- 长链非编码RNA LINC01133通过调控线粒体功能影响人牙周膜干细胞成牙骨质分化潜能的研究被引量：2
- 2022年
- 目的探索长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)LINC01133对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSC)成牙骨质分化潜能的影响及其作用机制。方法收集2021年9月至2022年1月第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科17~30岁10例就诊患者因正畸需要或因阻生拔除的牙齿共12颗, 从离体牙上提取hPDLSC, 分别转染靶向LINC01133小干扰RNA(small interfering RNA-LINC01133, si-LINC01133)或阴性对照小干扰RNA(small interfering RNA-negative control, si-NC), 以转染si-LINC01133为实验组, 转染si-NC为阴性对照组。利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)检测si-LINC01133的沉默效率;通过蛋白质印迹法检测hPDLSC成牙骨质分化相关蛋白包括骨涎蛋白(bone sialoprotein, BSP)、牙骨质附着蛋白(cementum attachment protein, CAP)、牙骨质蛋白1(cementum protein-1, CEMP-1)的表达;利用流式细胞术和线粒体超氧化物指示剂MitoSOX检测细胞线粒体活性氧产量;通过JC-1荧光染色法检测线粒体膜电位水平;利用蛋白质印迹法检测线粒体呼吸链复合体蛋白包括NADH脱氢酶[泛醌]1β亚单位8(NADH dehydrogenase[ubiquinone]1 beta subcomplex subunit 8, NDUFB8)、琥珀酸脱氢酶亚单位A(succinate dehydrogenase complex flavoprotein subunit A, SDHA)、泛醌-细胞色素c还原酶核心蛋白1(ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1, UQCR1)、细胞色素c氧化酶亚单位4亚型1(cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1, COXⅣ)、ATP合成酶F1亚单位α(ATP synthase F1 subunit alpha, ATP5A)的表达水平。结果 hPDLSC的LINC01133表达水平被si-LINC01133有效沉默(阴性对照组:1.000±0.000, 实验组:0.385±0.128)(t=10.72, P<0.01), 沉默效率超过60%。LINC01133沉默后, hPDLSC BSP表达水平显著下降(阴性对照组:1.000±0.000, 实验组:0.664±0.179)(t=4.62, P<0.01);CAP表达水平显著下降(阴性对照组:1.000±0.000, 实验组:0.736±0.229)(t=2.83, P<0.05)。LINC01133沉默后, hPDLSC线粒
- 邓道坤李璇贺小涛孙海花田蓓敏陈发明
- 关键词：细胞分化长链非编码RNA牙周膜干细胞线粒体功能
