李杨
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：天津医科大学生物医学工程学院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于差异蛋白质组学技术解析xCT缺陷诱导的细胞死亡机制
- 2014年
- 目的对Sut黑色素细胞和野生型黑色素细胞进行高分辨率差异蛋白质组学分析,探讨xCT缺陷引起细胞生长抑制的机制。方法分离Sut黑色素细胞和野生型黑色素细胞总蛋白,进行双向电泳和串联质谱分析,获得数值经Mascot软件处理后通过NCBI及Swiss-Prot蛋白质数据库检索,结合双向凝胶电泳相应点的表观等电点、相对分子质量、匹配肽段的多少和序列覆盖率等综合分析筛选差异蛋白质;逆转录-PCR分析Sut细胞差异蛋白mRNA表达水平,用蛋白免疫印迹法对xCT缺陷的Sut黑色素细胞进行自体吞噬分析。结果与结论得到20个明显上调或下调的蛋白,经MALDI-TOF质谱分析鉴定差异蛋白质,发现与自体吞噬和囊泡运输相关的调控因子(Anxa3、Hist1h2bk、NDRG1、CaM)以及与细胞转移相关的调控因子(S100A-4、S100A-6、波形蛋白)表达发生了改变;对自噬标志蛋白分析发现,在xCT缺陷的Sut细胞中发生了自体吞噬。结果表明,xCT缺陷可能通过与细胞外基质的黏附异常以及激活Sut黑色素细胞中自噬相关的信号通路,从而导致细胞的生长抑制和自噬性死亡。
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- 关键词：蛋白质组学自体吞噬
- xCT影响肝癌细胞转移的作用机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨人类肝细胞癌中xCT(氨基酸转运系统system xc的功能性亚基)的表达对于自噬、EMT(上皮细胞间质化)和肿瘤细胞转移的影响。方法:用Western Blot和RT-PCR方法检测肿瘤细胞在xCT抑制剂SASP(柳氮磺胺毗啶)的作用下,其自噬和EMT过程相关基因的表达水平的改变。伤口愈合实验和Transwell分析xCT在受到抑制后,肿瘤细胞迁移能力的改变。结果:SASP处理过的97H人类高转移肝癌细胞与对照组相比,自噬相关蛋白LC3和Beclin1表达升高,EMT的标志物E-cadherin表达升高,Vimentin的表达降低,参与EMT过程的重要转录因子Snail表达降低。结论:抑制xCT的表达可以使人类高转移肝癌细胞发生自噬,降低转录因子Snail的表达,从而减弱EMT过程的发生并降低人类高转移肝癌细胞的转移能力。
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- 关键词：肝癌细胞自噬
