杨红
- 作品数：17 被引量：16H指数：2
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- 艳山姜挥发油调控CaMKⅡ-VEGF信号抑制高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞增殖活化
- 目的：探讨艳山姜挥发油(EOFAZ)对高糖(HG)诱导大鼠视网膜Müller细胞(RMCs)增殖活化的保护作用及其可能的作用机制.方法：以HG(30 mmol/L,48h)诱导RMCs 建立细胞增殖模型,实验分为空白对照...
- 杨红杨宇张荣杨非赵爽
- 关键词：视网膜MULLER细胞高糖VEGF
- 糖通饮对糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的延缓作用被引量：2
- 2023年
- 目的探讨糖通饮延缓糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的作用机制。方法随机抽取10只大鼠为正常组,其余50只采用高脂高糖饮食联合STZ多次注射进行糖尿病肾病造模,造模成功后随机分为模型组,厄贝沙坦组,糖通饮低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠给予对应药物干预8周后,代谢笼收集大鼠24 h尿液,股动脉取血,处死大鼠并取双侧肾组织。检测各组大鼠肾脏肥大指数、空腹血糖、24 h尿微量白蛋白、血尿素氮、血肌酐;HE、Masson染色观察各组大鼠肾组织形态学变化;RT-qPCR法检测miRNA-21、TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN mRNA表达;Western blot法及免疫组化染色法检测肾组织TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN蛋白表达。结果与模型组比较,糖通饮各剂量组大鼠肾脏肥大指数、空腹血糖、24 h尿微量白蛋白、血尿素氮、血肌酐水平降低(P<0.05),糖通饮中、高剂量组改善效果优于糖通饮低剂量组(P<0.05);光镜下厄贝沙坦组与糖通饮各剂量组大鼠肾组织病理形态得到不同程度改善;糖通饮中、高剂量组与厄贝沙坦组miRNA-21表达及TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论糖通饮能够延缓糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化,其机制可能是通过对miRNA-21、TGF-β_(1)调控产生的。
- 陈洪民潘艳伶伏红颖杨红凌湘力
- 关键词：糖尿病肾病肾脏纤维化MIRNA-21
- 糖通饮经miRNA-21/TGF-β1/Smad信号转导对糖尿病肾病大鼠肾脏功能的保护作用被引量：4
- 2023年
- 目的基于miRNA-21/TGF-β_(1)/Smad信号转导探讨糖通饮(黄芪、生地黄、山药、山萸肉等)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^(-1))及糖通饮低、中、高剂量组(6.21、12.42、24.84 g·kg^(-1)),每组10只。采用高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素制备DN大鼠模型。模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续8周。采用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;全自动生化分析仪检测血清空腹血糖、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平;HE及PAS染色法观察肾组织病理改变;RT-PCR法检测肾组织miRNA-21、转化生长因子(TGF)-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达水平;Western Blot法检测肾组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达。结果与正常组比较,模型组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显升高(P<0.05);肾小球系膜细胞增生,基底膜增厚,肾小管萎缩,小管间质间均可见有炎性细胞的浸润,肾小球系膜区可见明显PAS阳性染色物质沉积;大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显上调(P<0.05)。与模型组比较,糖通饮各剂量组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显降低(P<0.05);肾小球和肾小管病变程度均出现减轻,PAS阳性染色物质均有不同程度减少;糖通饮中、高剂量组大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论糖通饮可能通过下调miRNA-21的表达,抑制TGF-β_(1)/Samd信号转导,从而有效降低细胞外基质进行性累积,从而改善DN大鼠的肾脏损伤,保护其肾脏功能。
- 潘艳伶陈洪民伏红颖杨红凌湘力
- 关键词：糖尿病肾病细胞外基质
- 基于UPLC-Q-Exactive-Plus-Orbitrap-MS技术分析蛇含委陵菜的化学成分被引量：1
- 2023年
- 目的:利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UPLC-Q-Exactive-Plus-Orbitrap-MS)技术对蛇含委陵菜的化学成分进行定性分析。方法:液相色谱采用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸-水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,进样量为2μL。质谱采用电喷雾离子源,以正、负离子交换模式检测,扫描范围为m/z 100~1500,扫描模式为Full MS/dd-MS^(2)。采用Compound Discoverer 3.1软件分析,参考数据库,同时结合对照品的碎片离子信息和相关文献鉴定化合物结构。结果:从蛇含委陵菜中共分析鉴定了99个化学成分,包括有机酸32个、黄酮22个、生物碱15个、苯丙素7个、氨基酸4个、三萜3个、多酚二内酯3个,其他成分13个。结论:该研究首次采用UPLC-Q-Exactive-Plus-Orbitrap-MS技术对蛇含委陵菜的化学成分进行定性分析,可为进一步研究其药效物质基础及质量控制方法提供参考依据。
- 张宝李悦陈婷婷朱帮会杨红杨红李勇军
- 关键词：化学成分
- 糖通饮靶向microRNA-21调控Smad7、PTEN抑制糖尿病肾病肾纤维化
- 2023年
- 目的:探讨糖通饮抑制糖尿病肾病肾纤维化的作用机制。方法:60只SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余采用高糖高脂饲料喂养联合STZ多次小剂量腹腔注射制备糖尿病肾病(DKD)大鼠模型,将造模成功的DKD大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(13.5 mg/kg)阳性对照组及糖通饮低(6.21 g/kg)、中(12.42 g/kg)、高(24.84 g/kg)剂量组,每组10只,灌胃给药,1次/d,共8 w。检测各组大鼠FBG、24 h尿mAlb;HE及Masson染色观察大鼠肾组织病理学变化;Western Blot检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、E-cadherin、FN、Vimentin、α-SMA蛋白表达;RT-PCR检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、FN、Vimentin α-SMA、E-cadherin mRNA及miRNA-21表达。体外实验对高糖状态下HBZY-1细胞进行miRNA-21过表达慢病毒转染并予糖通饮含药血清进行干预,Western Blot法检测细胞Smad7、PTEN、α-SMA蛋白表达,RT-PCR法检测细胞miR-21、Smad7、PTEN、α-SMA mRNA表达。结果:体内实验结果显示,与模型组比较,糖通饮能显著降低DKD大鼠肾组织FN、Vimentin、α-SMA mRNA及蛋白表达,显著升高Smad7、PTEN、E-cadherin mRNA及蛋白表达,显著降低miRNA-21表达及FBG、24h尿mAlb水平(P<0.05),改善DKD大鼠肾组织病理学变化。体外实验结果显示,经miRNA-21过表达慢病毒转染后,高糖状态下HBZY-1细胞中Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著降低,α-SMA mRNA及蛋白表达显著升高,糖通饮可使HBZY-1细胞中miRNA-21表达显著降低,Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著升高,α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:miRNA-21是糖通饮防治DKD的靶点之一,糖通饮可通过作用于miRNA-21进而良性调节其靶标Smad7、PTEN的表达,抑制糖尿病肾病肾纤维化。
- 潘艳伶潘艳伶陈洪民杨红杨红凌湘力
- 关键词：糖尿病肾病肾纤维化MICRORNA-21SMAD7PTEN
- 艳山姜挥发油调控CaMKⅡ信号改善糖尿病诱导视网膜Müller细胞自噬障碍
- 2023年
- 目的探讨艳山姜挥发油(EOFAZ)对糖尿病诱导视网膜Müller细胞功能障碍的保护作用及机制。方法视网膜Müller细胞使用不同剂量的EOFAZ进行预处理1 h后,采用高糖(30 mmol·L^(-1))孵育48 h,Western blot法检测细胞中自噬信号Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白的表达水平;qRT-PCR分析细胞中P62 mRNA、Beclin1 mRNA的转录水平,免疫荧光实验分析LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的表达。并进一步使用钙离子螯合剂BAPTA-AM及CaMKⅡ特异性抑制剂KN93孵育细胞,检测自噬信号LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、P62蛋白表达水平。使用自噬抑制剂氯喹(CQ)孵育细胞,检测细胞中CaMKⅡ及自噬信号LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白的表达。结果与高糖组相比,EOFAZ可明显上调Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的表达水平;使用BAPTA-AM及KN93孵育细胞与EOFAZ的作用类似。同时观察到EOFAZ与BAPTA-AM或KN93联合应用后,与EOFAZ单独作用的结果无明显差异。当EOFAZ与CQ共同孵育细胞后,EOFAZ对自噬相关蛋白下调的改善作用可被抑制,对CaMKⅡ的磷酸化水平无明显影响。结论EOFAZ对高糖诱导的视网膜Müller细胞自噬障碍具有明显的改善作用,其作用可能是通过抑制CaMKⅡ信号发挥的。
- 陈冰杨红杨惠杨红甘诗泉文波蒋朝晖文波蒋朝晖
- 关键词：糖尿病视网膜MÜLLER细胞
- 艳山姜挥发油对高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞VEGF表达的调控作用被引量：9
- 2018年
- 目的:研究艳山姜挥发油对高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞(RMCs)增殖的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将培养的RMCs分为正常对照组、甘露醇对照组、模型组、罗格列酮阳性对照组及艳山姜挥发油高(1μg/L)、中(0.5μg/L)、低(0.25μg/L)浓度组。给药48 h后,MTT法检测艳山姜挥发油对高糖诱导RMCs增殖的影响,苏木素-伊红染色(HE)进行形态学观察,划痕修复实验及transwell实验分别分析RMCs迁移能力和侵袭能力。免疫印迹法(Western blot)分析血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果:高糖作用后,RMCs增殖率、迁移及侵袭能力显著升高(P<0.01);VEGF蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,给予艳山姜挥发油及罗格列酮预保护能显著抑制RMCs的异常增殖(P<0.05),RMCs形态和数量趋近正常对照组,RMCs迁移和侵袭能力显著降低,同时显著下调了VEGF蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:艳山姜挥发油对高糖诱导下RMCs的增殖及VEGF蛋白的表达具有调控作用。
- 杨红林丹李晨陶玲沈祥春
- 关键词：高糖视网膜MÜLLER细胞增殖VEGF
- 基于PTEN/PI3K/Akt信号通路探讨糖通饮对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用
- 2024年
- 目的探讨糖通饮对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞损伤的保护作用。方法高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)多次注射建立DN大鼠模型,并随机分为模型组、厄贝沙坦组(13.5mg/kg)和糖通饮低、中、高剂量组(930、1860、3720mg/kg),另设置正常组,各组灌胃给予相应剂量药物,每天1次,连续8周。检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿蛋白(24-hUP)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平,HE染色观察各组大鼠肾组织病理形态学改变,透射电子显微镜观察肾足细胞超微结构变化,RT-qPCR法检测肾组织PTEN、PI3K、Akt、nephrin、podocin、CD2APmRNA表达,Westernblot法检测肾组织PTEN、PI3K、Akt、p-Akt、nephrin、podocin、CD2AP蛋白表达。结果与模型组比较,糖通饮各剂量组FBG、24-hUP、Scr、BUN水平降低(P<0.05,P<0.01),肾组织病理形态和足细胞超微结构得到改善,PTEN、nephrin、podocin、CD2APmRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-Akt蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);糖通饮中、高剂量组PI3K、AktmRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论糖通饮对DN大鼠肾组织足细胞有保护作用,其机制可能与调节PTEN/PI3K/Akt信号通路有关。
- 杨红潘艳伶陈洪民伏红颖唐露凌湘力
- 关键词：糖尿病肾病足细胞
- 成骨细胞膜片的构建及其生物学研究
- 杨红
- 1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制
- 2024年
- 目的 研究1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制。方法 使用高糖作用于小鼠胰岛β细胞以建立细胞铁死亡模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(0.25、0.5μmol/L)对胰岛β细胞中Fe2+水平的影响,并考察1,8-桉叶油素(0.5μmol/L)联合铁死亡诱导剂Erastin(20μmol/L)和抑制剂Ferrostatin-1(20μmol/L)后对胰岛β细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、环氧合酶2(COX2)蛋白表达的影响。采用高脂高糖饲料饲养联合腹腔注射链脲佐菌素构建2型糖尿病小鼠模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(50、200 mg/kg)对模型小鼠胰腺组织病理形态、铁含量以及GPX4、COX2蛋白表达的影响。结果 细胞实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,胰岛β细胞中Fe2+水平显著降低(P<0.05);GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05),COX2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且联合Ferrostatin-1后上述两种蛋白表达趋势相同,而联合Erastin后差异无统计学意义。动物实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,小鼠胰岛结构恢复完整,形态有所改善;胰腺组织中铁含量和COX2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞损伤具有明显的改善作用,其作用机制可能与降低细胞内铁沉积以及调控铁死亡相关蛋白有关。
- 杨红杨红陈永鑫姚喻霆甘诗泉刘佳陈婷婷张宝沈祥春沈祥春
- 关键词：2型糖尿病胰岛Β细胞
