刘春林
- 作品数：128 被引量：1,030H指数：17
- 供职机构：湖南农业大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 酵母双杂交诱饵载体pGBKT7_MYC2构建及表达鉴定被引量：1
- 2012年
- MYC2是一类含有helix-loop-helix(bHLH)结构域的转录因子。为进一步研究MYC2因子在植物防御抗性中的作用及其参与植物JA,SA等信号途径的作用机制,克隆了拟南芥的MYC2基因,以此构建了pG-BKT7_MYC2酵母双杂交载体,通过Western blotting验证表明,该载体能在酵母细胞里正常表达。
- 刘武肖牧阮颖刘春林
- 关键词：诱饵载体蛋白表达
- 银扇草再生体系的建立
- 2024年
- 为建立银扇草(Lunaria annua)体外再生体系,以其真叶为外植体,探讨消毒条件、植物生长调节剂组合及浓度对愈伤组织诱导、不定芽和不定根分化的影响;进一步分析了生根方式对成苗和幼苗生长的影响。结果表明,用75%乙醇消毒45秒配合0.1%升汞溶液消毒6分钟为银扇草叶片外植体最佳消毒处理;真叶愈伤组织诱导及不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+2.0 mg·L^(-1)2,4-D,愈伤组织诱导率达93.37%,不定芽分化率达84.08%;最佳生根培养基为MS+0.1 mg·L^(-1)NAA,从接种叶片外植体到获得再生植株约90天。该研究建立了银扇草稳定的再生体系,为开发利用银扇草资源及挖掘功能基因奠定了基础。
- 曾浩李佩芳郭至辉刘春林阮颖
- 关键词：愈伤组织
- 九种李属植物的RAPD亲缘关系分析被引量：58
- 2002年
- 以李属植物 9个种的 2 0个材料为研究对象 ,用RAPD技术对其进行亲缘关系分析。在建立适合李属植物的PCR RAPD反应体系的基础上 ,从 45个随机引物 ( 1 0mer)中筛选出 2 4个 ,对所有供试材料进行扩增 ,共获得 2 4张DNA指纹图谱 ,3 2 6条DNA谱带 ,其中有 3 1 1条为多态带。建立了基于RAPD的李属植物亲缘关系树形图 ,树形图的聚类结果与经典的李属植物的起源、分布和分类基本一致。另外 ,根据聚类结果 ,作者认为 :1 )乌苏里李是中国李的一个变种而非一独立的种 ;2 )杏李是一李杏杂种且与杏有较近的亲缘关系 ;3 )从分子水平证明了欧洲李 (PrunusdomesticaL.)是由樱桃李 (P .cerasiferaEhrh.)和黑刺李 (P .spinosaL .)自然杂交形成的后代。
- 阮颖周朴华刘春林
- 关键词：李属植物RAPD亲缘关系分析欧洲李樱桃李自然杂交
- α-甘露糖苷酶SSc4基因过表达质粒构建与油菜转化
- 2017年
- 菌核病是由核盘菌引起的一种世界性的真菌病害,对我国油菜生产危害尤为严重。但是现在已知的所有植物资源中都找不到对核盘菌完全具有抗性的基因资源。本研究采用"以毒攻毒"的途径,将核盘菌自身参与致病的一个α-甘露糖苷酶SSc4基因转到甘蓝型油菜中,以期获得对能对核盘菌产生抗性的油菜种质新资源。本研究克隆核盘菌的SSc4基因,构建了其过表达质粒,并通过农杆菌介导转化油菜,实验共筛选到159株抗性苗,其中获得了27株转基因油菜,转化率约为1%。对其中的9株转基因苗进一步作RT-PCR检测,显示有6株转基因植株中SSc4基因高表达,实现了设计目标。
- 魏然何雯刘春林
- 关键词：核盘菌
- 外源DNA浸泡水稻种子的电镜观察被引量：7
- 1997年
- 利用扫描电镜和透射电镜对水稻ＤＮＡ浸种法受体进行研究，结果显示水稻胚生长点细胞在浸泡过程中内部和表面发生了一系列显微和亚显微结构变化．这些结构变化对外源ＤＮＡ直接导入受体是非常有利的，但ＤＮＡ导入的具体途径还有待进一步的实验来证明．
- 阮颖刘春林董延瑜
- 关键词：水稻种子外源脱氧核糖核酸浸泡法
- 核盘菌异核体不亲和YD‑7蛋白及其编码基因与应用
- 本发明属于生物基因工程技术领域，具体为一种核盘菌异核体不亲和YD‑7蛋白及其编码基因与应用。该蛋白是下述氨基酸残基序列之一：1)序列表中的SEQ ID No：1；2)将序列表中的SEQ ID No:1的氨基酸残基序列经过...
- 刘春林阮颖
- 文献传递
- RAPD等技术用于茧蜂分类及中国茧蜂新属新种发现
- 刘春林阮颖柏连阳李志文游湄游兰韶罗庆怀郭纯黄安平
- 该项研究用RAPD技术探讨混腔室茧蜂和菲岛腔室茧蜂两近缘种的确切分类地位，结果是不同的种。使用支序系统学方法研究中国的小腹亚科内族级单元的系统发育关系，结果认为尽管Mason的族级分类系统有一些欠缺，但仍是可信、实用的。...
- 关键词：
- 关键词：RAPD茧蜂新属新种
- 核盘菌液滴凝集素SSL-6基因过表达质粒构建与油菜转化被引量：2
- 2017年
- 菌核病是由腐生型真菌核盘菌寄生引起的一种世界范围性严重病害,是我国油菜的主要病害之一,严重影响油菜的品质和产量。目前没有找到针对核盘菌的有效的免疫资源,因此通过不同的途径来开展抗菌核病抗性资源筛选研究具有非常重要的现实意义。本研究本着"以毒攻毒"的思路,将核盘菌自身可能参与致病的分泌型凝集素蛋白SSL-6基因转入甘蓝型油菜中,以期获得具有抗菌核病的油菜种质资源。通过基因克隆、过表达载体构建和借助根癌农杆菌介导的油菜遗传转化,将SSL-6基因转到甘蓝型油菜"中双6号"基因组中;经过潮霉素抗性筛选与PCR鉴定,成功获得了75株转基因油菜;进一步RT-PCR检测,筛选到5株SSL-6基因高表达的转基因植株。这些转基因油菜植株为下一步菌核病的抗性研究提供了重要的基础材料。
- 李浪刘正立刘询刘春林
- 关键词：核盘菌凝集素基因
- 叶片中GUS染色观测油体含量技术体系的建立被引量：5
- 2017年
- 植物油体大致可以分为两种:生殖器官(种子)中的油体和营养器官中的油体。营养器官中的油体数量相对少而小,且分布弥散,导致在已有的研究报道中,有关营养器官中油体的研究很少。为了实现对叶片中油体进行方便有效的观察,我们将生殖器官与营养器官这两种油体上共有的油体蛋白3(Oleosin3)对应的启动子与GUS指示基因融合后转化到叶片积累油体的拟南芥突变体中,经GUS染色成功观察到蓝色斑点。这一研究成功建立了可用于直观检测叶片中油体存在与否的技术体系,为后续营养器官中油体形成机制的研究提供了有力的技术保障。
- 胡佳曾文婕刘春林
- 关键词：叶片油体GUS染色
- AtCS82基因T-DNA插入突变体筛选和过表达转基因植株的获得
- 2013年
- AtCS82是拟南芥中一个功能未知的基因,推测该基因可能与种子油脂合成代谢相关。为探明AtCS82基因的功能,采用半定量RT-PCR法对AtCS82基因在拟南芥不同组织(茎、叶、花、果荚)中的表达情况进行了分析,发现其在果荚中的表达量较高,而在茎、叶、花中的表达量明显偏低,推测AtCS82基因可能参与种子发育;使用三引物法对T-DNA插入突变体进行纯合子筛选,并通过RT-PCR检测纯合子植株中AtCS82基因的表达情况,试验结果证明获得了稳定遗传的AtCS82基因沉默纯合突变体;通过构建pCAMBIA1300-35S::CS82过表达载体,并转化拟南芥哥伦比亚野生型(Col)的方式,获得了AtCS82基因的过表达转基因植株。
- 陈锦华郭磊易力雄刘春林阮颖
- 关键词：过表达转基因植株
