郭剑
- 作品数：12 被引量：47H指数：3
- 供职机构：河北大学附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-425在胃癌组织的表达及对胃癌细胞株BGC-823凋亡、自噬的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察微小RNA（miRNA，miR）-425在胃癌组织和细胞株的表达，并探讨miR-425对胃癌BGC823细胞凋亡、自噬的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测60例胃癌组织和癌旁组织miR-425表达，分析其与临床病理参数的关系，并检测miR-425在7种胃癌细胞株（HGC-27、BGC-803、MKN45、MGC-823、SGC-7901、NCL-N87、AGS）及正常胃黏膜细胞GES-1的表达。选取miR425表达水平最高的胃癌细胞瞬时转染miR-425inhibitors。Real-timePCR检测miR-425mRNA表达。流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位。Westernblot检测凋亡、自噬相关蛋白表达。结果胃癌组织miR-425相对表达水平为0．804-0．13，较癌旁组织（0．28±0．04）显著升高（P〈0．05），且其表达与TNM分期、细胞分化程度、肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。BGC-803细胞中miR-425表达水平明显高于HGC-27、MKN-45、MGC-823、SGC-7901、NCL-N87、AGS及GES-1细胞（P〈0．05）。与对照组和空白转染组比较，转染miR-425inhibitors能够明显诱导BGC-803细胞凋亡并出现G1期阻滞，同时线粒体膜电位明显降低（P〈0．05）；且B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）、p62蛋白表达明显下调，B细胞淋巴瘤／白血病-2相关x蛋白（bax）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-9、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclinl蛋白表达明显上调（P〈0．05）。结论miR-425在胃癌组织和细胞株呈过表达，下调miR-425表达能够通过线粒体途径诱导胃癌BGC-803细胞凋亡和自噬。
- 张卓奇王志宇郭剑问明史建伟檀碧波张爱民
- 关键词：胃癌脱噬作用自噬
- 不同手术方式治疗大肠癌对患者围手术期的影响分析被引量：3
- 2015年
- 目的比较开放式手术与腹腔镜下大肠癌根治术治疗大肠癌患者围手术期营养状况,从而选择最佳治疗方案以改善其预后。方法 90例大肠癌患者按照随机数字表法分组为对照组与观察组,分别为45例。对照组采用传统开放式手术治疗;观察组采用腹腔镜辅助大肠癌根治术治疗。比较2组患者围手术期情况和术后恢复及并发症、手术前后营养状况及生活质量,随访1年,统计2组患者生存及复发例数。结果观察组平均手术时间、术中平均出血量、术后排气时间及平均住院时间分别为(141.2±26.5)min、(26.4±5.8)ml、(26.1±8.7)h、(9.8±3.9)天,明显少于对照组[(171.5±29.7)min、(148.6±16.5)ml、(37.8±7.6)h、(14.9±6.4)天],具有统计学意义,P<0.05;观察组腹腔并发症和切口并发症者分别为3例、1例,并发症发生率分别为6.7%、2.2%,明显低于对照组[12例、7例,26.7%、15.6%],具有统计学意义,P<0.05。观察组术后各项血清指标与术前比较,P>0.05;对照组术后各项血清指标与术前比较,P<0.05;观察组术后各项血清指标均明显高于对照组,具有统计学意义,P<0.05。2组治疗后各项生活质量均较术前明显改善,且观察组各项生活质量改善优于对照组,具有统计学意义,P<0.05。结论与传统开放式手术治疗相比,应用腹腔镜辅助大肠癌根治术治疗大肠癌患者,可减少术后并发症,改善其营养状况,从而促进其康复,提高其生活质量。
- 郭剑周淑卿李杰陈渊郑少鹏
- 关键词：大肠癌开放式手术大肠癌根治术营养状况
- 细胞黏附分子4在胃癌组织的表达及其对胃癌细胞株BGC-823凋亡、自噬、侵袭转移的影响被引量：1
- 2017年
- 目的观察细胞黏附分子4（CADM4）对胃癌BGC823细胞凋亡、自噬、侵袭转移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测60例胃癌组织和癌旁组织CADM4表达，分析其与临床病理参数的关系；检测CADM4在7种胃癌细胞株（HGC-27、BGC-823、MKN-45、MGC-803、SGC-7901、NCL-N87、AGS）及正常胃黏膜细胞GES-1的表达。以CADM4过表达慢病毒载体（LV-CADM4）瞬时转染BGC-823细胞，Real-time PCR检测CADM4 mRNA表达。流式细胞仪检测凋亡率及线粒体膜电位；Transwell侵袭实验、细胞划痕实验检测细胞侵袭转移能力；Western blot检测凋亡、自噬、侵袭转移相关蛋白表达。结果胃癌组织CADM4 mRNA表达水平为0.29±0.03，较癌旁组织（1.20±0.15）显著降低（P＝0.000），且其表达与TNM分期、肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P＝0.000）。BGC-823细胞中CADM4表达水平明显低于HGC-27、MKN-45、MGC-803、SGC-7901、NCL-N87、AGS及GES-1细胞（P＝0.000）。与空白对照组和阴性病毒组比较，转染LV-CADM4能够明显提高BGC-823细胞的凋亡率（均P＝0.000），同时线粒体膜电位及细胞侵袭转移能力明显降低（P＝0.000）；且B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、p62、基质金属蛋白酶（MMP）-9蛋白表达明显下调，bcl-2相关X蛋白（bax）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-9、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin1蛋白表达明显上调（均P＝0.000）。结论CADM4在胃癌组织和细胞株中表达下调，上调CADM4能够通过线粒体途径诱导胃癌BGC-823细胞凋亡和自噬，并降低细胞侵袭转移能力。
- 张卓奇问明郭剑史建伟王志宇檀碧波张爱民
- 关键词：胃癌脱噬作用自噬
- 胃癌组织中细丝蛋白A表达变化及其对患者预后的影响被引量：3
- 2019年
- 目的观察细丝蛋白A(FLNa)在胃癌组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测FLNa在51例胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达情况,并分析胃癌组织中FLNa表达与患者临床病理特征及生存预后的关系。结果胃癌组织和正常胃黏膜中FLNa阳性表达率分别为47.1%(24/51)、90.2%(46/51),两者比较P=0.000。胃癌组织中FLNa的表达与患者是否存在肝转移、淋巴结转移以及肿瘤浸润深度有关(P均<0.05)。Cox回归分析结果显示,FLNa表达是影响胃癌患者术后生存的独立因素(P=0.001,95%CI:0.001～0.159)。FLNa阳性、阴性表达者生存期分别为(60.9±2.1)、(23.8±2.2)月,两组比较P=0.000。结论 FLNa在胃癌组织中表达降低,与胃癌的形成和发展密切相关,并且可作为预后判断的重要指标。
- 崔国才史建伟彭鑫宇郭剑刘小锐李杰
- 关键词：胃肿瘤细丝蛋白A免疫组织化学预后
- P13K/AKT/mTOR信号通路在胃癌组织中的表达及意义被引量：11
- 2016年
- 目的探讨P13K/AKT/mTOR信号传导通路在胃腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学法及Western blot方法检测p-AKT及p-mTOR在胃癌(100例)、癌旁(80例)及胃组织正常黏膜(100例)中的表达水平,并分析其与常见病理学指标之间的关系,探讨两者之间的相关性。结果p-AKT在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中的阳性表达率分别为72%、30%和24%,p-mTOR在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中的阳性表达率分别为77%、51%和19%,均呈降低趋势,与Western blot结果一致。p-AKT在胃癌中的表达与肿瘤分化程度有关,p-mTOR在胃癌中的表达与淋巴结转移有关。p-AKT及p-mTOR在同一例胃癌患者中表达呈显著正相关。结论 P13K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌组织中过表达,可能对胃癌的生物学行为和预后的评估起到一定作用。
- 张刚郭剑李杰郑少鹏李萍赵醒张爱民
- 关键词：胃癌WESTERNBLOTP-AKTP-MTOR
- PTEN基因对MKN45胃癌细胞系p-AKT和p-ERK表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨PTEN基因对MKN45胃癌细胞增殖及磷酸化的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)和磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响,分析可能的作用机制。方法体外培养胃癌细胞株MKN45,通过质粒转染技术建立过表达PTEN的稳定细胞株MKN45/PTEN,空载体细胞株作为阴性对照组,未转染细胞为正常对照组。应用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测PTEN的转染效果,MTT法检测细胞的增殖率,蛋白质印迹法(Western blot)检测p-AKT和p-ERK蛋白水平的表达变化。结果 PTEN在MKN45/PTEN细胞中表达量明显高于阴性对照组和正常对照组(P<0.05)。PTEN在72 h和96 h明显抑制MKN45细胞的增殖,细胞增长缓慢,与阴性对照组和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。MKN45/PTEN组p-AKT和p-ERK的相对表达量显著低于阴性对照组及正常对照组(P<0.05)。结论 PTEN对胃癌细胞的体外增殖有抑制作用,可能通过p-AKT和p-ERK发挥作用。
- 陈渊郝鑫郭剑李杰张刚张爱民张卓奇
- 关键词：胃癌BLOTP-AKTP-ERK
- 长链非编码RNA LINC01235通过调控磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路影响胃癌进展的机制被引量：1
- 2021年
- 目的探讨长链非编码RNA LINC01235在胃癌中的表达及其作用机制。方法肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库检测LINC01235在胃癌及癌旁组织的表达;分析LINC01235对胃癌患者预后的价值;收集新鲜胃癌及癌旁组织验证生物信息学结果。调控人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901中LINC01235表达,检测细胞增殖、侵袭和转移能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测调控LINC01235的表达对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。应用SAS 9.4软件进行统计学分析,t检验分析实验结果。结果TCGA数据分析表明与癌旁组织比较,LINC01235在胃癌组织中的表达水平高于癌旁组织(6.340±1.705比3.115±1.558,Z=10.026,P<0.05),且LINC01235高表达的患者预后较差(χ^(2)=6.902,P<0.05)。临床标本验证结果与生物信息学结果相符。蛋白质印迹结果显示,胃癌组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化雷帕霉素靶(p-mTOR)的表达水平高于癌旁组织(p-Akt为1.154±0.459比0.326±0.150,t=9.392,P<0.01;p-mTOR为0.665±0.310比0.270±0.121,t=6.501,P<0.01)。在MGC-803细胞中上调LINC01235后细胞的增殖能力显著比对照组增强(24 h为0.203±0.027比0.142±0.042,t=2.993,P<0.05;48 h为0.503±0.106比0.247±0.064,t=5.064,P<0.01;72 h为0.917±0.118比0.55±0.11,t=5.573,P<0.01)、侵袭和转移能力显著比对照组增强(139.333±22.151比57.833±15.639,t=-7.362,P<0.01;111.667±15.016比73.667±14.024,t=-4.530,P<0.01);在SGC-7901细胞中抑制LINC01235的表达后细胞的增殖能力显著比对照组降低(48 h为0.425±0.133比0.667±0.091,t=-3.678,P<0.01;72 h为0.565±0.157比0.945±0.200,t=-3.661,P<0.01)、侵袭和转移能力显著比对照组降低(50.667±13.231比141.167±15.224,t=10.991,P<0.01;57.667±14.348比166.167±25.631,t=9.048,P<0.01)。在MGC-803细胞中上调LINC01235表达后p-Akt、p-mTOR、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)表达比对照组增强(p-Akt为0.851±0.138比0.366±0.138,
- 程华张卓奇张牙李杰彭鑫宇问明郭剑张爱民
- 关键词：胃癌长链非编码RNA
- PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p-AKT及p-mTOR在胃癌组织中的表达及意义被引量：14
- 2016年
- 目的探讨PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化及Western blot法检测p-AKT及p-mT OR在胃癌(100例)、癌旁(80例)及正常胃黏膜(100例)组织中的表达,并分析两者表达的相关性及与临床病理特征的关系。结果p-AKT在胃癌、癌旁及正常胃黏膜组织中的阳性率分别为72%、30%、24%,p-mT OR在胃癌、癌旁及正常胃黏膜组织中的阳性率分别为77%、51%、19%,均呈降低趋势,与Western blot结果一致。p-AKT、p-mTOR在胃癌组织中的表达与肿瘤分化程度有关。p-AKT及p-mTOR在胃癌组织中的表达呈正相关。结论 PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌组织中过表达,可能对胃癌的生物学行为和预后的评估起一定作用。
- 张刚郭剑郝鑫李萍李杰
- 关键词：胃肿瘤WESTERNBLOTP-AKTP-MTOR
- 长链非编码RNA HCG22调控蛋白激酶B/P70S6激酶通路对胃癌细胞生物学行为的影响
- 2022年
- 目的探讨长链非编码RNA HCG22(lncRNA HCG22)对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常胃上皮细胞GES-1和胃癌MGC-803、SGC-7901细胞lncRNA HCG22的表达;采用慢病毒过表达和对照载体感染MGC-803细胞, 分为过表达组(LV-HCG22-OE)、对照组(LV-NC)和空白组(Blank);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测24、48、72 h的吸光度值, 集落形成实验检测细胞集落形成率;划痕愈合实验检测迁移能力;流式细胞术分析周期和凋亡;免疫荧光观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)荧光;蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡蛋白、自噬标志物以及蛋白激酶B(Akt)/P70S6激酶(P70S6K)通路蛋白的变化。两组间比较采用t检验。结果 lncRNA HCG22在MGC-803(0.026±0.011)和SGC-7901的表达(0.048±0.012)低于GES-1细胞(1.000±0.123, t=7.871、7.694, P<0.01)。上调lncRNA HCG22后, 抑制细胞的增殖能力, LV-HCG22-OE组的吸光度值低于LV-NC组(24 h为0.295±0.015比0.501±0.014, 48 h为0.526±0.012比0.952±0.048, 72 h为0.929±0.016比1.381±0.020, t=10.170、8.614、17.800, P<0.01);集落形成率[(36.250±2.000)%比(53.880±3.375)%, t=4.493, P<0.05]和迁移能力均低于LV-NC组[24 h为(32.940±1.315)%比(50.220±1.120)%, 36 h为(63.970±1.500)%比(79.650±1.000)%, t=10.010、8.698, P<0.05]。LV-HCG22-OE组G2/M期细胞比例增加, G1期减少;细胞凋亡率增加(17.980±3.120比3.667±0.997, t=4.372, P<0.05)。共聚焦显微镜观察到Caspase-3荧光信号增加, Western blot结果显示, LV-HCG22-OE组B细胞淋巴瘤因子-xL(bcl-xL)和p62蛋白水平低于LV-NC组(t=7.686、5.376, P<0.05), B细胞淋巴瘤因子-2相关X蛋白(bax), 微管相关蛋白1轻链3B(LC3-Ⅱ)蛋白水平高于LV-NC组(t=9.311、4.768, P<0.05);LV-HCG22-OE组磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化P70S6激酶(p-P70S6K)蛋白水平低于LV-NC组(p-Akt/Akt为0.426±0.085比0.891±0.012, t=5.395, P<0.05;p-P70S6K/P70S6K为0.605±0.019比1.027±0.072, t=5
- 张牙张卓奇问明郭剑冯长平彭鑫宇李杰张爱民
- 关键词：胃癌长链非编码RNA生物学行为
- p-AKT,p-ERK在胃癌组织中表达及其意义被引量：5
- 2016年
- 目的探讨P13K/AKT及ERK信号通路在胃癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法及Western blot方法检测p-AKT、p-ERK在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中的表达情况。结果 p-AKT及p-ERK在胃癌、癌旁及胃组织正常黏膜中均有不同程度的表达,三组相比差异具有统计学意义。Western-blot结果显示,p-AKT及p-ERK蛋白表达与分化程度相关。结论 p-AKT、p-ERK在胃癌中均高表达,二者的表达均与肿瘤组织分化程度相关,联合检测对胃癌的预防和治疗具有重要意义。
- 马志恒陈建新蒋海存董冬张刚郭剑
- 关键词：胃癌免疫印迹法P-AKTP-ERK
