074个精子蛋白质。用生物信息学手段对水牛精子蛋白质进行GO分类,其中参与细胞代谢的蛋白质所占比例最大,说明了成熟精子进行着旺盛的代谢活动,为其受精等活动提供能量准备。生物信息学分析结果显示,参与翻译后修饰的蛋白质有36%,说明成熟的精子在RNA转录和翻译水平上基本处于沉默状态时,主要靠蛋白质的翻译后修饰来实现细胞的功能。本试验为水牛精子细胞增殖发育研究、提高水牛精子活力以及受精机理研究提供了新的手段和信息。
- 黄德伦付强官俊良黄愉淋陈富美王焕景赵秀玲黄凤玲梁贤威张明
- 关键词:水牛精子蛋白质组
- 改进的徒手切割水牛囊胚的方法及切割液
- 本发明公开了一种改进的徒手切割水牛囊胚的方法,并将切割液和培养滴合二为一,即将添加一定量牛磺酸的含有颗粒细胞的成熟培养液做成切割滴,命名为切割单层。该法主要包括制备切割单层、固定胚胎、切割胚胎、剥离切割胚,其中切割单层时...
- 张明陈富美王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞
- BCL2L10对水牛卵母细胞体外成熟的影响
- BCL2L10是一种抗细胞凋亡的BCL-2家族成员,研究表明,其大量而特异性的表达于成年人和小鼠的卵母细胞及早期胚胎,对卵母细胞成熟和早期胚胎发育起到重要的促进作用。本研究旨在探讨水牛BCL2L10在水牛各组织中的表达及...
- 王焕景
- 关键词:基因克隆水牛卵母细胞体外成熟RNA干扰
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富
- 精子发生是一个复杂精细的过程,在此过程中存在着严格的同源群现象和周期变化规律,受众多因素的协同调控。然而,对于哺乳动物精子发生的分子事件人们依然知之甚少。近年来,受各种因素影响,越来越多的人受到不育症的困扰,其中一半左右...
- 关键词:
- 关键词:精子发生基因表达男性不育症
- 磷酸化蛋白质组学在哺乳动物精子研究中的应用被引量:11
- 2017年
- 蛋白质磷酸化是蛋白质翻译后最普遍、最重要的修饰之一,是生物体内一种普通的调节方式,参与调控细胞增殖、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生等分子机能,并在精子信号转导和酶合成表达的过程中起重要作用。对精子磷酸化蛋白的研究有助于深入了解精子发生、运输、获能,以及精卵识别的调控机理。因此,在磷酸化蛋白组学的层面上研究精子的各项机能可以为雄性不育更深层的研究提供一条新的道路。
- 张鹏飞濮黎萍王焕景赵秀玲陈富美陆阳清张明
- 关键词:哺乳动物精子磷酸化蛋白质组学
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA,该shRNA为shRNA‑Iqcf5‑107、shRNA‑Iqcf5‑257、shRNA‑Iqcf5‑425或shRNA‑Iqcf5‑500,它们分别具有序列表SEQ....
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富美
- 水牛孤雌激活早期胚胎蛋白质表达谱的构建及生物信息学分析
- 2018年
- 收集水牛孤雌激活后2细胞期早期胚胎500枚,利用0.1%链酶蛋白酶去除透明带后提取蛋白质,并使用胰蛋白酶进行酶解处理,再将酶解得到的多肽混合物经强阳离子交换色谱进行顸分离,预分离后所收集的馏分通过液相色谱串联质谱(LC—MS/MS)技术进行质谱鉴定,原始数据通过数据库搜索获得该时期蛋白质表达谱0通过SE-QUEST检索共得到778种蛋白,对其进行生物信息学初步分析,包括G0富集分析和蛋白互作网络分析等。结果发现,这些蛋白质主要参与氧化还原、蛋白质折叠、细胞内蛋白质运输等生物学过程,主要定位于线粒体和细胞膜上。本研究为后续以孤雌激活为研究模型探讨哺乳动物早期胚胎发育和母源性蛋白质调控机制提供了新的研究手段和方法。
- 陈富美濮黎萍付强王焕景张鹏飞候振徐壮壮黄凤玲陆阳清张明
- 关键词:孤雌激活早期胚胎蛋白质表达谱生物信息学
- 水牛BCL2L10基因的克隆、序列分析及其在卵母细胞中的表达
- 2017年
- 本研究克隆了水牛BCL2-like 10(BCL2L10)基因序列,并用生物信息学技术分析了该序列的同源性、系统进化树、蛋白的理化性质以及高级结构。同时利用免疫荧光染色的方法检测了BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟前后的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术克隆得到的水牛BCL2L10基因序列全长600 bp,其中编码区长度为558 bp,共编码185个氨基酸。对该序列进行对比分析发现,水牛BCL2L10基因的核苷酸序列与野牛、牛、绵羊、小鼠、大鼠、野猪的同源性分别为99%、98%、96%、84%、81%、75%。生物进化树分析显示,水牛BCL2L10基因与牦牛、野牛的亲缘关系最近。生物信息学分析得到BCL2L10蛋白的分子量为21.6 k D,理论等电点为9.54。功能结构域预测显示BCL2L10蛋白属于BCL-2家族成员,参与细胞凋亡调控过程。免疫荧光染色结果发现,BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟过程中均有表达。
- 王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞张明
- 关键词:水牛
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA,该shRNA为shRNA‑Iqcf5‑107、shRNA‑Iqcf5‑257、shRNA‑Iqcf5‑425或shRNA‑Iqcf5‑500,它们分别具有序列表SEQ....
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富美
- 水牛波形蛋白基因克隆及其表达分析被引量:1
- 2017年
- 【目的】克隆水牛波形蛋白(VIM)基因,并明确VIM基因在水牛成熟卵母细胞(MII期)和早期胚胎(2-细胞阶段)中的表达情况,为研究VIM在卵母细胞成熟及附植前胚胎发育中的作用机理打下基础。【方法】根据GenBank上已公布的水牛VIM基因mRNA序列设计引物,采用RT-PCR克隆水牛VIM基因,利用在线软件程序对克隆获得的水牛VIM基因进行生物信息学分析,同时以细胞免疫荧光试验检测VIM在水牛成熟卵母细胞(MII期)及早期胚胎(2-细胞阶段)中的表达情况。【结果】水牛VIM基因长度为1469 bp,其编码区长度1401 bp,编码466个氨基酸。水牛VIM基因序列与人类、黑猩猩、食蟹猴、家犬、马和牛的VIM基因序列具有高度的同源性,分别为93%、93%、93%、94%、94%和99%;基于VIM基因序列构建的系统发育进化树也显示水牛与牛的亲缘关系最近。水牛VIM的分子量为53.73 k D,理论等电点(p I)5.05,主要在线粒体中表达,稳定性差(不稳定系数53.65),具有较强的亲水性,无跨膜结构,不属于分泌型蛋白,其蛋白结构以α-螺旋为主。VIM在水牛成熟卵母细胞(MII期)及早期胚胎(2-细胞阶段)中均有表达,且在成熟卵母细胞中的表达量明显高于早期胚胎。【结论】水牛VIM基因编码序列具有较高的保守性,且在水牛成熟卵母细胞(MII期)中的表达量明显高于早期胚胎(2-细胞阶段)。
- 濮黎萍候振徐壮壮陈富美王焕景黄凤玲张明
- 关键词:水牛基因克隆生物信息学分析