赖克方 作品数:367 被引量:2,994 H指数:30 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市科技攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 机械工程 农业科学 更多>>
卡介菌-多糖核酸对哮喘小鼠淋巴细胞CD4CD25+调节性T细胞的影响 被引量:3 2019年 目的 探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘小鼠淋巴细胞CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T reg细胞)数量及功能的影响.方法 选择Balb/c小鼠,以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、BCG-PSN干预组.BCG-PSN剂量为20μg/只,体积为60μl,在致敏前7 d腹腔注射干预,对照组同时给予相同剂量的生理盐水作对照,末次激发后48 h对小鼠进行有创肺功能检测,以乙酰甲胆碱各浓度激发时肺阻力(RL)表示.并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片后HE染色,计数其中的嗜酸粒细胞(EOS),取各组小鼠脾脏淋巴细胞,体外培养72 h后流式细胞仪检测CD4+CD25+T reg细胞/CD4+T细胞,Real-time PCR检测脾脏淋巴细胞foxp3及CTLA-4基因的表达量,酶联免疫吸附试验法检测脾脏淋巴细胞上清液中白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的含量.结果 (1)BCG-PSN干预可明显降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症.(2)哮喘组CD4+CD25+T reg细胞/CD4+T细胞比例(3.71±2.20)% 明显低于正常组(6.44±1.16)%(P<0.01),BCG-PSN组(6.75±1.63)% 与哮喘组相比差异有统计学意义(P<0.01).(3)哮喘组小鼠脾脏淋巴细胞foxp3 Mrna、CTLA-4 Mrna的表达量明显低于正常组,BCG-PSN干预可显著提高foxp3 Mrna、CTLA-4 Mrna的表达.(4)哮喘小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、TGF-β的含量明显少于正常组.BCG-PSN组IL-10含量为(210.32±88.23)ng/L,显著高于哮喘组(114.41±73.58)ng/L(P<0.05).BCG-PSN组TGF-β含量为(487.66±32.57)ng/L,显著高于哮喘组(97.76±23.58)ng/L(P<0.01).结论 BCG-PSN可增加CD4+ CD25+ Treg细胞数量及功能 ,具体机制可能通过促进IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子的分泌 ,及CTLA-4介导的细胞-细胞接触抑制机制诱导免疫耐受 ,从而降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症. 姜华 赖克方 南岩东 金发光关键词:卡介菌多糖核酸 调节性T细胞 嗜酸细胞Fas抗原表达及其在凋亡诱导中的作用 被引量:1 2002年 目的 :探讨嗜酸细胞 (Eos)凋亡基因Fas抗原的表达及其在凋亡诱导中的作用。方法 :分离正常人外周血Eos ,加入白细胞介素 (IL) - 5与不同浓度 (1- 10 0 0 μg/L)Fas单抗培养 72h ,观察Fas抗原表达、细胞存活和凋亡变化 ,并提取DNA电泳。结果 :新分离的嗜酸细胞表达Fas抗原 ,Eos与单纯介质、IL - 5培养后Fas抗原表达无明显变化。加入不同浓度的Fas单抗对IL - 5介导的Eos存活均有显著抑制作用 ,当Fas单抗浓度为 10 0 0 μg/L时 ,Eos存活率降为 30 %± 12 % (P <0 0 1)。Fas单抗 (10 0 μg/L)处理 ,2 4h后 ,Eos即有明显的凋亡 (35 %± 6 % ,P <0 0 1)。提取DNA电泳呈典型凋亡梯状改变。结论 :Fas抗原参与了Eos凋亡的调节 ,IL - 5抑制Eos凋亡与Fas抗原表达水平无关。 赖克方 郭晓明 王长征 郭先健 钱桂生关键词:嗜酸细胞 抗原 白细胞介素5 哮喘 老年人慢性咳嗽的诊治 被引量:6 2011年 根据咳嗽的病程不同,将〉8周的咳嗽称为慢性咳嗽。在老年人中,慢性咳嗽的病因较多,如慢性阻塞性肺疾病、肺结核、支气管扩张、肺纤维化、肿瘤等,此类患者通过病史采集、影像学等辅助检查可以明确诊断。但部分患者以咳嗽为唯一或主要症状,胸部X线检查无明显异常, 赖克方 许丹媛关键词:慢性咳嗽 老年人 诊治 胸部X线检查 支气管扩张 病史采集 咳嗽高敏感综合征:不明原因慢性咳嗽的新概念 被引量:39 2014年 慢性咳嗽是患者就医最常见的原因之一。多数慢性咳嗽患者可以获得明确的病因诊断。然而,有一部分慢性咳嗽患者在进行了全面检查后,病因仍无法明确。这类慢性咳嗽患者主要表现为咳嗽敏感性的增高,既往称为慢性特发性咳嗽或者不明原因慢性咳嗽,是慢性咳嗽治疗的难点。最近,有学者提出咳嗽高敏感综合征的概念以定义这一类慢性咳嗽患者。本文主要综述咳嗽高敏感综合征的病理生理与神经生理机制、诊断及治疗方法的研究进展。 赖克方 方章福 姚红梅关键词:咳嗽敏感性 细胞凋亡在炎症消退中的作用 被引量:8 1999年 炎性细胞凋亡对急性炎症反应的消退起着重要作用。中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞和单核细胞发生凋亡可被巨噬细胞识别和吞噬,使得炎症细胞内的前炎症介质和毒性产物不被外漏。凋亡细胞的安全清除给炎症性疾病的治疗带来新的思路。 赖克方关键词:凋亡 炎症 中性粒细胞 嗜酸粒细胞 巨噬细胞 变应性鼻炎气道炎症特征 目的明确无下气道症状的变应性鼻炎气道炎症改变.方法招募2011年1月~2011年12月在广州某高校就读的无下气道症状的变应性鼻炎患者(AR组)190例,同时招募健康人54例为正常对照组,完成血常规,肺功能,诱导痰,鼻灌洗... 刘宝娟 谢燕清 赖克方感冒后咳嗽敏感性及气道神经源性炎症改变 被引量:71 2007年 目的观察感冒后咳嗽患者(cough post infectious,CPI)的咳嗽敏感性以及气道分泌物神经肽变化,探讨其可能的发病机制。方法以2005年l~6月于广州呼吸疾病研究所慢性咳嗽专科门诊诊断10例CPI患者(CPI组)及10名正常志愿者(正常对照组)为研究对象,通过辣椒素咳嗽激发试验测定气道咳嗽敏感性;观察诱导痰细胞总数以及细胞分类比例;测定痰上清液P物质(sP)、神经肽A(NKA)、神经肽B(NKB)及降钙素基因相关肽(CGRP);检测诱导痰细胞SP、NKA及SP受体(NK-1)的表达,并进行分析比较。结果CPI组咳嗽阈值lgC5为1.16±0.61,明显低于正常对照组(2.64±0.28)(P〈0.001)。CPI组诱导痰细胞总数(WBC)及细胞分类比例与正常对照组差异均无显著性意义。CPI组诱导痰上清液SP质量浓度为(516.3±494.2)ng/L,显著高于正常对照组[(141.74±34.5)ng/L,P〈0.05];CGRP质量浓度为(141.2±80.8)ng/L,显著高于正常对照组[(74.34±38.2)ng/L,P〈0.05];而2组间NKA、NKB的质量浓度差异均无显著性意义。CPI组痰细胞SP、NK-1蛋白的表达分别为1.86±0.81和1.20±0.75,显著高于正常对照组的(0.65±0.44和0.27±0.24)(P〈0.01);而2组间NKA蛋白表达差异无显著性意义。结论CPI患者的咳嗽敏感性增高,并伴随气道神经源性炎症,提示其与CPI发病相关。 陈如冲 刘春丽 罗炜 姚卫民 钟淑卿 赖克方 钟南山关键词:咳嗽 感冒后咳嗽 咳嗽敏感性 神经源性炎症 香烟提取物通过活化HIF1α诱导TRPA1高表达 目的 本研究旨在考察香烟烟雾诱导瞬时受体电位锚蛋白亚型1(TRPA1)高表达的调节机制.材料与方法 采用香烟提取物(CSE)、受试药物以及siRNA诱导A549细胞.检测TRPA1与HIF1α mRNA表达,细胞质中RO... 聂怡初 赖克方探讨支气管舒张剂治疗嗜酸性粒细胞性支气管炎及咳嗽变异性哮喘的效果及其机制 观察在广州医科大学第一附属医院门诊就诊的慢性咳嗽患者,来探讨支气管舒张剂治疗嗜酸性粒细胞性支气管炎(EB)及咳嗽变异性哮喘(CVA)的效果及其机制,发现支气管舒张剂对少数EB患者及部分CVA患者有效,而EB患者对支气管舒... 易芳 韩丽娜 刘宝娟 罗炜 陈桥丽 赖克方关键词:嗜酸性粒细胞性支气管炎 咳嗽变异性哮喘 支气管舒张剂 疗效评价 双室体描仪测定豚鼠气道阻力和气道反应性 被引量:1 2009年 目的建立应用双室体描仪测定豚鼠气道阻力和气道反应性的方法,为哮喘的研究提供有效手段。方法应用双室体描仪分别测定乙酰甲胆碱(Mch)激发后豚鼠气道阻力的回复时间;于实验的第1、15天分别测定正常对照组豚鼠气道阻力和气道反应性2次,每次间隔2h,验证测定结果的重复性;观察OVA致敏豚鼠OVA激发前后气道阻力和气道反应性的变化情况。结果PC100浓度的Mch雾化后,豚鼠在1h内气道阻力回到基线水平。正常对照组豚鼠在第1、15天分别测量两次的基础气道阻力sRaw为(3.25±0.67)cmH2O·s、(3.33±0.58)cmH2O·s、(3.30±0.56)cmH2O·s、(3.32±0.75)cmH2O·s,气道反应性(log2PC100)值分别为8.48±0.94、8.64±1.04、8.56±0.67、8.64±0.60,气道阻力和气道反应性两两比较,差异无统计学意义(P>0.05)。致敏豚鼠OVA激发后气道阻力和气道反应性均较激发前显著提高,sRaw分别为(7.08±1.82)cmH2O·s和(2.87±0.53)cmH2O·s(P<0.01),log2PC100值分别为6.64±1.26和8.48±1.17(P<0.01)。结论成功建立了应用双室体积描记法测定豚鼠气道阻力和气道反应性的实验方法。 姚卫民 赖克方 罗远明 刘春丽 陈如冲 罗炜 钟南山关键词:气道阻力 气道反应性