孙魁
- 作品数:12 被引量:26H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 可视化环介导恒温扩增技术在日本血吸虫感染性钉螺检测中的应用研究被引量:1
- 2016年
- 目的建立一种方便、快速且灵敏度高、特异性强的日本血吸虫(SJ)感染性钉螺检测方法。方法 PCR扩增SJ基因片段,并将其克隆到T载体构建阳性参照物;建立SJ核酸恒温扩增反应体系,并通过检测经等比稀释的阳性参照物和相关样本基因组DNA分析其灵敏度和特异性;设计相应的核酸纯化方法,组装SJ感染性钉螺检测试剂,并通过检测钉螺样本对其进行验证。结果获得长度213 bp的PCR扩增产物,并用该扩增产物构建了重组T载体,即阳性参照物;建立了SJ核酸恒温扩增反应体系,该体系可根据颜色变化判定扩增结果,且灵敏度和特异性良好;组装了SJ感染性钉螺检测试剂,该试剂可检测出含1%阳性钉螺的钉螺样本。结论成功建立了一种可视化的SJ感染性钉螺检测方法,并通过应用对其进行了验证。
- 冯惊涛邢微微孙魁喻鑫玲罗志红毛金武徐东刚
- 关键词:日本血吸虫环境监测钉螺
- 一种基于RPA的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了属于生物技术领域的一种基于RPA的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法。该试剂盒包含RPA冻干颗粒,缓冲液,醋酸镁,RPA反应引物,RPA反应探针。本发明利用RPA技术建立日本血吸虫的检测方法,其灵敏度与特异性...
- 邢微微徐东刚孙魁王园园冯惊涛喻鑫玲罗志宏毛金武付文亮
- 文献传递
- 一种检测B、E型人腺病毒核酸的试剂盒及其检测方法
- 本发明公开了一种检测B、E型人腺病毒核酸的试剂盒及其检测方法。所述试剂盒包括:RPA冻干颗粒,RPA反应引物,RPA反应探针,RPA缓冲液,镁盐溶液,横向流动试纸条,缓冲液,双蒸水和腺病毒基因组DNA。本发明利用横向流动...
- 徐东刚邢微微孙魁付文亮
- 一种纸基微流控快速核酸提取装置
- 本发明公开了一种纸基微流控快速核酸提取装置。包括过滤器和核酸提取膜;所述过滤器由顶盖和底盖组成,两者均为带有弧度的圆盘状结构,顶盖上设置有外凸的加样通道,底盖上设置有外突的废液排出通道,顶盖和底盖扣合形成过滤器腔体,将核...
- 孙魁徐东刚邢微微王园园
- 文献传递
- 重组酶聚合酶扩增技术的研究进展被引量:17
- 2015年
- 重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),是Piepenburg等于2006年首先提出的一种新型的恒温核酸扩增技术,其最显著的优势就是可在25~43℃的恒温下实现特定核酸序列的扩增,且能在5~20 min观察结果。RPA技术设备要求低,扩增过程不仅可采用传统的反应管,还可在纸片等反应载体上进行。通过结合探针或横向流动试纸条(LFD)等方法,可实现扩增产物的定量分析或可视化判别。RPA作为一种操作简便、反应快速、灵敏度高、特异性强、无需精密仪器的检测技术,是目前最有潜力成为快速分子诊断的工具,其在床旁诊断及防疫现场检测中都具有良好的应用前景。该文介绍了RPA技术在反应条件、产物检测等方面的优势及发展,总结了此技术近几年在实际应用中的情况,展望了RPA技术在床旁诊断及疾病防控中的未来方向。
- 孙魁邢微微徐东刚
- 关键词:疾病防控
- 一种用于恒温核酸扩增快速可视化检测的装置
- 本发明公开了属于分子诊断技术领域的一种用于恒温核酸扩增快速可视化检测的装置。该装置采用恒温核酸扩增对靶核酸进行扩增,再应用侧流层析法进行可视化检测,并将整个体系封闭于一个9cm×3.4cm的透明小盒内。通过本装置特殊结构...
- 徐东刚邢微微孙魁付文亮
- 文献传递
- 检测日本乙型脑炎病毒核酸的试剂盒及应用
- 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒核酸的试剂盒及应用。所述试剂盒包括:RPA冻干试剂,RPA反应引物,RPA反应探针,缓冲液,镁盐溶液和双蒸水。本发明利用探针对RPA核酸扩增产物进行实时定量检测,检测过程中全程不开盖,...
- 徐东刚邢微微孙魁付文亮
- 文献传递
- 一种检测B、E型人腺病毒核酸的试剂盒及其检测方法
- 本发明公开了一种检测B、E型人腺病毒核酸的试剂盒及其检测方法。所述试剂盒包括:RPA冻干颗粒,RPA反应引物,RPA反应探针,RPA缓冲液,镁盐溶液,横向流动试纸条,缓冲液,双蒸水和腺病毒基因组DNA。本发明利用横向流动...
- 徐东刚邢微微孙魁付文亮
- 文献传递
- 一种基于RPA的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了属于生物技术领域的一种基于RPA的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法。该试剂盒包含RPA冻干颗粒,缓冲液,醋酸镁,RPA反应引物,RPA反应探针。本发明利用RPA技术建立日本血吸虫的检测方法,其灵敏度与特异性...
- 邢微微徐东刚孙魁王园园冯惊涛喻鑫玲罗志宏毛金武付文亮
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- 一种用于恒温核酸扩增快速可视化检测的装置
- 本发明公开了属于分子诊断技术领域的一种用于恒温核酸扩增快速可视化检测的装置。该装置采用恒温核酸扩增对靶核酸进行扩增,再应用侧流层析法进行可视化检测,并将整个体系封闭于一个9cm×3.4cm的透明小盒内。通过本装置特殊结构...
- 徐东刚邢微微孙魁付文亮
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