于蕊
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- B细胞受体核心岩藻糖基化调节成熟B细胞的信号转导
- 2016年
- 目的探讨核心岩藻糖基转移酶(Fut8)对成熟B细胞信号转导的影响。方法利用Fut8-siRNA逆转录病毒载体建立Fut8基因沉默成熟B细胞株(3-83-KD细胞),并将PLHCX-Fut8质粒导入3-83-KD细胞建立Fut8基因恢复成熟B细胞株(3-83-KD-Re)。用Real time-PCR、Western blot和HPLC法检测Fut8 mRNA、蛋白表达和Fut8酶活性,流式细胞仪和凝集素免疫印迹检测BCR的表达量和核心岩藻糖基化水平,Western blot技术检测细胞内酪氨酸磷酸化水平。结果与3-83细胞相比,3-83-KD细胞的BCR核心岩藻糖基化水平明显下降,而3-83-KD-Re细胞其表达得到恢复。Fut8基因沉默使3-83-KD细胞BCR介导的信号传导明显减弱,而3-83-KD-Re细胞的信号传导恢复正常。结论 Fut8修饰的核心岩藻糖基化在BCR介导的细胞信号转导过程中发挥重要的调节作用。
- 于蕊刘红霞孙世杰王惠国李文哲
- 关键词：SIRNA信号转导
- 核心岩藻糖基转移酶缺损导致B细胞抗体产生下降
- 2016年
- 目的探讨核心岩藻糖基转移酶(Fut8)对B细胞抗体产生的影响。方法小鼠经OVA免疫后,取其脾脏分离单个淋巴细胞,应用流式细胞术分析小鼠脾脏细胞中B细胞群的分布情况;ELISPOT实验检测小鼠B细胞产生抗体的能力;收集小鼠OVA免疫过程中第0、14、28天的血清,ELISA技术检测小鼠血清中抗体的效价。结果 Fut8基因缺失导致小鼠脾脏细胞中所有的B细胞和成熟B细胞的数量下降(P<0.05);Fut8^(-/-)小鼠和Fut8^(+/+)小鼠抗体产生细胞的平均数量分别为16个和27个,与Fut8^(+/+)小鼠相比,Fut8^(-/-)小鼠B细胞产生抗体的能力下降(P<0.05);第1次免疫之后Fut8^(-/-)和Fut8^(+/+)小鼠抗-OVA IgG抗体的效价分别为1∶12 800和1∶51 200,第2次免疫之后,抗体的效价分别为1∶102 400和1∶409 600,Fut8的缺失导致血清中抗体效价下降(P<0.05)。结论核心岩藻糖基化对B细胞的抗体产生具有重要的调节作用。
- 于蕊毛姗姗梁伟孙世杰王惠国李文哲
- 关键词：B淋巴细胞抗体产生
