马文军 作品数:5 被引量:8 H指数:2 供职机构: 重庆医科大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
3-D多孔结构的小肠黏膜下组织在兔膀胱再生中的应用 被引量:1 2016年 目的探讨3-D多孔结构的小肠黏膜下组织(small intestine submucosa,SIS)在新西兰大白兔膀胱再生中的应用。方法用物理及化学方法制备具有3-D多孔结构的SIS。将24只雄性新西兰大白兔随机分为3组(n=8),分别行膀胱半切术建立膀胱缺损模型,使用3种不同处理的SIS进行膀胱重建。A组:未经过氧乙酸(peroxyacetic acid,PAA)处理的SIS组;B组:PAA处理的SIS组;C组:PAA处理后100%胎牛血清浸润的SIS组。3组在术前及术后4周测定膀胱容量,并于术后4周取材,行大体观察及组织学检测,评估膀胱再生情况。结果应用SIS行兔膀胱重建术后4周,3组再生膀胱组织与周围组织粘连依次降低,结石率分别为33.3%、28.6%、14.31%。与术前自身比较,术后4周3组膀胱最大容量均缩小且依次增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后组织学检测示3组膀胱上皮细胞均有再生,与A组比较,B、C组的上皮再生更好,边缘区和中心区无明显差异。3组膀胱平滑肌的再生均不理想,但边缘区平滑肌再生较中心区多;在边缘区和中心区,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组在边缘区和中心区的再生血管面积依次增加,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论经PPA及胎牛血清处理后3-D多孔结构的SIS,具有良好的促进膀胱组织再生能力,是一种比较理想的修复支架材料。 储加强 马文军 张德迎 龙春兰 龚梦嘉 赵丽 魏光辉 张元原关键词:血管化 糖尿病肾病患者尿源性干细胞的分离鉴定及与健康人尿源性干细胞的细胞生物学比较研究 被引量:4 2018年 干细胞移植是糖尿病肾病新的治疗途径,但异种干细胞存在伦理及免疫排斥等问题。该研究从糖尿病肾病患者尿液中提取出一种类似干细胞的细胞,称之为糖尿病病人尿源性干细胞(USCs from patients with diabetic nephropathy,D-USCs),并比较了与健康人尿源性干细胞(urine derived stem cells,USCs)生物学特性的差异。通过观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,茜素红及油红O染色分别检测成骨和成脂分化潜能,以鉴定其干细胞特性。通过绘制生长曲线比较D-USCs与USCs增殖能力,人促血管生成因子检测试剂盒检测细胞外分泌因子的表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡率的差异。结果表明,此类细胞可以在体外分离培养,连续传代生长,细胞形态保持米粒状,表达间充质干细胞标志物(包括CD 24、CD 29、CD 73、CD 90、CD 105)、周细胞标志物(CD 146),不表达造血干细胞标志物(包括CD 31、CD 34、CD 45),具有成骨和成脂分化的潜能。与USCs相比,D-USCs的增殖能力受到损伤,分泌因子种类基本保持一致,但数量上有所减少,细胞凋亡率升高。综上所述,该研究成功从糖尿病肾病病人尿液中提取出尿源性干细胞,为干细胞移植治疗肾损害提供了可能的新的细胞来源,避免了异体免疫排斥反应。 陶立 马文军 龚梦嘉 毕杨 魏光辉 张元原关键词:糖尿病肾病 外分泌 持续低氧预处理促进兔尿源性干细胞增殖和减少凋亡 被引量:2 2017年 目的探讨持续低氧(3%O_2)环境对兔尿源性干细胞(r USCs)增殖、凋亡及分泌功能的影响。方法 r USCs分别置于3%O2和20%O_2条件下培养,连续观察其形态学变化,绘制细胞增殖曲线;检测其分泌、周期及凋亡变化。结果 r USCs原代培养约第6天便可见单个"米粒样"细胞,不同氧浓度培养后发现常氧组细胞为"长梭形",低氧组向"鹅卵石"样改变;两组细胞增殖曲线均呈"S"形,但低氧组增殖速度较快(P<0.01);低氧组较常氧组相比,血管营养因子表达量均有上调且表达因子种类增加;常氧组G0/G1期细胞数为91.73%±1.35%,明显高于低氧组的71.82%±8.86%(P<0.05);常氧组S期细胞数为3.48%±0.73%,显著低于低氧组的18.77%±3.87%(P<0.01);流式常氧组凋亡率为3.24%±0.38%,明显高于低氧组的0.43%±0.05%(P<0.001);Hoechst结果常氧组凋亡率为4.27%±0.48%,明显高于低氧组的1.37%±0.33%(P<0.01)。结论持续性低氧(3%O2)环境可促进r USCs细胞的增殖,减少细胞凋亡,增加其分泌功能。 马文军 储加强 陶立 龚梦嘉 毕杨 魏光辉 张元原关键词:低氧 增殖 凋亡 小肠黏膜下基质复合尿源干细胞用于尿道重建的实验研究 <正>目的:探索应用小肠黏膜下基质(Small intestinal submucosa,SIS)复合自体尿源干细胞细胞(urine-derived stem cells,USC)构建组织工程化尿道的可行性。方法:分离培... 张德迎 刘洋 马文军 刘博 储加强 张元原 林涛 何大维 魏光辉文献传递 不同Wnt信号分子对胚胎肝干细胞分化的影响研究 被引量:1 2020年 目的探讨不同Wnt蛋白对小鼠胚胎肝祖细胞HP14-19分化的作用,筛选有效的肝干细胞定向分化体系,为治疗肝衰竭提供理论基础。方法携带不同Wnt蛋白基因的19种重组腺病毒,分别感染HP14-19,检测清蛋白启动子启动的荧光素酶报告基因活性;实时荧光定量PCR检测detla蛋白DLK、甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)、上皮特异性标志物细胞角蛋白(CK18)等肝细胞分化成熟相关标志物的表达情况;糖原(PAS)染色实验和吲哚菁绿(ICG)摄取实验用于检测肝细胞合成代谢功能。结果19种Wnt腺病毒均能有效感染HP14-19细胞并表达相应的Wnt信号蛋白,随着处理时间的延长,荧光素酶值逐渐升高,其中Wnt3a的作用最明显;Ad-Wnt3a组肝干细胞标志DLK、AFP表达明显下降;肝细胞特异性成熟标志ALB、CK18明显上调;Ad-Wnt3a处理后PAS染色可见70%~80%的细胞染色阳性,细胞由多角形变为长梭形;ICG摄取实验可见大量绿色圆形或者多边形阳性细胞。结论Wnt3a蛋白是诱导HP14-19细胞成熟分化的重要蛋白,诱导分化后的细胞类似于成熟肝细胞,有较强的合成代谢功能;对进一步研究肝干细胞分化调控及肝移植应用有重要意义。 彭利 马文军 崔洁洁 龚梦嘉 何昀关键词:分化