张文建
- 作品数：8 被引量：11H指数：3
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 能预示和鉴定绵羊羊毛卷曲度的分子标记方法及其引物对
- 本发明提供一种能预示和鉴定绵羊羊毛卷曲度的分子标记方法及其引物对，所用引物对，上引物SHCBP1-P1-F：如序列表Seq？No.1所示；下引物SHCBP1-P1-R：如序列表Seq？No.2所示。具体方法如下：设计引物...
- 王宁马广伟张志威杨华杨涵羽璐张文建王宇祥李辉
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- 能预示和鉴定绵羊羊毛细度的分子标记方法及其引物对
- 本发明提供一种能预示和鉴定绵羊羊毛细度的分子标记方法及其引物对，所用引物对，上引物ICT1F：如序列表Seq No.1所示；下引物ICT1R：如序列表Seq No.2所示。具体方法如下：设计引物对，并提取绵羊基因组DNA...
- 王宁马广伟张文建杨华王宇祥李辉
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- 能预示和鉴定绵羊羊毛细度的分子标记方法及其引物对
- 本发明提供一种能预示和鉴定绵羊羊毛细度的分子标记方法及其引物对，所用引物对，上引物ICT1F：如序列表Seq No.1所示；下引物ICT1R：如序列表Seq No.2所示。具体方法如下：设计引物对，并提取绵羊基因组DNA...
- 王宁马广伟张文建杨华王宇祥李辉
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- 鸡miR-17-92基因簇上游调控区功能分析被引量：4
- 2016年
- miR-17-92基因簇(miR-17-92 cluster)在细胞增殖、分化、凋亡、动物发育以及肿瘤发生等过程中发挥重要作用。目前,人和小鼠等哺乳动物miR-17-92基因簇的转录调控已有深入研究,但该基因簇在鸡等鸟类中的转录调控研究还未见报道,主要原因在于鸟类miR-17-92基因簇上游的基因组序列都存在一个gap,且该基因簇启动子的位置和序列也还不清楚。为此,本研究采用染色体步移的方法获得鸡miR-17-92基因簇上游gap区序列,并采用生物信息学分析和报告基因及截短突变技术开展该gap区的功能分析。染色体步移分析发现,鸡miR-17-92基因簇上游gap区全长1704 bp,GC含量达80.11%。生物信息学分析显示,鸡miR-17-92基因簇上游gap区内1段200 bp的序列与人、牛、小鼠等9种动物miR-17-92基因簇上游序列保守性较高,且该区域为人和小鼠等哺乳动物miR-17-92基因簇宿主基因的核心启动子区。将克隆的gap区序列插入pGL3 basic荧光素酶报告基因载体,构建成启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-cMIR17HG(-4228/-2506)。荧光素酶报告基因活性分析表明,p GL3-c MIR17HG(-4228/-2506)报告基因的活性是pGL3 basic空载体活性的417倍,证明所克隆的gap区片段是鸡miR-17-92基因簇宿主基因的启动子。为进一步分析该启动子的结构和功能,构建gap区片段的5'端缺失突变(缺失448 bp)和3'端缺失突变(缺失894 bp)的荧光素酶报告基因载体。与pGL3-cMIR17HG(-4228/-2506)相比,5'端和3'端缺失突变分别使启动子报告基因活性降低19.82%和60.14%。这些数据提示,鸡miR-17-92基因簇宿主基因启动子的重要调控区位于-3400/-2506。本研究结果为进一步开展鸡miR-17-92基因簇的转录调控奠定了基础。
- 程敏张文建邢天宇闫晓红李玉茂李辉王宁
- 关键词：启动子转录调控
- miR-17-92基因簇靶基因MAP3K2的鉴定
- miRNA基因在染色体上的分布并不是随机的,许多miRNA基因常紧密相邻,形成miRNA基因簇(miRNA cluster)。同一个miRNA基因簇的成员在功能上是相关的,它们往往作用于相同的靶基因或信号通路。miR-1...
- 张潇飞宋鹤张文建闫晓红李辉王宁
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- 鸡miR-17-92基因簇靶基因ZFPM2的鉴定及功能分析被引量：5
- 2017年
- miR-17-92基因簇在哺乳动物的许多生理和病理过程中发挥重要作用。本实验室前期研究发现,miR-17-92基因簇促进鸡前脂肪细胞的增殖,但其作用机制尚不清楚。为了揭示miR-17-92基因簇促进鸡前脂肪细胞增殖的作用机制,本研究采用CCK-8细胞增殖检测方法分析干扰ZFPM2对前脂肪细胞的影响,结果发现,干扰ZFPM2能显著促进鸡前脂肪细胞的增殖(P<0.01);与CCK-8分析结果相一致,干扰ZFPM2可致使细胞增殖标志基因PCNA、Ki67、Cyclin D1的mRNA表达量明显升高(P<0.01或P<0.05)。进一步对鸡ZFPM2基因进行生物信息学分析,发现该基因mRNA的3′UTR有两个区域存在miR-17-92基因簇4个成员(miR-17-5p、miR-20a、miR-19a及miR-19b)的潜在结合位点。为验证miR-17-92基因簇是否靶作用于鸡ZFPM2基因,构建了鸡ZFPM2基因3′UTR区的荧光素酶报告基因载体(野生型)(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-WT)及其突变型的荧光素酶报告基因载体(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-MUT)。报告基因活性分析显示,过表达mi-17-92基因簇能极显著地抑制野生型ZFPM2的报告基因活性(P<0.01);转染miR-17-5p、miR-20a及miR-19a的抑制剂均能显著地提高野生型ZFPM2报告基因的活性(P<0.01或P<0.05),但这些抑制剂对突变型ZFPM2报告基因的活性无明显影响。q RT-PCR分析发现,miR-17-5p、miR-19a及miR-20a的抑制剂能显著提高内源性ZFPM2基因mRNA的表达水平(P<0.01或P<0.05)。共转染分析发现,尽管差异不显著,但miR-17-5p和miR-19a的抑制剂均倾向于降低ZFPM2干扰片段的促细胞增殖作用。本研究结果表明:miR-17-92基因簇成员miR-17-5p、miR-20a、miR-19a及miR-19b靶作用于ZFPM2;miR-17-92基因簇至少部分通过抑制ZFPM2基因表达从而促进鸡前脂肪细胞的增殖。
- 张潇飞宋鹤刘静张文建闫晓红李辉王宁
- 关键词：细胞增殖
- 能预示和鉴定绵羊羊毛卷曲度的分子标记方法及其引物对
- 本发明提供一种能预示和鉴定绵羊羊毛卷曲度的分子标记方法及其引物对，所用引物对，上引物SHCBP1‑P1‑F：如序列表Seq No.1所示；下引物SHCBP1‑P1‑R：如序列表Seq No.2所示。具体方法如下：设计引物...
- 王宁马广伟张志威杨华杨涵羽璐张文建王宇祥李辉
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- 鸡miR-20a靶基因TP53INP1鉴定被引量：3
- 2015年
- 前期研究发现,过表达mi R-17-92基因簇能促进鸡前脂肪细胞增殖,但作用机制尚不清楚。生物信息学分析发现,TP53INP1是mi R-17-92基因簇成员mi R-17-5p和mi R-20a的潜在靶基因,研究采用荧光素酶报告基因技术和基因过表达技术开展该靶基因的验证。结果表明,过表达mi R-17-92基因簇能显著抑制TP53INP1的3'UTR报告基因活性;而转染mi R-20a抑制剂能显著提高TP53INP1的3'UTR报告基因活性。将mi RNA抑制剂分别转染到DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,采用real-time RT-PCR方法检测细胞TP53INP1基因表达变化。结果显示,mi R-20a抑制剂能促进TP53INP1表达,TP53INP1是mi R-20a的一个靶基因。
- 王宁段逵宋鹤张潇飞张天目张文建闫晓红王守志李辉
- 关键词：前脂肪细胞基因表达
