陈坤
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山西医科大学第一医院更多>>
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- Vaspin通过Wnt/β-catenin信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化被引量：4
- 2016年
- 目的观察vaspin对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（ BMSCs）增殖及成骨分化的影响及其潜在机制。方法采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs。成骨诱导液联合不同浓度vaspin （10、50、100 ng/ml）作用于BMSCs,分别于24、48、72 h采用CCK8法检测细胞增殖水平；于第7天用实时荧光定量聚合酶链反应（ RT-PCR）检测ALP、Runx2、β-catenin mRNA表达水平,Western印迹法检测β-catenin、Runx2蛋白表达水平。21天采用茜素红染色矿化结节及定量检测；在100 ng/ml vaspin中加入Wnt通路特异性阻断剂DKK1（1μg/ml）后,RT-PCR及Western印迹法再次检测上述指标表达水平。结果 Vaspin对大鼠BMSCs增殖无显著影响（P〉0.05）,可上调促进BMSCs成骨分化基因ALP、Runx2及β-catenin mRNA表达及β-catenin、Runx2蛋白表达,茜素红染色矿化结节呈红棕色且增多,定量检测OD值,vaspin组高于对照组（P〈0.05）。加入阻断剂DKK1后ALP、Runx2及β-catenin mRNA表达水平均显著下降（均P〈0.05）, Runx2及β-catenin蛋白表达水平亦显著下降。结论 Vaspin可通过Wnt/β-catenin信号通路促进BMSCs成骨分化。
- 高飞陈坤张燕杨静
- 关键词：VASPIN骨髓间充质干细胞WNT/Β-CATENIN成骨分化
- Wnt信号通路对vaspin诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响被引量：5
- 2015年
- 目的研究Wnt/胞内β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路对脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法体外培养4周龄雄性SD大鼠的BMSCs,分为4组:对照组,实验1、2、3组,分别加入成骨诱导液、含50 ng/ml、100 ng/ml vaspin的成骨诱导液及含100 ng/ml vaspin成骨诱导液+Dickkopf1(DKK1,Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂),于成骨诱导第7天酶标仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨分化相关基因:ALP、核心蛋白结合因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)mRNA及β-catenin的表达水平。结果体外培养BMSCs,并加入不同浓度vaspin诱导后,实验1、2组ALP活性较对照组增加,并呈vaspin浓度依赖性(P均<0.05);成骨分化基因ALP、RUNX2、OSX mRNA表达水平增加,亦呈vaspin浓度依赖性(P均<0.05);β-catenin表达水平仅在加入100 ng/ml vaspin时升高(P<0.05);加入DKK1后(实验3组),ALP活性及成骨分化各基因表达水平较实验2组(100 ng/ml vaspin)显著下降(P均<0.05),β-catenin表达水平也显著下降(P<0.05)。结论 Vaspin可通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠BMSCs成骨分化。
- 陈坤高飞
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化
