刘萍 作品数:14 被引量:27 H指数:2 供职机构: 南京农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 生物学 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征病毒5′非翻译区一茎环结构的功能解析 被引量:1 2010年 以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR将5′非翻译区(5′UTR)中部分一级序列进行系列突变,以改变5′UTR二级结构中的一保守茎部结构,从而解析PRRSV5′UTR中结构与功能的关系。通过DNA转染MARC-145细胞观察突变体克隆的感染性,并通过免疫荧光及Northern blot来研究拯救后突变病毒的复制、转录特性,以及通过空斑形态学分析突变病毒的生长特性。结果表明,PRRSV5′UTR中保守茎部结构的二级结构与病毒的拯救无直接关系,但其一级核苷酸序列却是PRRSV病毒复制所必需的,作者还找到直接调控病毒复制的核心位点。由此证实了5′UTR中调控PRRSV复制过程的必需序列,为进一步解析PRRSV复制过程的调控元件奠定了基础。 陆嘉琦 高飞 刘萍 袁世山关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒复制 基因表达调控 江苏省建设项目环境保护公众参与途径与效果研究 随着环境保护日益成为公众关注的热点,公众环境意识觉醒并对政府提出了更高的环境保护参与诉求。虽然国家早已明确要求“把公众参与、专家论证、风险评估、合法性审查和集体讨论决定作为重大决策的必经程序”,但在实际操作中还难以完全落... 刘萍关键词:环境影响 公众参与 环境保护 建设项目 文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因表达调控序列的初步解析 2011年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界养猪业的一个巨大的威胁。近年来,此病给各国养猪业造成了巨大的经济损失。本文立足于反向遗传操作技术,介绍了调控PRRS病毒粒子的感染性、基因组RNA复制、亚基因组mRNA转录以及翻译等重要过程的顺式调控元件的一级序列和高级结构的最新研究进展。 高飞 孙志 郑海红 袁海峰 刘长龙 陆嘉琦 刘萍 尹扬 袁世山 童光志关键词:非翻译区 茎环结构 猪繁殖与呼吸综合征病毒3’非编码区结构与功能解析 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)是一种可以引起以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统症状为特征的猪繁殖与呼吸综合征(PR... 刘萍关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 茎环结构 文献传递 网络资源链接 猪繁殖与呼吸综合征病毒5'非编码区前导转录调控序列及其侧翼序列的结构与功能解析 被引量:2 2011年 为解析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5'非翻译区(5'UTR)的高级结构与功能,以北美株PRRSV感染性克隆为平台,通过定点突变PCR技术将其5'UTR中一特殊高级调控元件的一级序列进行突变,以改变其二级茎环结构,从而解析该结构的基因调控水平。将突变DNA克隆转染入BHK-21细胞后利用免疫荧光及RT-PCR试验来研究拯救后突变病毒的转录、翻译特性,及通过空斑形态学及病毒生长曲线分析突变病毒的生长特性。结果表明,PRRSV 5'UTR中该高级调控元件的顶端环结构为病毒复制所必需,其只可耐受2个核苷酸的突变;同时发现该调控元件中一保守的茎结构为病毒复制非必需。由此证实了PRRSV 5'UTR中调控病毒复制过程的必需高级结构,为进一步解析PRRSV复制调控元件奠定基础。 陆嘉琦 高飞 刘萍 蔺涛 袁世山关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒复制 基因表达调控 重组杆状病毒及其构建方法和应用 本发明公开一种重组杆状病毒,该重组杆状病毒包含:编码猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性病毒颗粒蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了重组杆状病毒的构建方法及应用。本发明的重组杆状病毒,在昆虫细胞、以及PRRSV敏感和非敏感哺乳细胞中... 袁世山 郑浩 高飞 郑海红 韦祖樟 龙进学 刘长龙 庄金山 于丹丹 孙志 王小敏 邓宇 李燕华 蔺涛 周艳 刘萍猪Small Nidovirus复制过程调控的分子解剖 @@猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndromevirus,PRRSV)的基因组5'UTR,3' UTR以及最主要的结构蛋白-核衣壳蛋白(Nucle... 袁世山 高飞 刘长龙 谭菲菲 陆嘉琦 孙志 刘萍 尹扬关键词:猪繁殖与呼吸综合征 病毒复制 序列同源性 核衣壳蛋白 文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒传代与免疫原性变化的关联研究 2022年 本研究以高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗候选株JXM105以及其传代毒株JXM125和JXM135为研究对象,通过3株传代毒株对其母源强毒株JX143攻毒免疫保护效力评价和全基因序列分析,解析病毒体外传代与毒株免疫原性间的关联。结果显示:JXM105、JXM125和JXM135免疫后的仔猪在21 d观察期内未出现异常临床表现,剖检猪无显著肺脏损伤。攻毒JX143后,免疫JXM105的动物组无发病和死亡,免疫JXM125或JXM135的动物组虽无死亡,但分别有20%的发病率。全基因组测序结果显示,与亲本病毒JX143相比,JXM105含有47处突变,包括23处氨基酸突变、位于nsp2的88个连续氨基酸缺失和GP2碳端的11个氨基酸截短。与JXM105相比,JXM125和JXM135仅增加了8处核苷酸突变,其中2处导致氨基酸突变。研究表明:3株传代毒株对仔猪均无致病力;JXM105对4周龄仔猪的保护率可以达到100%,JXM125和JXM135不能提供完全保护、已出现过度弱化的现象。23处分散在不同区域的氨基酸突变可能与JX143致弱相关。 刘萍 柏亚军 蒋晓虹 夏水利 马俊 孙志 袁世山 姚火春关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 安全性 免疫效力 致弱 单股正链RNA病毒基因组5′非翻译区的结构与功能研究进展 2010年 单股正链RNA病毒是众多人畜共患病及动植物传染病的病原,其种类繁多,对人畜健康和农业经济生产影响重大。该类病毒基因组5′非翻译区(5′UTR)一级序列及各种高级结构在病毒的复制、转录、翻译过程中发挥重要调控作用,本文对一些代表种属单股正链RNA病毒的5′UTR进行介绍,且就其结构与功能的一般研究方法、主要进展和存在的问题进行了探讨。 陆嘉琦 高飞 刘萍 袁世山关键词:单股正链RNA病毒 基因表达调控 硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响 被引量:20 2010年 试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的免疫效果。 郭振环 胡元亮 马霞 赵晓娜 王德云 赵炳凯 郭利伟 刘萍 郝利华关键词:香菇多糖 新城疫疫苗 抗体效价 淋巴细胞增殖