张爽
- 作品数：16 被引量：28H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院重点部署项目公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- H7N4低致病性禽流感病毒小鼠感染模型建立及感染致病特征研究
- 2024年
- 2018年,我国江苏省首次报告人感染H7N4禽流感病毒事件,提示H7N4禽流感病毒具有跨种传播和人畜共患的风险。为评估流行的H7N4禽流感病毒感染和适应哺乳动物的能力,预警未来禽流感病毒感染致病哺乳动物甚至人类的风险,提供疫苗及药物研发和评价的工具,本研究利用BALB/c小鼠建立了H7N4禽流感病毒感染模型并初步研究了病毒的感染致病特性。结果显示,随着病毒感染小鼠和连续传代次数的增加,病毒对小鼠的致病力逐渐增强。野生型病毒感染小鼠后(MA1),病毒可在肺脏中复制,但小鼠体重轻微且短暂性下降;自病毒在小鼠体内传至第2代(MA2)起,感染小鼠开始全部死亡且小鼠死亡时间逐渐缩短。MA2代感染小鼠7 d内全部死亡,MA5代感染小鼠4 d内全部死亡。对每代次病毒进行全基因组测序比对分析发现,随着感染代次的增加,病毒多个基因呈现出动态适应性突变,其中PB2-E627K和PA-T97I等突变很可能导致病毒对小鼠的致病力增强。研究结果提示:流行的H7N4禽流感病毒具有感染致病哺乳动物的能力和潜在风险,建立的小鼠感染模型为病毒的致病机制研究及疫苗和药物研发奠定了基础。
- 商若雨田甜刘云孙举张瑞丰张爽杨婧段学锋毕玉海
- 关键词：禽流感病毒突变
- H9N2亚型流感病毒核酸参考品研制及荧光RT-PCR检测验证被引量：6
- 2018年
- 从H9N2亚型流感病毒A/chicken/Hunan/04.14 (H9N2)核酸中扩增了HA基因的编码序列,克隆测序后,采用体外转录方法制备RNA。用RNA保存液稀释至含量约10~9 copies/μL。分装后进行均匀性和稳定性检验,通过4家实验室协作标定,取平均值作为定值结果。此外,文中建立的实时荧光定量PCR (qPCR)快速检测技术,对临床样品进行准确检测验证,检测限可达10个拷贝。结果表明,文中制备的核酸参考品可作为H9N2亚型流感病毒核酸快速检测方法的阳性定量参考品。
- 宋洁李翠李翠李晶范文辉张爽范文辉俞蔼毕郝客牛春艳王晶牛春艳王晶
- 关键词：HA基因参考品荧光RT-PCR
- 鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制备和评价被引量：5
- 2015年
- 我国鸭甲型肝炎病毒(DHAV)的快速变异及广泛流行给养鸭业造成了较大的经济损失,为研究鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制备和评价方法,首先对我国多个鸭场进行血清型流行病学分析,从201株DHAV-1、38株DHAV-3中筛选出6株毒力较强的DHAV,验证了DHAV-1和DHAV-3为我国流行优势株,并对6株DHAV进行ELD50和LD50测定,筛选疫苗候选株后经传代确定疫苗毒种,选取F5代鸭胚胚体研磨液作为疫苗毒种,经甲醛灭活后制成3批水包油包水(W/O/W)型乳剂二价灭活疫苗实验室制品。通过安全性试验、抗体中和试验、攻毒保护及免疫交叉保护试验发现:疫苗安全性良好,雏鸭免疫后第7天可以检测到DHAV中和抗体,第14-21天的攻毒保护率为90%-100%,免疫持续期可达5周以上,DHAV-SH和DHAV-FS之间的交叉保护为20%-30%。研究表明本试验研制的鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗实验室制品安全且高效,为我国DHAV预防和控制提供了一种新方法和新产品。
- 银凤桂李晶张爽余萌张万林范国兵董秀凯刘文军
- 关键词：鸭病毒性肝炎灭活疫苗免疫效果
- H5亚型流感病毒HA头部球状结构域在毕赤酵母中的高效表达及其免疫原性分析被引量：7
- 2019年
- 为了研究H5亚型流感病毒HA蛋白中头部球状结构的免疫原性及其基因优化对蛋白表达的影响,本研究构建了重组真核表达载体pPICZ?A-H5HA,并将其转化至毕赤酵母,经筛选获得重组菌株。SDS-PAGE和Western blotting结果分析显示,目的蛋白可在酵母中高效分泌表达,发酵液上清中目的蛋白浓度高达0.2 mg/mL,分子量约为37kDa。将酵母发酵上清经浓缩、纯化后,获得重组目的蛋白H5HA。将不同剂量的H5HA与不同佐剂联用后分别以滴鼻和肌肉注射两种方式免疫试验动物,进行免疫效力的评价。试验结果表明,H5HA具有较好的免疫原性,可诱导SPF鸡产生较高水平的IgG (血凝抑制效价达1∶64、病毒中和抗体效价为1∶218),最佳使用剂量为50μg/羽,与白油佐剂联用时效果最佳,且肌肉注射方式的免疫效果优于滴鼻方式。研究结果为H5亚型流感病毒亚单位疫苗的研制提供了理论支撑。
- 范文辉王萌刘丽蓉张鹤张爽凌红丽刘文军李晶
- 关键词：血凝素蛋白毕赤酵母亚单位疫苗
- 利用CRISPR-Cas9系统构建的敲除IFN-β基因的293T细胞系
- 本发明公开了利用CRISPR-Cas9系统构建的敲除IFN-β基因的293T细胞系。本发明所提供的敲除IFN-β基因的293T细胞系，具体为人胚肾细胞293T-KO-IFN-β，它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物...
- 刘文军李晶范文辉李芸张爽
- 一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗
- 本发明公开了一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗。本发明首先保护一种突变蛋白，是将流感病毒的NS1蛋白进行如下两个氨基酸残基的突变得到的：第38位氨基酸残基由精氨酸突变为丙氨酸，第41位氨基酸残基由赖氨酸突变为丙氨酸...
- 李晶刘文军陈璨张爽孙蕾张瑞丰范文辉杨利敏
- 文献传递
- 一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用
- 本发明公开了一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用。本发明所提供的重组流感病毒是出发B型流感病毒的基因组进行如下改造得到的：增加了含有caspase3‑1的编码基因和caspase3‑2的编码基因...
- 刘文军李晶江静雯范文辉张爽
- 文献传递
- 一种更灵敏的特异性检测H9亚型禽流感抗体的间接ELISA方法的建立被引量：4
- 2017年
- H9亚型禽流感在全球范围内广泛流行,控制其传播需监测H9亚型禽流感病毒的感染情况及疫苗的免疫效果。为了建立便于检测且灵敏特异的H9亚型禽流感抗体间接ELISA方法,本实验利用不同亚型之间变异较大的H9亚型禽流感病毒HA蛋白的头部球状区作为包被抗原,确定了最佳复合封闭液和抗体稀释液,提高了其特异性。结果显示建立的ELISA方法灵敏度高于血凝抑制试验(HI),且与H3N2、H5N2、H7N9亚型流感病毒及新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)和产蛋下降综合征病毒(EDSV)的阳性血清均无交叉反应。另外,利用该方法及HI试验对200份临床鸡血清样本进行检测,两种检测方法的符合率达97%,且存在较高的相关性(R2=0.981 1)。
- 仉薇侯力丹宋洁张爽李芸李晶孙蕾范文辉刘文军
- 关键词：H9亚型血凝素蛋白间接ELISA血凝抑制试验
- 2015年湖南部分地区H9N2亚型流感病毒HA和NA基因遗传进化被引量：1
- 2018年
- 我国湖南地区因水禽家禽饲养较多且密集,是流感病毒高发省份。为了监测流感病毒的变异情况,采用RT-PCR技术扩增了10株H9N2亚型流感病毒的HA和NA基因,并进行了序列测定和分析。结果显示,10株分离株均属于欧亚分支中的Y280亚系;HA碱性裂解位点序列均为RSSR↓GLT,为低致病性流感病毒特征;HA受体结合位点234位均为L,具有与人唾液酸α-2,6受体结合的特性;NA蛋白均在颈部(63–65位)出现氨基酸缺失,这种缺失能增加流感病毒在哺乳动物中的复制能力。提示H9N2亚型毒株近年有毒力和致病力趋于转强的可能性,因此,要加强对H9N2亚型禽流感病毒的监测,密切关注它的重组趋势。
- 张爽张爽陈全姣毕玉海刘文军盛望张涛
- 关键词：遗传进化HA基因NA基因
- 一种检测猪O型口蹄疫病毒抗体的方法及其专用试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪O型口蹄疫病毒抗体的方法及其专用试剂盒。本发明提供了一种检测或辅助检测待测样本是否感染猪O型口蹄疫病毒的化学发光酶联免疫试剂盒，包括抗原蛋白，所述抗原蛋白为如下a或b或c：a)序列表中序列2所示的蛋...
- 刘文军杨利敏李晶崔辰张爽范文辉
- 文献传递
