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细菌纤维素膜作为生物支架构建组织工程角膜上皮的可行性研究被引量：2: 2016年; 背景目前角膜移植仍是治疗严重角膜疾病的主流方法，但角膜供体的不足使角膜移植疗法的应用受到限制。组织工程角膜上皮为角膜移植研究提供了新的途径，其中组织工程角膜的支架研究也是研究热点之一。细菌纤维素膜已作为生物材料广泛用于医药领域，其在组织工程角膜的支架研究方面的应用值得关注。目的以细菌纤维素膜作为支架，研究体外培养的兔角膜上皮细胞在细菌纤维素膜上生长情况，评估细菌纤维素膜的生物相容性。方法收集1月龄的新西兰白兔角膜上皮组织，采用组织块培养法对角膜上皮细胞进行培养和传代，采用免疫荧光技术检测细胞中CK-3的表达对培养的细胞进行鉴定。将第2代兔角膜上皮细胞消化后分别接种于细菌纤维素膜和培养皿，光学显微镜下观察和比较两组细胞的生长情况。于接种后第3天角膜上皮细胞在细菌纤维素膜上贴壁达到融合时加入10ml含5μl钙黄绿素-AM＋20μl溴乙非啶同二聚体的无菌PBS（LIVE／DEAD细胞活性毒性检测），评估2种培养法细胞的活性率。细菌纤维素膜上培养的细胞固定后，扫描电子显微镜下检查角膜上皮细胞的表面超微结构。结果兔角膜上皮细胞原代培养后1周左右细胞生长良好，呈铺路石样排列并融合，免疫荧光检测显示培养的细胞CK-3表达阳性。接种于细菌纤维素膜上的细胞生长状态良好，呈圆形或椭圆形，呈铺路石样排列，LIVE／DEAD染色后活细胞细胞核呈绿色荧光，细胞存活率为100％。扫描电子显微镜下细菌纤维素膜上培养的兔角膜上皮细胞呈椭圆形，可见膜表面丰富的页状突起、丝状伪足及细胞间连接，并可观察到处于分裂相的细胞。上皮细胞通过丝状伪足紧密贴附于细菌纤维素膜。结论兔角膜上皮细胞在细菌纤维素膜上生长状态良好，细菌纤维素膜有较好的生物相容性�; 曹静洁张琛赵少贞万怡灶胡达; 关键词：生物相容材料细菌纤维素

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胡达

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