贾懿劼 作品数:15 被引量:26 H指数:3 供职机构: 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 南方医科大学南方医院院长基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 经济管理 更多>>
miR-455对高糖诱导下人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响 目的 探讨miR-455对高糖诱导下人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响及其可能机制.方法 体外培养HMCs,采用cck8法测24h、48h、72h HMC增殖情况;qRT-PCR检测miR-455、FN和COLI... 肖知周 关美萍 郑宗基 贾懿劼 王玲 薛耀明微RNA-324-3p对高糖条件下人肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量:6 2019年 目的探讨微RNA(miR)-324-3p对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的影响。方法将体外培养的HK-2细胞分为低糖组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、高渗组(30 mmol/L甘露醇)、高糖+miR-324-3p过表达组(30 mmol/L葡萄糖)、高渗+miR-324-3p过表达组(30 mmol/L甘露醇)、miR-324-3p过表达组(分别以15、30、50、75 nmol/L类似物转染细胞)、阴性对照组。采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞仪检测HK-2细胞的凋亡率;采用实时聚合酶链式反应检测各组细胞miR-324-3p水平;Western blot检测Bcl-2、Bax、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。两组间比较采用t检验分析,多组间比较采用单因素方差分析。结果与低糖组相比,高糖组HK-2细胞miR-324-3p表达增加(2.33±0.27比1.00±0.33,t=5.40,P<0.01)。随着miR-324-3p类似物转染浓度的升高,cleaved caspase-3蛋白表达水平逐渐上调(F=177.01,均P<0.05)。与高糖组相比,高糖+miR-324-3p过表达组Bcl-2蛋白表达下调(0.38±0.01比0.40±0.00,t=-3.19,P<0.05),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达均升高(分别为1.80±0.04比1.68±0.03,t=4.32,P<0.05;0.91±0.01比0.66±0.01,t=29.75,P<0.01),Bcl-2/Bax蛋白比率降低(0.21±0.00比0.24±0.00,t=-11.20,P<0.01)。结论高糖环境下miR-324-3p表达明显增加。miR-324-3p可能通过Bcl-2/Bax比率下调导致cleaved caspase-3表达增加,从而促进细胞凋亡。 邹美娜 贾懿劼 郑宗基 杨炎林 薛耀明关键词:微RNAS 细胞凋亡 肾小管 miR-455对高糖诱导下人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响 肖知周 关美萍 郑宗基 贾懿劼 王玲 薛耀明miR-26a和miR-30c协同调控肾小管上皮细胞转分化在糖尿病肾脏疾病中的机制研究 目的 糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病患者常见的微血管慢性并发症之一.miRNA除了可以调控单个基因的表达,最近研究表明miRNA还可以调控多个基因,多个miRNA也可以调控一个基因的表达,形成一张复杂的调控网络,从而更... 郑宗基 关美萍 贾懿劼 王丹 庞若宇 吕福平 肖知周 王玲 张红斌 薛耀明exendin-4对高糖条件下人系膜细胞细胞外基质代谢的影响 被引量:3 2016年 目的探讨exendin-4对高糖条件下人系膜细胞(HMC)细胞外基质(ECM)代谢的影响及其可能的机制。方法取对数生长期的HMC分为正常对照(NG)组、渗透压对照(Man)组、高糖(HG)组和高糖联合不同浓度exendin-4(1、10、100 nmol/L)组。体外培养HMC,采用cck8法测24 h HMC增殖情况;Western Blotting检测细胞培养15 min后细胞外调节激酶(ERK)/p-ERK蛋白表达情况,24 h后Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示高糖诱导HMC 24 h后可见细胞增殖明显增强(1±0.06 vs 1.20±0.07,P<0.001),加入exendin-4后可抑制细胞增殖(1.12±0.02 vs 1.20±0.07,P<0.05,1.05±0.08 vs 1.20±0.07,P<0.001)。细胞培养24 h后,与NG组相比,HG组细胞Ⅰ型胶原、FN、TGF-β1蛋白表达量均显著增加(P<0.001);与HG组相比,高糖联合exendin-4组Ⅰ型胶原、FN、TGF-β1蛋白表达量均显著降低(P<0.01)。细胞培养15 min后,与NG组相比,HG组细胞ERK磷酸化蛋白表达量较NG组显著增加(P<0.001);与HG组相比,高糖联合exendin-4组ERK磷酸化蛋白表达量显著下降(P<0.001)。渗透压对照组与正常对照组各指标间差异均无统计学意义。结论 Exendin-4可能通过抑制TGF-β1/ERK通路活性对高糖条件下HMC ECM代谢起到了保护性的调节作用。 肖知周 关美萍 郑宗基 贾懿劼 王玲 薛耀明关键词:EXENDIN-4 人系膜细胞 细胞外基质 高糖 2型糖尿病患者尿液胞外囊泡中miRNA在糖尿病肾病早期诊断中的应用 贾懿劼 关美萍 郑宗基 张倩 唐川 许文伟 肖知周 王玲 薛耀明早期2型糖尿病肾病患者尿液外泌体中miRNA表达的研究 谢沂均 贾懿劼 谢翠华 薛耀明Klotho通过抑制高糖诱导的微RNA-21a-5p高表达而减轻肾小管上皮细胞间质转分化的机制 2020年 目的探索Klotho抑制高糖条件下肾小管上皮细胞(HK-2)微RNA(miR)-21a-5p表达而减轻肾小管上皮细胞间质转分化的机制。方法将体外培养的HK-2分为低糖组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)和高渗组(30 mmol/L甘露醇);按照高糖刺激时间分为4组:0、12、24、48 h;按照是否转染pcDNA3.1-Klotho/pcDNA3.1-Vector及转染后低或高糖刺激分为4组:低糖组、高糖组、高糖+pcDNA3.1-Vector组和高糖+pcDNA3.1-Klotho组;按照转染si-Klotho/si-Negative后是否加入二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)和低或高糖刺激分为6组:低糖+si-Klotho组、低糖+si-Negative组、低糖+si-Klotho+PDTC组、高糖+si-Klotho组、高糖+si-Negative组和高糖+si-Klotho+PDTC组。染色质免疫共沉淀(CHIP)分组:低糖+pcDNA3.1-Vector组、高糖+pcDNA3.1-Vector组和高糖+pcDNA3.1-Klotho组。采用实时聚合酶链式反应检测各组细胞miR-21a-5p水平;Western blot检测Klotho、纤连蛋白(FN)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、核因子κB(NF-κB)、NF-κB 抑制因子(IκB)表达水平;CHIP检测NF-κB对miR-21a-5p启动子的直接作用。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果与低糖组比较,高糖组Klotho蛋白表达下降至60.8%(P<0.05),miR-21a-5p表达升高至3.203倍(P<0.01),FN和α-SMA表达明显升高。随着高糖刺激时间延长,Klotho蛋白表达水平逐渐降低,而miR-21a-5p表达水平逐渐升高,呈现相反的变化趋势(P<0.05)。高糖组核蛋白NF-κB和miR-21a-5p表达水平是低糖组的2.934倍和3.154倍(均P<0.01),而过表达Klotho后,NF-κB和miR-21a-5p表达水平分别下降至高糖组的50.18%和49.24%(均P<0.05)。CHIP结果显示:高糖+pcDNA3.1-Vector组与低糖+pcDNA3.1-Vector组相比,NF-κB和miR-21a-5p启动子结合显著增加至3.121倍(1.000±0.742比3.121±0.115,P<0.01);而过表达Klotho能显著减弱高糖引起的NF-κB和miR-21a-5p启动子结合至54.21%(3.121±0.115比1.692±0.073,P<0.01)。结论 Klotho可抑制高糖条件下肾小管上皮� 薛萌 杨炎林 乐颖 邹美娜 贾懿劼 郑宗基 任昰婧 董文慧 薛耀明关键词:微RNAS 肾小管上皮细胞 上皮间质转分化 KLOTHO 2型糖尿病患者尿液胞外囊泡中miRNA在糖尿病肾脏病早期诊断中的应用 目的 早期诊断对于改善糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)的预后具有重要意义。已有研究表明miR-192,miR-194,和miR-215在肾皮质高表达并且在DKD的发生发展中起到重要作... 贾懿劼 关美萍 郑宗基 张倩 唐川 许文伟 肖知周 王玲 薛耀明罗格列酮通过细胞外调节蛋白激酶1/2-结缔组织生长因子信号通路缓解了转化生长因子β1诱导的肾小管上皮细胞转分化 目的 探索罗格列酮抑制肾小管上皮细胞转分化的可能的机制.方法 用人重组TGF-β1刺激大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,使用qPCR和WB检测观察是否引起a-SMA、FN、Col-Ⅰ和CTGF表达上调,且抑制E-cadhe... 郑宗基 关美萍 贾懿劼 庞若宇 李文琦 王丹 吕福平 王玲 薛耀明