郑斌
- 作品数:3 被引量:19H指数:3
- 供职机构:山西农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金:山西省科技重大专项山西省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 超量表达欧李ChPSY基因促进转基因番茄类胡萝卜素合成的研究被引量:5
- 2014年
- 将从欧李果实中分离的ChPSY cDNA经过序列分析、酶切之后,连接到植物表达载体PMV,构建了植物重组载体pBI-ChPSY,并通过根瘤农杆菌EHA105介导转化番茄,获得了12株抗性植株。PCR检测和Southern杂交结果显示,12株抗性植株均为阳性,说明外源基因ChPSY整合到转化植株的基因组中。RT-PCR分析表明,ChPSY基因在转化植株果实中得到表达。HPLC分析表明,转ChPSY基因番茄果实中总类胡萝卜素含量增加了1.62~3.04倍,八氢番茄红素、番茄红素、β–胡萝卜素和α–胡萝卜素含量分别增加了4.87、2.10、2.59和3.25倍。转化植株中内源类胡萝卜素合成基因的表达也受到广泛的影响。ChPSY基因超量表达有效促进了番茄果实中类胡萝卜素的合成和积累。
- 张建成王鹏飞郝燕燕杨淑一郑斌牛自勉杜俊杰
- 关键词:欧李番茄类胡萝卜素
- 欧李番茄红素β–环化酶基因ChLCYb的分离与功能鉴定被引量:3
- 2017年
- 利用RACE技术和RT-PCR相结合,从欧李[Cerasus humilis(Bge)Sok]果实中克隆获得长度为1798 bp的番茄红素β–环化酶(lycopeneβ-cyclase)基因ChLCYb的cDNA全长序列,开放读码框为1515 bp,编码503个氨基酸。序列分析发现,ChLCYb具有植物LCYb保守区(Plant LCYb conserved region)、FAD/NAD(P)结合区(Dinucleotide-binding signature)、"Cyclase motif 1"、"Cyclase motif 2"和"lycopeneβ-cyclase motif"等典型结构特征,在N–端存在1~84个氨基酸残基组成的转运肽信号序列,在85~106、209~227、373~391和460~480氨基酸区域包含4个跨膜结构域。荧光定量PCR结果表明,ChLCYb在叶中表达量最高,其次是幼果,在根中最低;在欧李果实发育过程中,果皮中ChLCYb表达量高于果肉,果皮中ChLCYb表达量先升高,在花后90 d左右表达量最高,然后呈缓慢下降趋势,而果肉中ChLCYb表达量相对平稳。ChLCYb表达模式与果皮和果肉中β–胡萝卜素含量的积累呈显著正相关(r=0.824和r=0.712,P<0.05)。利用大肠杆菌工程菌体系诱导表达了ChLCYb蛋白,并证实其可催化工程菌株中番茄红素向β–胡萝卜素转化,其转化效率达71.22%。在番茄中超量表达ChLCYb促进果实中番茄红素向β–胡萝卜素的转化和积累,转基因株系L-11号果实中的β–胡萝卜素含量高达692.18μg·g^(-1) DW,是非转基因对照的4.42倍。
- 张建成高利敏王鹏飞杨淑一郑斌王裕添杜俊杰
- 关键词:欧李基因克隆基因表达
- 喷施有机硒肥对苹果果实硒含量及品质的影响被引量:11
- 2016年
- 以长富2号为试材,通过叶面喷施不同稀释倍数的有机硒肥,研究外源硒肥对苹果果实品质及果实硒含量的影响。结果表明,与对照相比,喷施有机硒肥有利于提高苹果果实的单果质量、纵径、横径、着色面积以及可溶性固形物、总糖、蔗糖、Vc、硒含量和糖酸比;但喷施有机硒肥对果实硬度、色泽及光洁度影响不显著;喷施A2(500倍稀释液)有机硒肥可使果实可溶性固形物、Vc、硒含量和糖酸比、着色面积分别较对照显著提高11.38%,16.49%,220%和36.29%,10.64%;喷施A3(300倍稀释液)有机硒肥可使果实单果质量、纵径和横径分别较对照提高20.32%,16.64%和11.05%,但使果实总酸含量和果形指数较对照分别降低29.16%和7.69%;苹果叶面喷施有机硒肥的浓度与其单果质量、纵径、横径和硒含量呈显著正相关,而与果形指数和总酸含量呈显著负相关。因此,在果树生长期(5月下旬、7月上旬和8月上中旬)宜喷施500倍有机富硒叶面肥改善果实品质和增加果实硒含量。
- 李全郑斌刘丽王鹏飞杜俊杰郝燕燕张建成康海峰刘娟桃
- 关键词:苹果果实品质硒含量