柳芳
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 一种靶向VEGFR2的抗体融合蛋白的制备及其用途
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及肿瘤血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR3)抗体和MICA的融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将VEGFR2的全长抗体与NK细胞的活化型受体(NKG2D)的配体...
- 张娟王旻王佑富解伟柳芳任学艳
- 文献传递
- 一种靶向VEGFR2的抗体融合蛋白的制备及其用途
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及肿瘤血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR3)抗体和MICA的融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将VEGFR2的全长抗体与NK细胞的活化型受体(NKG2D)的配体...
- 张娟王旻王佑富解伟柳芳任学艳
- 文献传递
- 基于实验设计法针对抗VEGFR2-MICA融合蛋白进行发酵工艺优化（英文）
- 2017年
- 中国仓鼠卵巢细胞(CHO)是目前生产治疗性抗体的主要表达系统,该细胞的培养和抗体表达与培养条件密切相关。本实验室构建出了一种靶向VEGFR2单抗融合MICA的融合蛋白,具有良好的抗肿瘤活性,但是抗体产量较低,限制了该抗体的进一步研发和应用。为了探究适合该抗体的最佳发酵体系,本研究通过Minitab16.0正交法设计多种流加培养方式,探索了4种培养基、流加物以及培养条件对发酵细胞密度和抗体产量的影响,并优化出最佳的发酵方式,即以1×106cells/mL接种密度将细胞接种于商业培养基CDM4PerM Ab,每2 d加入12%(V/V)的流加物Boost2+Boost5。为保持抗体的稳定性和质量一致性,将此发酵方式扩大至3 L发酵罐以提高抗体的批次产量。最终抗体产量可达54.45 mg/L,并且Western blot实验结果验证了融合抗体装配的正确性。MTT实验结果表明JZB01能有效抑制HUVEC、MDA-MB-231和K562的细胞增殖,具有显著的抗血管生成作用以及比母体单抗更有效的抗肿瘤活性。综上,本研究开发出了一种有利于抗体生产的发酵工艺,能够满足实验室抗体研发需求。本实验室将进一步扩大该工艺适用的发酵规模,以满足抗体的临床前研究以及后续工业化生产。
- 柳芳王佑富唐铭英杜晓典张航王旻张娟
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞补料分批培养细胞密度
