朱敏杰
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
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- 葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响及其机制探讨被引量：16
- 2016年
- 目的:研究葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选取120只实验用大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物100 mg·kg^(-1)治疗组、葛根素(100,50,25 mg·kg^(-1))治疗组;采用夹闭双侧肾蒂血管45 min后恢复血流再灌注的方法制备肾缺血再灌注大鼠模型;再灌注后立即通过ip给药,每天1次,疗程2周。治疗完成后,称量体重和肾脏质量并计算肾脏指数,测定血清中尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),尿酸(UA)含量,PAS染色法观察肾脏组织形态学变化;末端标记法(TUNEL)染色法观察细胞凋亡状况并计算凋亡指数(AI);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定肾脏组织蛋白激酶B(AKT),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达,并计算Bax/Bcl-2;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肾脏组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达并进行半定量分析;酶联免疫法测定血浆中血浆C-反应蛋白(CRP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素^(-1)β(IL^(-1)β),白细胞介素-6(IL-6),细胞间黏附分子^(-1)(ICAM^(-1))水平。结果:与模型组比较,葛根素(100,50 mg·kg^(-1))治疗组大鼠肾脏指数明显降低(P<0.05,P<0.01),血清中BUN,SCr,UA含量明显降低(P<0.05,P<0.01);葛根素各治疗组肾脏组织病理性形态学变化呈不同程度改善,肾小球细胞凋亡状况呈不同程度好转,均以100 mg·kg^(-1)治疗组效果最为显著,葛根素100,50 mg·kg^(-1)治疗组肾小球细胞AI显著降低(P<0.05,P<0.01),肾脏组织中Bax mRNA表达明显下调且Bcl-2 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),Bax/Bcl-2明显降低(P<0.01),且100 mg·kg^(-1)治疗组AKT mRNA表达显著上调(P<0.01);Caspase-3蛋白表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。葛根素(100,50 mg·kg^(-1))治疗组大鼠血浆中CRP,TNF-α,IL-6水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),且100 mg·kg^(-1)治疗组IL^(-1)β,ICAM^(-1)含量水平明显降低(P<0.05
- 朱敏杰郝海英陈洁赵京梅郝晓娟
- 关键词：葛根素肾脏缺血再灌注细胞凋亡
- 葛根素对肾脏缺血再灌注大鼠肾脏氧化应激损伤的影响及其机制研究被引量：5
- 2016年
- 目的研究葛根素对肾脏缺血再灌注大鼠肾脏氧化应激损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、葛根素25 mg/kg组、葛根素50 mg/kg组、葛根素100 mg/kg组、银杏叶提取物(100 mg/kg)组;除假手术组外,其余各组均通过夹闭双侧肾蒂血管45 min后松夹恢复血流再灌注的方法制备肾缺血再灌注模型;再灌注后各给药组立即腹腔注射给药,每天1次,连续2周,假手术组和模型组给予等体积生理盐水。末次给药后,测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿酸(UA)及总抗氧化能力(T-AOC)水平;通过苏木精-尹红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;通过原位末端标记法(TUNEL)观察肾小球细胞凋亡状况并计算凋亡指数;检测肾脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过RT-PCR法测定肾脏组织中bax和bcl-2 mRNA表达量,并计算bax/bcl-2比值。结果葛根素50,100 mg/kg组血清BUN、SCr、UA含量均明显低于模型组(P均<0.05);各给药组大鼠肾脏组织病理形态学变化和肾小球细胞凋亡状况呈不同程度改善,以葛根素100 mg/kg组效果最为显著;葛根素50,100 mg/kg组大鼠肾小球细胞凋亡指数及肾脏组织中bax mRNA表达量、MDA含量及bax/bcl-2比值均明显低于模型组(P均<0.05),肾脏组织中SOD、CAT活性及bcl-2mRNA表达量均明显高于模型组(P均<0.05),其中葛根素100 mg/kg组血清T-AOC水平和肾脏组织中GSH-Px活性均显著高于模型组(P均<0.05)。结论葛根素对肾脏缺血再灌注大鼠肾脏氧化应激和细胞凋亡具有抑制作用;作用机制可能与其能够改善肾脏组织抗氧化酶活性、促进抗凋亡基因bcl-2表达、抑制促凋亡基因bax表达并降低bax/bcl-2比值有关。
- 朱敏杰
- 关键词：葛根素肾脏缺血再灌注氧化应激银杏叶提取物
- 内皮样细胞与脐静脉内皮细胞的比较被引量：1
- 2016年
- 背景:干细胞可诱导分化为内皮样细胞,用于治疗糖尿病下肢血管病变,但诱导后的内皮样细胞是否完全可以取代内皮细胞改善血管病变呢?内皮样细胞与内皮细胞有哪些异同?尚未得到解决。目的:探讨诱导后的内皮样细胞与脐静脉内皮细胞在形态、功能及活性方面的异同。方法:分离、培养脐带间充质干细胞及脐静脉内皮细胞,分别通过流式细胞仪及免疫组化进行鉴定,将分离出的脐带间充质干细胞用含10μg/L血管内皮生长因子、10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子及体积分数为2%胎牛血清的DMEM-LG/F12培养液向内皮样细胞方向诱导分化并用免疫组化进行鉴定,通过细胞迁移、活性物质测定及三维血管形成实验对内皮样细胞及内皮细胞进行比较。结果与结论:分离的脐带间充质干细胞经流式及免疫组化鉴定高表达间充质干细胞相关表面标志,脐静脉内皮细胞经免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。脐带间充质干细胞经诱导液诱导后,进行免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。细胞迁移、活性物质及三维血管形成实验均显示诱导后的内皮样细胞在功能及活性上与内皮细胞相似,且优于内皮细胞。
- 郝晓娟郝海英朱敏杰袁铮李伟伟陈洁朱旅云
- 关键词：脐带间质干细胞内皮细胞干细胞脐带间充质干细胞内皮样细胞血管形成
- 葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织的保护作用及其机制研究被引量：6
- 2016年
- 目的研究葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织的保护作用及其机制。方法将120只实验用大鼠随机数字表法分为6组:假手术组,模型组,葛根素高剂量(100 mg·kg^(-1))、中剂量(50 mg·kg^(-1))、低剂量(25 mg·kg^(-1))治疗组,银杏叶提取物(100 mg·kg^(-1))治疗组;采用夹闭双侧肾蒂血管45 min后松夹恢复血流灌注的方法建立肾缺血再灌注大鼠模型;再灌注后立即腹腔注射给药,每天1次,疗程2周。称量各组大鼠体质量、肾脏重量并计算肾脏指数,测定24 h尿量和24 h尿蛋白量(UPro),测定血清中血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿酸(UA)含量,通过苏木精-尹红(HE)染色观察肾脏组织形态结构改变;末端标记法(TUNEL)观察肾小球细胞凋亡状况,并计算凋亡指数(AI);测定肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,通过ELISA法测定血清中白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量水平。结果较模型组,葛根素高、中剂量组大鼠肾脏重量减轻且肾脏指数降低,24 h尿量和UPro均减少,血清中BUN、SCr、UA含量降低,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);葛根素治疗组大鼠肾脏组织病变和肾小球细胞凋亡状况呈不同程度改善,以葛根素高剂量组效果最为显著,并且葛根素高、中剂量组大鼠肾小球细胞凋亡指数较模型组降低(P<0.05,P<0.01);葛根素高、中剂量组肾脏组织中SOD、CAT活性升高且MDA含量降低,血清中IL-1和TNF-α含量降低,且高剂量组GSH-Px活性升高,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织具有保护作用;其机制可能与葛根素能够有效改善抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤、抑制炎性反应有关。
- 朱敏杰郝海英陈洁赵京梅郝晓娟
- 关键词：葛根素肾脏缺血再灌注
