陈滨
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕杆状病毒IAP蛋白功能的研究
- 在昆虫杆状病毒基因组中普遍存在一类凋亡抑制基因iap(inhibitor ofapotosis)，最初是在筛选p35同源基因时发现的。但随着对该基因研究的深入，发现杆状病毒iap基因并不是都具有细胞凋亡抑制功能，它可能还...
- 陈滨
- 关键词：基因敲除酵母单杂交系统DNA结合蛋白杆状病毒
- 文献传递
- 家蚕杆状病毒(BmNPV)Bm122基因的缺失影响芽生型病毒粒子的形成
- 2016年
- 为研究家蚕杆状病毒（BmNPV）编码的Bm122基因的生物学功能,利用Red重组技术和Bac-to-Bac系统分别构建了Bm122-ko-bacmid和Bm122-re-bacmid,实现对Bm122基因的敲除和异位补回。进而将Bm122-kobacmid、Bm122-re-bacmid、wtbacmid（野生型）分别转染BmN细胞,病毒滴度测定结果显示：Bm122缺失后,病毒无法形成正常水平的芽生型病毒粒子（budded virus,BV）,表明该基因是病毒生成有感染力的BV所必需的基因;透射电子显微镜观察发现,Bm122敲除后细胞内未观察到杆状病毒粒子,进一步证实Bm122的缺失影响了BV的生成。qPCR结果显示,Bm122缺失后病毒DNA复制水平降低。结果表明,Bm122是病毒生成正常水平的BV所必需的基因。
- 朱丽萍于威陈滨何欢解纯刚
- 关键词：BAC-TO-BAC系统病毒复制
- 家蚕核型多角体病毒凋亡抑制基因iap的功能分析被引量：3
- 2015年
- 在昆虫杆状病毒基因组中普遍存在一类凋亡抑制基因iap(inhibitor of apotosis)。核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的iap1和iap2基因为研究对象,分别构建BmNPV iap1、BmNPV iap2缺失型和补回型病毒,探究2个iap基因的生物学功能。病毒基因组DNA对BmN细胞的转染实验结果表明,BmNPV iap1基因缺失对病毒感染引起的细胞凋亡无显著影响,对病毒基因组的复制和基因转录也无明显影响;但BmNPV iap2基因的缺失可显著提高细胞的凋亡水平(P<0.05),当利用iap2缺失型病毒基因组DNA转染BmN细胞时,胞内凋亡启动蛋白Caspase-3的活性与野生型病毒转染组相比显著上升,并且病毒滴度降为0。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析结果表明,BmNPV iap2的缺失大大降低了病毒DNA的复制水平和基因转录水平。基于上述试验结果可知:BmNPV iap2具有抑制由病毒感染诱导的细胞凋亡的作用,并且是病毒增殖的必需基因;而BmNPV iap1对宿主细胞的凋亡没有明显调控作用,对病毒基因组DNA的复制和基因转录也没有明显影响。
- 陈滨余海鹏张媛媛李俊张婷全滟平于威
- 关键词：家蚕核型多角体病毒病毒复制基因转录
- 家蚕核型多角体病毒lef5基因对病毒基因组复制和转录调控的影响被引量：1
- 2015年
- lef5是杆状病毒的核心基因之一。构建家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef5基因敲除型病毒lef5-ko-Bacmid和补回型病毒lef5-re-Bacmid,研究lef5基因在BmNPV的基因组DNA复制及各时期基因转录调控中的作用。透射电子显微镜下观察lef5-ko-Bacmid转染BmN细胞后不能产生具有侵染活性的病毒粒子(BV)。荧光定量PCR(qPCR)发现lef5基因缺失对病毒基因组DNA的复制没有明显影响,但会导致病毒各时期基因的转录水平显著下降。进一步通过检测由BmNPV多角体蛋白基因(polh)启动子驱动的荧光素酶活性变化,明确lef5基因对polh基因启动子的调控作用,结果表明lef5基因对polh基因启动子有显著的正调控作用。研究结果提示,lef5基因缺失后不影响BmNPV基因组DNA的复制,但会影响病毒早期、晚期、极晚期基因的转录表达。
- 余海鹏李俊张婷陈滨潘慧慧全滟平于威
- 关键词：家蚕核型多角体病毒病毒复制基因转录
