齐延红
- 作品数：11 被引量：56H指数：4
- 供职机构：山西省生物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划石家庄市科学技术研究与发展计划山西省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 可溶性重组人组织因子(rhTF_(243))分泌型表达载体的构建和表达被引量：3
- 2007年
- 目的:构建含有TF的胞外区和跨膜区基因的phoA-TF243分泌型表达载体,在大肠杆菌中以可溶形式表达重组人组织因子(rhTF243)。方法:从人胎盘组织中提取总RNA,以RT-PCR扩增获得目的基因,并克隆到phoA载体中,在大肠杆菌MM294中表达rhTF243,产物采用免疫亲合层析进行纯化。结果:通过低磷酸盐诱导工程菌,获得重组人组织因子(rhTF243) ,表达水平占菌体总蛋白量的16 .3 %,经免疫亲合层析纯化,产物纯度达到95 %以上,分子量为27 .4kD。结论:获得了rhTF243,具有与完整分子完全相同的凝血功能。
- 赵邑齐延红潘薇薇卢晓霞刘彦萍赵峰梅
- 关键词：基因克隆大肠杆菌分泌表达
- 假单胞杆菌D-海因酶的纯化及酶学性质被引量：16
- 2001年
- D 海因酶是工业上生产D 型氨基酸的关键酶 ,用热变性 ,硫酸铵沉淀及SepharoseQfastflow ,Phenyl Sepharosefastflow ,Superose 1 2等柱层析步骤从Pseudomonas 2 2 62菌体中分离纯化了该酶 ,纯化倍数约为 60 ,活力回收约为 1 6%。该酶为同源二聚体 ,分子量约为 1 0 9kD ,亚基分子量约为 53 7kD ,反应最适pH为 8 0 ,最适温度为 70℃ ,在pH6.0～ 1 0 0和温度 60℃以下稳定 ,该酶对巯基试剂敏感 ,大多数二价金属离子如镁、锰离子等能促使酶活提高 ,但高浓度锌离子能抑制酶活 ,以二氢尿嘧啶为底物的米氏常数Km =2 .5× 1 0 - 2 mol L。该酶的N末端1
- 石亚伟李汉卿袁静明齐延红李晋川
- 关键词：D-海因酶纯化
- 人重组组织因子制备凝血酶原时间测定试剂的研究
- 凝血酶原时间(PT)测定是定量检测外源性凝血因子缺陷和监控抗凝治疗的重要指标, 在临床上用于术前筛查病人的出凝血机能是否正常,进行血栓形成预测,出血疾病的诊断等． PT测定是指在37℃下,有Ca2+存在时,凝血活酶与血浆...
- 赵邑赵峰梅齐延红卢晓霞潘薇薇刘彦萍
- 文献传递
- 二维红外光谱法分析聚酰胺-66晶区/非晶区结构被引量：3
- 2019年
- 应用变温红外光谱法和二维红外光谱法对聚酰胺-66在303～393K范围内的晶区和非晶区结构及热稳定性进行研究。变温一维红外光谱和变温二阶导数红外光谱的试验结果表明,聚酰胺-66的晶区结构对温度变化较为敏感,而非晶区结构相对稳定。非晶区结构的热稳定性在二维红外光谱试验中得到进一步的证实。从聚酰胺-66的分子结构观察,随着温度的升高,其晶区结构(主要对应O=C-NH-)最先改变,而非晶区结构(主要对应-C-C-)则较为稳定。非晶区的异步二维红外光谱试验结果表明,其晶区结构的吸收波数为1 141cm-1(νamorphous-1)和1 138cm-1(νamorphous-2);而非晶区结构的吸收波数为939cm-1(νcrystal-1)和931cm-1(νcrystal-2)。对聚酰胺-66的非晶区结构和晶区结构还同时进行同步二维红外光谱试验,结果表明:随着温度的升高,两者的红外吸收峰的变化快慢顺序为931cm-1(νcrystal-2)>1 141cm-1(νamorphous-1)>939cm-1(νcrystal-1)>1 138cm-1(νamorphous-2)。
- 付春生齐延红张龙霞肖霄于宏伟
- 组织因子人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建及鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的:构建组织因子人-鼠嵌合抗体的真核共表达载体pCN40-VL-VH,并转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中进行稳定表达,以克服鼠源单克隆抗体(mAb)用于临床的局限性。方法:从分泌鼠抗人的组织因子mAb的杂交瘤细胞株(克隆号:mTA)中抽提总RNA,经RT-PCR扩增mAb VL和VH的基因序列,构建重组真核表达载体pCN40-VL-VH,并进行酶切鉴定和测序。通过磷酸钙沉淀法转染CHO细胞,以终浓度800μg/LG418筛选阳性细胞,通过间接ELISA、Western blot检测细胞培养上清中嵌合抗体的表达量、活性及特异性。结果:成功构建了抗人组织因子嵌合抗体真核共表达载体pCN40-VL-VH并在CHO细胞中表达。ELISA、Western blot证实,表达的抗组织因子嵌合抗体为人鼠嵌合抗体,该抗体能与重组人TF抗原特异性的结合且表达量为51.25mg/L。结论:成功地构建并在真核细胞中表达了抗人组织因子嵌合抗体,为进一步的研究奠定了基础。
- 张全爱齐延红潘薇薇何永吉赵峰梅杨素萍赵邑
- 关键词：人-鼠嵌合抗体真核表达载体CHO细胞
- D-对羟基苯甘氨酸的酶法生产工艺研究被引量：19
- 2001年
- 利用自行从土壤中分离的假单胞菌 sp.2 2 6 2产生的酶 ,在诱导剂的作用下 ,建立了以 DL-对羟基苯海因为底物制备 D-对羟基苯甘氨酸的方法 ,确定了发酵及酶转化的最佳工艺条件。
- 齐延红丁玉华连惠勇彭晓光齐长兴
- 关键词：D-对羟基苯甘氨酸酶法生产工艺阿莫西林氨苄西林
- 酶法生产D-对羟基苯甘氨酸被引量：1
- 2002年
- D-对羟基苯甘氨酸是生产半合成抗生素药物的主要中间体,化学合成法生产流程长、污染重、成本高。山西省生物研究所利用从土壤中分离得到的假单孢菌2262产生的酶将原料DL-对羟基苯海因一步转化成D-对羟基苯甘氨酸,转化率达到100％,收率75％～80％,产品质量>-156°,含量≥98.5％,产品纯度高、质量好,能达到制药工业要求。一菌两酶的生产工艺从生产技术、产品成本及质量上均达到了产业化的要求。
- 丁玉华齐延红连惠勇张晓东
- 关键词：酶法生产D-对羟基苯甘氨酸抗生素药物中间体
- 参与D-型氨基酸合成相关酶的结构、功能和应用
- 石亚伟钮利喜张学尧袁静明齐延红
- D-型氨基酸属非天然氨基酸类，被广泛应用于医药、食品、添加剂及化妆品行业。近年来生物酶法成为D-型氨基酸合成的首选。但野生菌的酶法生产中仍存在酶活性不匹配，需有污染的诱导剂等问题。为解决上述问题，开展了D-型氨基酸合成相...
- 关键词：
- 关键词：氨基酸基因工程分子生物学
- 一种利用HCIC快速纯化抗rhTF_(243)单克隆抗体方法的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:建立从小鼠腹水中快速纯化抗人重组组织因子243(recombine human tissue factor243,rhTF243)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的方法。方法:含抗rhTF243单克隆抗体的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换等预处理后,先经疏水电荷诱导层析纯化处理,去除大部分杂蛋白,再经Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析柱进一步纯化。结果:经两步纯化后获得抗rhTF243单克隆抗体,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体效价保持良好,抗体总回收率达73%,且具有明显的抗促凝作用。结论:建立的单克隆抗体纯化方法简便、高效,所得mAb的纯度高、生物学活性好。
- 赵峰梅齐延红何永吉潘薇薇卢晓霞粱雅丽赵邑
- 关键词：MEPPROTEIN单克隆抗体腹水纯化
- N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶的快速纯化及性质被引量：10
- 2002年
- 通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析及阴离子交换层析等三步 ,有效地从一菌株NO .2 2 6 2中纯化了N 氨甲酰基 D 氨基酸酰胺水解酶。结果表明 ,酶活性回收约 2 0 %,纯化了 8 4倍。天然PAGE与SDS PAGE分析表明 ,该酶分子为同源四聚体 ,单体分子量约为 3 5kD。酶催化反应的最适pH为 7 7～ 8 0 ,最适温度为 45℃。以N 氨甲酰 DL 丙氨酸为底物时 ,Km =1 3×1 0 - 3 mol L ,Vmax=0 .3 3mol min。二价金属离子Ni2 + 有激活作用 ,Zn2 + 有明显的抑制作用 ,而Co2 + 对酶活无影响。该酶N 末端 8个氨基酸残基依次为TRQKILAF。
- 袁静明石亚伟杨秀清连惠勇齐延红
- 关键词：纯化D-氨基酸
