李纯
- 作品数:6 被引量:1H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一株粘细菌Myxococcus sp.STXZ90的分离鉴定及生物活性分析被引量:1
- 2017年
- 采用灭活大肠杆菌诱导法分离粘细菌,通过形态观察、生理生化实验、16S rRNA基因序列同源性分析,对其进行鉴定并归类.并通过平板对峙法、肿瘤细胞毒性实验等检测粘细菌代谢产物的抑菌和抗肿瘤活性,RPHPLC分离抗肿瘤活性物质.分离得到一株粘细菌,鉴定结果表明该菌株为黄色粘球菌,将其命名为Myxococcus sp.STXZ90(简写为STXZ90).抑菌试验表明,STXZ90对多种人类病原菌及鱼类致病细菌如产气肠杆菌、嗜水气单胞菌等具有较高的抑制活性;STXZ90发酵上清的甲醇粗提物对多种肿瘤细胞具有广谱高效的抑制肿瘤细胞活性,对Hep-3B,Hela和HUVEC等的最低半抑制浓度(IC_(50))为0.279~1.228 mg/L.对该甲醇粗提物进行RP-HPLC分离,得到2个较纯的单峰物质,体外肿瘤细胞实验结果显示该组分有较强的抑制肿瘤细胞活性.
- 黄同龙雷良欢廖继燕周偲吴雨婧李纯魏慧夏立秋丁学知张友明
- 关键词:粘细菌次级代谢产物高效液相色谱
- sTRAIL蛋白原核表达载体的构建、表达及抗肿瘤活性研究
- 2015年
- 目的:从HL-60细胞中获得了sTrail基因片段,优化蛋白表达条件,并研究其抗肿瘤活性。方法:培养HL-60细胞,提取总RNA,通过RT-PCR扩增sTRAIL蛋白基因片段,并将目的基因克隆至原核表达载体p ET28a上,并电击转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,优化蛋白表达条件,Ni-IDA柱纯化重组蛋白,SDS-PAGE蛋白电泳,胶内酶解质谱鉴定。纯化后的重组蛋白作用HUVEC,He La,Hep-3B,HCT-116,MDA-MB-231,H460细胞检测蛋白生物学作用。结果:DNA测序结果证实成功构建了重组质粒p ET28a-sTrail,SDS-PAGE蛋白电泳,胶内酶解质谱检测显示成功表达sTRAIL蛋白,MTT法和流式细胞术结果显示,sTRAIL蛋白对肿瘤细胞包括He La,HCT-116,MDA-MB-231,H460,Hep-3B细胞有良好的生物活性,对正常的HUVEC细胞无毒性。结论:成功构建可以高效表达sTRAIL蛋白的原核表达载体,优化蛋白的表达和纯化后所得sTRAIL蛋白具有良好的抗肿瘤生物活性,为研究和发展利用sTRAIL蛋白作为临床治疗抗肿瘤药物提供了重要基础。
- 王世奇刘婧莹刘晨浪李纯胡晓凤夏立秋张友明
- 关键词:基因克隆原核表达蛋白纯化抗肿瘤活性
- 发光杆菌毒素复合体(Tc)克隆及其生物活性研究
- 李纯刘晨浪方倩于芳楠夏立秋张友明
- 一株叶柄粘球菌STXZ77的分离鉴定及其抗肿瘤活性研究
- 雷良欢黄同龙李纯魏慧刘晨浪廖继燕周偲吴雨婧夏立秋张友明
- 粘细菌新菌株的筛选鉴定及其生物活性研究
- 对从我国各地采集的多份土样,采用灭活大肠杆菌和滤纸片诱导子实体法分离粘细菌,通过菌落形态观察、子实体形态观察、扫描电镜观察、生理生化实验以及165 rRNA基因序列同源性分析,对分离得到的粘细菌进行鉴定并归类,通过平板扩...
- 黄同龙雷良欢廖继燕周偲吴雨婧李纯魏慧夏立秋丁学知张友明
- 埃博霉素异源高效表达
- 刘晨浪李纯方倩于芳楠夏立秋张友明