陈璐瑶
- 作品数：15 被引量：13H指数：3
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省临床医学科技专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- NK细胞表面受体KIR2DS1 mRNA表达水平检测方法的建立
- 2019年
- 目的建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。方法以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象,针对KIR2DS1基因设计特异性引物及探针,构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系,并评价该实验方法的性能,包括:总符合率、重复性、灵敏度及仪器适用范围、技术人员再现性。结果以KIR-SSO基因定性分型法为金标准,通过检测其中35例样品,荧光定量PCR方法对KIR2DS1基因阳性及阴性检测率均为100%。在重复性试验中,选取Ct值分别为高、中、低值3个样品的批内、批间CV分别为0.09%~0.46%、0.71%~1.13%。该方法的灵敏度达10~2 copies/μL,且对拷贝数为10^2 copies/μL的3个样品进行5次重复试验的CV分别为5.37%、2.71%、5.51%。仪器比对结果显示,参比仪器ABI-7500与实验仪器LC-480之间的拟合直线回归方程为Y=0.9736X+0.1183(R^2=0.9619,R^2>0.95)。2名技术人员对10个KIR2DS1基因阳性样品的再现性比对试验结果显示其偏倚(%)均<±5%。结论建立了TaqMan-MGB荧光定量PCR检测KIR2DS1 mRNA表达水平的检测方法,其性能良好。
- 王甜李颖胡星张环环陈璐瑶鲍晓晶史进方何军
- 关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因聚合酶链反应
- 应用NGS技术的不同建库方法分析及确认HLA-B~*40:60等位基因
- 目的通过扩增子与捕获法文库构建法确认HLA-B~*40:60罕见等位基因,并比较2种建库法在结果分析中的差异。方法应用高通量测序(NGS)技术的2种建库方法,对患者和家庭成员行HLA基因分型及家系单体型分析,并采用基因测...
- 袁晓妮何军李杨张腾腾陈璐瑶鲍晓晶
- 人类白细胞抗原混合试剂筛查实验结果判断界限值的建立与验证
- 2024年
- 目的建立人类白细胞抗原(HLA)混合试剂筛查实验结果判断的界限值,并以HLA单抗原试剂确认实验结果进行验证。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院HLA配型实验室2017年10月至2021年12月2255份采用HLA混合试剂进行HLA抗体检测的血清样本结果。其中1139份同期采用HLA单抗原试剂-Ⅰ类试剂检测,1116份同期采用HLA单抗原试剂-Ⅱ类试剂检测。针对两种试剂包被的相同抗原,录入混合试剂中12个HLA-Ⅰ类微珠及5个HLA-Ⅱ类微珠的平均荧光强度(MFI)、标准化背景(NBG)比值及HLA单抗原试剂检测到的77种抗HLA-Ⅰ类抗体及35种抗HLA-Ⅱ类抗体的MFI值。以混合试剂各微珠包被抗原对应的单抗原试剂检测到抗体的阳性率将1139份及1116份样本中各混合试剂检测到的微珠的MFI值及NBG比值进行范围分段,并采用HLA单抗原试剂确认实验对HLA混合试剂筛查实验结果进行验证。结果建立了HLA混合试剂筛查实验17个微珠MFI值及NBG比值判断界限值表,HLA混合试剂1~17号微珠的MFI值为26.86~21925.58,NBG比值为0~434.65。按照包被抗原对应单抗原试剂的阳性检出率,将混合试剂各微珠的MFI值及NBG比值分为阳性区间、可疑阳性区间、可疑阴性区间、阴性区间。HLA混合试剂和HLA单抗原试剂对HLA-Ⅰ类抗体阳性检出率分别为87.5%(997/1139)、66.3%(755/1139);对HLA-Ⅱ类抗体阳性检出率分别为63.4%(707/1116)、44.9%(501/1116)。HLA混合试剂检测HLA-Ⅰ类抗体结果为可疑阴性、可疑阳性、阳性样本中,HLA单抗原试剂的阳性检出率分别为14.9%(17/114)、41.3%(145/351)、91.3%(590/646);HLA混合试剂检测HLA-Ⅱ类抗体结果为可疑阴性、可疑阳性、阳性样本中,HLA单抗原试剂的阳性检出率分别为15.5%(58/375)、26.5%(81/306)、88.8%(356/401)。结论本研究建立了HLA混合试剂筛查实验判断各抗原微珠MFI值及NBG比值的界限值,并经HLA单抗原试剂确认实验进行验证。HLA混合试
- 陈璐瑶鲍晓晶袁晓妮郁玲莹何军
- 关键词：人类白细胞抗原抗体
- 血液病患者产生抗HLA抗体的危险因素分析被引量：1
- 2024年
- 目的在造血干细胞移植前的血液病患者中,探究抗人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)抗体产生的危险因素。方法收集2016-2018年间本院1008名血液病患者在移植前采用Luminex技术平台进行抗HLA抗体检测的结果及临床数据,并对其进行统计学分析。结果1008名患者的抗HLA抗体总体阳性率为24.08%。多因素分析显示,与抗HLA抗体产生相关的独立危险因素包括年龄≥30岁(P=0.046,OR 1.467,95%CI 1.007-2.136)、疾病确诊至抗体检测的时间≥41d(P=0.000,OR 1.830,95%CI 1.306-2.565)、初诊PLT计数<20×109/L(P=0.020,OR 1.543,95%CI 1.072-2.220)、有妊娠史(P=0.000,OR 5.187,95%CI 3.689-7.293)、入院前有输血史(P=0.001,OR 1.762,95%CI 1.257-2.470)和入院后PLT输注总量≥30U(P=0.000,OR 2.352,95%CI 1.638-3.376)。其中年龄≥30岁(P=0.023,OR=1.839,95%CI 1.088-3.108)、妊娠史(P=0.042,OR=5.258,95%CI 1.062-26.038)分别与抗HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体的产生有关;疾病确诊至抗体检测时间≥41d(P=0.000,OR=2.873,95%CI 1.612-5.119)、初诊PLT计数<20×109/L(P=0.008,OR=2.164,95%CI 1.225-3.822)、妊娠史(P=0.002,OR=6.734,95%CI 1.993-22.751)、入院前的输血史(P=0.001,OR=2.746,95%CI 1.531-4.925)、入院后PLT输注>30U(P=0.006,OR=3.459,95%CI 1.416-8.451)与抗HLA-Ⅰ+Ⅱ类抗体的产生有关。结论年龄较大、病程较长、PLT计数较低、有妊娠史和输血史、PLT输注总量较多,均是影响抗HLA抗体产生的危险因素。因此,对移植前血液病患者宜根据情况检测抗HLA抗体,这对于指导供者选择、监测抗体变化和改善移植预后具有重要价值。
- 季开王澜陈璐瑶鲍晓晶袁晓妮吴小津何军
- 关键词：人类白细胞抗原造血干细胞移植血液病学输血
- 高致敏单倍体造血干细胞移植患者采用蛋白A免疫吸附联合利妥昔单抗行脱敏治疗的疗效及安全性
- 2024年
- 目的探究高致敏单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)患者移植前行蛋白A免疫吸附(PAIA)联合利妥昔单抗(RTX)脱敏治疗的疗效及安全性。方法回顾性分析2021年3月至2023年6月苏州大学附属第一医院和苏州弘慈血液病医院收治的高致敏haplo-HSCT患者56例, 移植前行PAIA联合RTX脱敏治疗, 吸附前后监测HLA抗体种类数量和平均荧光强度(MFI)、体液免疫和吸附过程的不良反应及100 d内的生存情况。结果仅含HLA Ⅰ类抗体的患者接受PAIA治疗后中位MFI由7 859(3 209~12 444)降至3 719(0~8 275)(P<0.001), HLA Ⅰ+Ⅱ类抗体的中位MFI由5 476(1 977~12 382)降至3 714(0~11 074)(P=0.035), 其中抗供者特异性抗体阳性患者的中位MFI由8 779(2 697~18 659)降至4 524(0~15 989)(P<0.001)。所有患者HLA-A、B、C、DR、DQ抗体种类数量在PAIA治疗后均下降, 差异均有统计学意义(A、B、C、DR:P<0.001, DQ:P<0.01)。PAIA治疗前后体液免疫监测显示IgG和补体C3数量显著下降(P值分别为<0.001和0.002)。44例患者接受了移植后HLA抗体监测, 总体MFI和抗体种类数量均下降, 但有5例患者出现低MFI的新生抗体, 有9例持续高MFI, 移植后100 d总生存率是83.8%, 100 d内无病生存率为80.2%, 100 d内非复发死亡率为16.1%, 移植后100 d复发的累积发生率为4.5%。结论 PAIA联合RTX对haplo-HSCT前高敏患者的脱敏治疗有一定的疗效, 安全性良好。
- 李玲朱文娟朱倩周士源马超王俊胡晓慧韩悦王荧唐晓文马骁陈苏宁仇惠英陈璐瑶何军吴德沛吴小津
- 关键词：免疫吸附技术造血干细胞移植脱敏治疗利妥昔单抗
- 讨论HLA-DQA1等位基因频率及相合度在供患者HLA-A、B、C、DRB1、DQB1 (10/10)全相合基础上的临床价值
- 目的 研究HLA-A、B、C、DRB1、DQB1全相合基础上无关供患者间HLA-DQA1等位基因频率分布情况及相合程度.方法 采用SS0P和高分辨High Res.SSP方法对127对HSCT患者和无关供者共计254份标...
- 赵勤勤李杨潘芝娟李翎婕陈璐瑶何军
- HLA-10／10全相合供受者间DQA1等位基因频率分布及其在造血干细胞移植中的临床应用价值被引量：1
- 2015年
- 目的研究在HLA—A、B、C、DRB1、DQB1（10／10）全相合中供受者间HLA—DQA1高分辨等位基因频率分布及在临床中的应用价值。方法采用SSOP和SSP方法对非血缘HIA-10／10全相合造血干细胞移植的127对患者和供者，共计254份样本进行HLA—DQA1高分辨等位基因分型。结果在127对供患者中36对采用SSOP方法可直接判断分型结果，91对需采用高分辨SSP方法解决模棱两可的分型结果，除5对供患者HLA—DQA1等位基因错配但抗原相合外其余均为全相合。在127例无关供者中共检出16种DQA1等位基因，基因频率从高到低分别为DQA1^＊02：01（19．3％），DQAI^＊01：02（19．3％），DQA1^＊03：02／03（17．0％），DQA1^＊01：03（9．8％），DQA1^＊06：01（9．1％），DQA1^＊05：01（7．1％），DQA1^＊05：05（5．9％），DQA1^＊03：01（4．7％），DQA1^＊01：04（2．4％），DQA1^＊01：05（2．O％），DQA1^＊01：01（1．2％），DQA1^＊05：03（0．8％），DQA1^＊05：08（0．8％），DQA1^＊04：01（0．4％），DQA1^＊05：06（0．4％）。患者与供者HLA—DQA1等位基因频率分布无统计学差异，但在患者样本中发现一例新基因提示为DQA1^＊01：XX。在DQA1与DQm的单倍型频率与连锁不平衡分析中，最常见的单倍型是DQA1^＊02：01—DQB1^＊02：02（16．1％），其次为DQA1^＊03：02／03-DQB1^＊03：03（11．8％），DQA1^＊01：03．DQB1^＊06：01（9．1％），且DQA1^＊02：01与DQB1^＊02：02、DQA1^＊03：02与DQB1^＊03：03、DQA1^＊01：03与DQB1^＊06：01、HIA—DQA1^＊06：01与DQB1^＊03：01、DQA1^＊05：01与DQB1^＊02：01之间均存在强连锁关系（P〈0．001）。结论HLA-OQA1和DQm存在显著的连锁不平衡性，且DQA1的基因多态性远低于DQB1基因多态性，因此，在无关供者和患者HLA-10／10全相合基础上增加DQA1等位基因分型不能为造血干细胞移植供者选择提供更多的指导，但在HLAⅡ类�
- 赵勤勤李杨潘芝娟李翎婕陈璐瑶何军
- 关键词：基因频率
- 应用国际间能力验证实验结果设立HLA抗体判定界限值及临床应用
- 目的:特异性抗人类白细胞抗原(HLA)抗体试剂(SAB)测定的抗体MFI值(mean fluorescence intensity,MFI)仅是一个荧光值,实验室之间的MFI值检测可比性差,每个实验室需有自己的判定界限值...
- 陈璐瑶何军袁晓妮鲍晓晶李杨张腾腾姜雪
- 关键词：抗体能力验证计划
- HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1单倍型频率的临床意义被引量：3
- 2019年
- 目的研究单倍型移植中HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1单倍型频率,并探讨其临床意义。方法回顾性分析2012-2017年在苏州大学附属第一医院拟行亲缘HLA单倍型移植的3568个家系,同时采用基因测序(PCR-SBT)和寡核苷酸探针杂交(PCR-SSOP)进行HLA基因分型检测,并进行家系单倍型分析。结果全部3568个家系可分为3种情况:组1为1422个完整家系,组2为1310个仅有患者与一个亲代或子代的家系,组3为836个仅有患者与一个HLA≥5/10基因型相同同胞的不完整家系。组1和组2合并统计后建立单倍型总频率表。总频率≥0.1%的单倍型中:A*11∶01-B*40∶01-C*03∶04-DRB1*11∶01-DQB1*03∶01、A*02∶07-B*51∶01-C*14∶02-DRB1*09∶01-DQB1*03∶03的单倍型频率在组1和组2间差异有统计学意义(P值分别为0.029、0.033);A*11∶01-B*46∶01-C*01∶02∶01G-DRB1*09∶01-DQB1*03∶03的频率在组1和组3间差异有统计学意义(P=0.035);A*02∶01-B*40∶01-C*07∶02-DRB1*09∶01-DQB1*03∶03的频率在组1和组2、组1和组3间差异均有统计学意义(P值分别为0.034、0.034);A*24∶02-B*13∶01-C*03∶04-DRB1*12∶02-DQB1*03∶01的频率在组2和组3间差异有统计学意义(P=0.046)。结论本研究建立了HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1单倍型频率总表,同时列举完整家系单倍型研究中分析基因型相同但单倍型完全不合,却被拟作为潜在供者移植的临床病例。家系不完整的供受者可通过本表进行单倍型分析,结合家系中其他成员HLA分型检测结果,为选择最佳供者及检索非血缘供者提供参考。
- 陈璐瑶李杨张腾腾鲍晓晶袁晓妮李颖李翎婕杨天杰何军
- 关键词：人类白细胞抗原单倍型频率家系分析
- 应用国际间能力验证实验结果设立HLA抗体判定界限值及临床应用被引量：2
- 2021年
- 目的通过美国组织相容性和免疫遗传学委员会(ASHI)组织的国际间能力验证(PT)结果,设立抗人类白细胞抗原(HLA)抗体的判定界限值。方法在液相芯片(Luminex)技术平台采用Single Antigen试剂检测HLA抗体,回顾分析2012年至2019年间江苏省血液研究所HLA配型实验室参加ASHI组织的11次共55个质控样本的HLA抗体PT结果。结果在79种HLA-Ⅰ类抗体中检测到HLA-A、B、Cw抗体21、43、15种类型;44种HLA-Ⅱ类抗体中检测到HLA-DRB1、DQB1、DPB1抗体18、7、19种类型。分析每个质控样本中本实验室上报的所有HLA抗体的中位荧光强度(MFI)值,以及ASHI汇总的同期多中心对该特异性抗体判断其阴/阳性结果的符合率,并以95%、90%、80%、79%~50%、<50%的符合率范围,将MFI值由高到低排列成HLA抗体可能饱和度值、阳性决定值、阳性判定界限值、可疑阳性参考值及可疑阴性参考值的区间,建立了本实验室HLA抗体的判定界限值表,其中42种HLA-Ⅰ类、Ⅱ类特异性抗体类型数据完整。当实验室检测HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体的MFI值处于判定界限值表中80%及以上符合率时,可用于判断检测到HLA抗体。当HLA抗体的MFI值达到阳性决定值时可能对临床诊断及治疗有一定的指导意义。当抗体达到饱和值、处于可疑阳性或可疑阴性参考判定界限值时,可提示临床需要进行HLA抗体检测的动态随访。结论通过国际间PT的实验结果制定实验室HLA抗体的判定界限值,并对实验结果的判读及临床诊断和治疗均有参考价值,故移植中心应重视HLA抗体检测的室间比对质量控制工作。
- 陈璐瑶袁晓妮鲍晓晶李杨张腾腾杨天杰姜雪何军
- 关键词：人类白细胞抗原抗体阈值
