聂铭博 作品数:15 被引量:48 H指数:4 供职机构: 华中科技大学同济医学院附属同济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
转化生长因子β1对小鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞内结缔组织生长因子合成的影响:量效与时效性分析 被引量:1 2007年 目的:观察不同质量浓度转化生长因子β1作用于体外培养小鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞后,细胞内结缔组织生长因子生成的变化。方法:实验于2006-03/06在武汉协和医院中心实验室完成。实验材料:清洁级3周龄昆明种小鼠由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供(动物使用许可证:syxk(鄂)2004-0028)。实验方法:采用差速贴壁法分离培养并鉴定小鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞。取第2代肌源性干细胞,均匀加入6孔培养板中,每孔细胞数为104,置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养2d后,更换培养液。A~F组每孔加入含有质量浓度0,1,5,10,20,40μg/L重组人转化生长因子β1的含体积分数为0.2胎牛血清的DMEM培养基后,置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养3d。G~L组每孔分别加入含有质量浓度为10μg/L重组人转化生长因子β1的含体积分数为0.2胎牛血清的DMEM培养基后,同样条件培养箱中培养0,3,6,12,24,48h。实时荧光定量RT-PCR检测结缔组织生长因子mRNA水平,应用Westernblot检测结缔组织生长因子蛋白表达变化。结果:①Western blot检测结缔组织生长因子蛋白:可见阳性条带。A~D组平均吸光度比值随转化生长因子β1质量浓度增加而上升,组间差异具有显著性意义(0.854±0.157,1.203±0.144,2.471±0.141,3.652±0.202,P<0.05),D~F组上升曲线趋于平缓,组间差异无显著性意义(3.652±0.202,3.736±0.216,3.919±0.226,P>0.05)。G~J组平均吸光度比值随转化生长因子β1质量浓度增加而上升,组间差异具有显著性意义(0.788±0.123,1.063±0.143,2.154±0.153,2.997±0.136,P<0.05),J~L组上升曲线趋于平缓,组间差异无显著性意义。②RT-PCR检测结缔组织生长因子mRNA水平:A~D组结缔组织生长因子mRNA扩增量明显随转化生长因子β1质量浓度升高而上升,差异具有显著性意义(1.713±0.123,1.992±0.143,2.237±0.153,2.859±0.136,P<0.05),E、F组间差异无� 聂铭博 陈振兵 洪光祥关键词:转化生长因子Β1 肌源性 干细胞 结缔组织生长因子 多组神经移位治疗臂丛C5~C7根性撕脱伤重建肩外展及屈肘功能 被引量:2 2016年 目的观察联合应用多组神经移位治疗臂丛上、中干根性撕脱伤重建肩外展及屈肘功能的临床效果。方法我科于2012年4月至2014年4月收治臂丛上、中干根性撕脱伤患者16例,采用副神经斜方肌肌支移位修复肩胛上神经、桡神经肱三头肌长头支移位修复腋神经肌支及尺神经部分束支移位肌皮神经(Oberlin术式),联合修复臂丛上、中干根性撕脱伤,以恢复肩外展及屈肘功能。术后随访采用臂肩手功能障碍(the disabilities of the arm,shoulder and hand,DASH)评分表评估疗效。结果 16例患者中有14例术后得到随访。随访时间为24~28个月(平均为25个月),患者肩关节外展恢复至75°~90°,恢复时间为9.0~18.0个月(平均为14.0个月)。屈肘恢复至100°~160°,恢复时间为4.0~7.5个月(平均为5.8个月)。DASH评分为8.0~16.0分,平均为14.6分。结论使用多组神经移位联合治疗臂丛上、中干损伤,可较好恢复肩外展及屈肘功能,尺神经部分束支移位修复肌皮神经肱二头肌支对手内在肌功能无明显影响。 聂铭博 鲍远 张滋洋 康皓关键词:臂丛 神经移位 Toll样受体4激活对转化生长因子-β1致骨骼肌纤维化作用的影响 2017年 目的提取并培养小鼠骨骼肌内肌源性干细胞(MDSCs),观察其在Toll样受体4(TLR4)激活后,对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的骨骼肌纤维化作用的影响。方法细胞培养:采用差速贴壁法获得小鼠肌源性干细胞,传代培养。所得细胞分为3组,A组作为阴性对照,B组在培养液中加入重组人TGF-β1(rhTGF-β1),C组加入重组人TGF-β1和TLR-4激动剂热休克蛋白60(Hsp60)。上述各组细胞培养3 d后,分别行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、免疫荧光染色。检测各组细胞核因子(NF)-κB表达差异,明确B组细胞TLR-4是否被激活,再通过比较各组MDSCs在TLR-4激活后结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅰ型胶原的表达水平。动物实验:取雄性小鼠24只(体重15~18 g),随机分为D、E、F 3组(每组8只)。每周一分别于左侧腓肠肌内侧头注射生理盐水(阴性对照)、rhTGF-β1、rhTGF-β1加Hsp60混合溶液,连续4周。第28天切取左侧腓肠肌内侧头测量肌湿重,Von Geison染色比较肌肉组织纤维化程度。结果细胞培养:RT-PCR测定A、B、C 3组所得核转录因子κB(NF-κB)相对表达量分别为:0.852±0.121、0.987±0.084、1.304±0.171(P=0.031)。CTGF相对表达量分别为:0.756±0.205、0.977±0.188、1.308±0.302(P=0.022)。Ⅰ型胶原相对表达量分别为:0.767±0.148、0.998±0.138、1.261±0.327(P=0.016)。Western blot测定A、B、C 3组NF-κB与内参的吸光度比值依次为:0.784±0.133、0.887±0.066、0.994±0.171(P=0.026)。CTGF与内参的吸光度比值依次为:0.644±0.125、0.863±0.109、0.998±0.512(P=0.018)。Ⅰ型胶原与内参的吸光度比值依次为:0.347±0.133、0.761±0.086、0.868±0.167(P=0.045)。与Western blot结果相对应,免疫荧光染色结果显示在A、B、C 3组CTGF和Ⅰ型胶原的表达依次增强,差异有统计学意义(P=0.025,P=0.012)。动物实验:D、E、F3� 聂铭博 鲍远 张滋洋 施佳 康皓关键词:肌源性干细胞 转化生长因子Β-1 TOLL样受体 结缔组织生长因子 纤维化 痛风结石致腕管综合征一例 被引量:4 2017年 狭窄的腕管内有正中神经、9条屈肌腱和结缔组织,因此正中神经容易在腕管内受到压迫而发生直接损害或间接卡压,出现支配感觉异常和功能障碍,导致了腕管综合征。近年来,痛风的发病率逐年增加,而痛风结石可能间接压迫正中神经引起腕管综合征。痛风结石造成的腕管综合征在国内较少见,且多为个案报道[1],临床上可能出现因认识不足而造成误诊或漏诊,对病人的治疗产生不良影响。 施佳 鲍远 聂铭博 张滋洋 康皓关键词:腕管综合征 痛风 结石 正中神经 结缔组织 模拟产瘫和成人臂丛神经根性损伤发生垂腕垂指畸形的大鼠模型 被引量:2 2011年 目的建立产瘫和成人臂丛神经根性损伤出现垂腕垂指畸形的大鼠模型。方法取雄性SD大鼠48只,其中幼年组(生后7d)和成年组(大于3月龄)各24只,每个年龄组大鼠按神经根处理方式等分成3个亚组,即切断右侧C5、6神经根组、切断C5、6、7神经根组和切断C5、6、7、8神经根组。术后3个月后行如下检测:各组大鼠垂腕垂指发生率;桡神经有髓神经纤维通过率;WeSternBlot检测桡神经组织内神经丝蛋白200(NF200)和外周髓鞘蛋白0(MPZ)的表达水平。结果C5、6神经根切断后,各年龄组大鼠实验侧均无垂腕垂指畸形,桡神经有髓神经纤维的通过率较健侧均无明显降低,各组间差异无统计学意义(P〉0.05)。各组桡神经组织内NF200和bIPZ相对表达量差异均元统计学意义(P〉0.05)。Q矗7神经根切断后,幼年组垂腕垂指发生率均明显高于成年组(P〈0.05),桡神经有髓神经纤维通过率均低于成年组(P〈0.05)。幼年组桡神经组织内NF200和MPZ相对表达量均低于成年组(P〈0.05)。C5、6、7、8切断后,各年龄组大鼠每例实验侧均出现垂腕垂指畸形,各组实验侧桡神经有髓神经纤维通过率均明显降低,但无年龄差异(P〉0.05)。各年龄组桡神经组织内N1200和MPZ相对表达量均降低,但差异无统计学意义(P〉0.05)。结论幼年及成年大鼠臂丛神经根性损伤造成垂腕垂指畸形的规律与人类相似,幼年大鼠C5、6、7神经根断裂即可导致垂腕垂指,而成年大鼠只有连续4个神经根(C5、6、7、8)断裂才会导致垂腕垂指畸形。因此大鼠是进行产瘫与成人臂丛神经根性损伤垂腕垂指畸形发生机制研究的理想动物。 聂铭博 陈亮关键词:分娩性 臂丛根性损伤 股前外侧皮瓣游离移植修复下肢及足部皮肤软组织缺损的临床应用 被引量:20 2015年 目的探讨股前外侧皮瓣游离移植修复下肢及足部软组织缺损的临床疗效。方法选取2014年4月至2015年5月间,使用股前外侧皮瓣游离移植治疗下肢及足踝部软组织缺损的8例患者。术前通过B超及CT血管造影(computed tomography angiography,CTA)定位穿支血管的位置,术中对比血管定位位置后进行血管蒂分离。皮瓣切取面积为15 cm×15 cm^25 cm×15 cm。本组患者由于受区感觉神经缺损,均未进行受区感觉神经的修复。术后随访3个月以上,观察患者皮瓣外观及功能。结果 8例患者中,7例患者皮瓣术后存活,皮瓣对患处覆盖良好并有较好的外观及功能。1例患者术后第2天出现动脉危象,行探查术后再次出现静脉危象导致皮瓣部分坏死,清除坏死皮瓣组织,进行植皮换药后伤口愈合良好。结论股前外侧皮瓣游离移植是游离皮瓣修复下肢及足踝部皮肤缺损中的经典术式,不仅可以减少患者的供区损伤,受区也可以得到良好的功能修复,但是在治疗过程中必须注意神经功能恢复及患肢的骨性功能恢复。 张滋洋 施佳 马建华 郭晓征 聂铭博 康皓关键词:外科皮瓣 足损伤 腿损伤 MCP-1在大鼠坐骨神经损伤中作用的实验研究 2008年 目的研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在大鼠坐骨神经损伤后在神经组织中的表达以及抑制其作用对损伤的坐骨神经华勒变性过程的影响。方法96只雄性SD大鼠随机分为4组A、B、C、D(n=24)。另取42只随机分为2组E、F组(n=21),于右大腿后部中段切断坐骨神经,A、B组用聚乙烯软管套接固定神经远端于充满MCP-1抗体的微渗透泵直到取材,近端返折固定于临近肌肉。C、D、E、F组神经切断后远端旷置,近端处理同A组。A、B组于0h、24h、3d、7d(n=6)分别作光镜和电镜观察远端神经轴突和髓鞘形态变化,C、D组分别为其对照。E、F组在损伤后0h、6h、12h、24h、3d.7d、14d(n=3)取坐骨神经远端,E组实时荧光定量RT—PCR测定MCP-1mRNA表达,F组Western Blot测定MCP-1蛋白含量。结果神经损伤后,在24h和14d时E组MCP-1mRNA和F组MCP-1蛋白水平达到高峰,于24h时最高。光镜和电镜下各实验组髓鞘厚度均高于各自对照组。结论MCP-1在大鼠坐骨神经切割伤后在时间上存在分泌高峰,在神经损伤后远端华勒变性过程中起促进作用。 聂铭博 康皓 邢丹谋 彭正人 洪光祥关键词:坐骨神经 髓鞘 单核细胞趋化蛋白-1 华勒变性 分娩性臂丛损伤垂腕垂指畸形发生机制的实验研究 本研究分为三部分: 第一部分、模拟产瘫和成人臂丛根性损伤发生垂腕垂指畸形的大鼠模型建立 目的:建立产瘫和成人臂丛根性损伤出现垂腕垂指畸形的大鼠模型。 方法:取雄性SD大鼠72只,其中出生后7天(P7)、14天... 聂铭博关键词:产瘫 臂丛根性损伤 发病机制 神经移植 疗效评价 汗孔癌一例报道并文献复习 被引量:1 2016年 汗孔癌是与汗腺导管有关的临床罕见的恶性肿瘤,发病率低,其发生率仅占皮肤肿瘤的0.01%[1]。好发于老年人,尤其是年龄60~80岁者[2];好发于手、足、脸、眼皮等部位[3-5]。汗孔癌发病灶生长的部位较广,外观没有明显特异性,部分呈现粉红色、湿润、光亮表面[6]。 刘俊 康皓 聂铭博 张滋洋 鲍远 施佳关键词:文献复习 恶性肿瘤 汗腺导管 发病率 发生率 特异性 新型冠状病毒肺炎疫情防控期间手外科患者的诊疗流程指导建议(第一版) 2020年 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传染性强,潜伏期临床症状不明显,故手外科患者在疫情期间的收治处理是一个亟需解决的问题。本文根据作者及本院外科临床一线医师在救治COVID-19患者过程中的一些经验,结合国家各项指南,最新研究及文献,总结整理出一个疫情期间手外科患者诊疗的流程建议及注意事项,希望为广大的手外科医生提供参考。 无 康皓 黄启顺 劳杰 聂铭博 田文 徐文东 杨勇 张滋洋关键词:手损伤 肺炎 新型冠状病毒 诊疗流程