- 一种无血清培养基添加剂、无血清培养基及其应用
- 本发明属于细胞工程技术领域，具体涉及一种无血清培养基添加剂、无血清培养基及其应用。本发明提供的添加剂，有效成分包括黄芩素或原花青素，在一定程度上提高目的蛋白在CHO细胞中的表达水平；进一步本发明优化黄芩素和原花青素的浓度...
- 王小引郭潇王天云杜秋杰单琳琳王耀坤孙秋丽
- 一种实验室用小白鼠笼
- 本实用新型涉及实验室设备，特别是一种实验室用小白鼠笼。它包括内笼和外笼，内笼为圆柱状，外笼为圆环状，内笼的周壁两侧设有两组轴承，外笼通过该两组轴承活动安装于内笼外；所述的内笼内部设有食槽及水槽，内笼的侧壁正面设有门，背面...
- 石如玲孟冬丽王沙沙孟庆杰张紫阳王丹丹孙秋丽纪晨燕
- 文献传递
- 小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子
- 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域，具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合，合成小分子肽，作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物，能...
- 王天云林艳孙秋丽张玺米春柳耿少雷王冲
- 文献传递
- 微环载体与基因治疗
- 2015年
- 基因治疗是将有治疗作用或正常基因的DNA序列导入靶细胞,通过纠正基因缺陷或发挥治疗作用而达到治疗疾病的目的。基因治疗的关键技术之一是研发用于真核细胞转移基因的安全有效的载体系统。病毒和非病毒载体系统均有各自的优势和缺点。微环载体是一种来源于质粒DNA的新型的较小的超螺旋表达元件,通过在大肠杆菌体内发生位点特异性结合而产生,并已应用于基因治疗。由于微环载体缺乏原核DNA骨架序列,如抗生素基因、原核复制起始点等,可提高治疗基因表达水平、基因治疗的安全性及降低炎症反应。本文就微环载体的产生、提高转基因表达的机制及在基因治疗中的应用作一综述。
- 张玺孙秋丽王小引王天云
- 关键词：基因治疗转基因表达
- 核基质附着区调控CHO细胞转基因表达序列分子特征的研究
- 背景利用基因重组技术可生产具有治疗作用的重组蛋白。针对重组蛋白的生产,目前应用最多的细胞表达系统是中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统。但是CHO细胞表达系统存在转基因表达不稳定...
- 孙秋丽
- 关键词：核基质附着区CHO细胞转基因表达
- 文献传递
- 内含子方向对MAR表达载体重组CHO细胞转基因表达的调控作用被引量：1
- 2016年
- 目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一段内含子序列酶切正向、反向连接到载体上。酶切和测序鉴定正确后,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,ELISA分析氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因的表达水平。结果具有正向内含子的含MAR和不含MAR的表达载体CAT基因表达水平均高于含反向内含子的表达载体(P<0.05),反向内含子存在情况下,MAR不能提高转基因表达。结论在重组CHO细胞中,内含子的方向影响转基因表达水平,正向内含子和MAR能提高转基因表达,反向内含子不能提高转基因表达水平。
- 李琴赵春澎王小引孙秋丽王天云
- 关键词：核基质结合区内含子转基因表达CHO细胞
- 人源化细胞瞬时表达用表达载体、表达系统、构建方法及其应用
- 本发明属于重组蛋白表达技术领域，具体涉及人源化细胞瞬时表达载体、表达系统及其应用。本发明构建的表达载体，引入TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件，并且TAP作为独立表达框，相比未引入该元件的表达载体，能够成倍提高目的蛋白...
- 王天云林艳米春柳李波耿少雷陈芷涵孙秋丽郭潇
- 文献传递
- 重组中国仓鼠卵巢细胞表达系统高效表达载体研究进展被引量：2
- 2016年
- 生物制药是21世纪高科技产业,治疗性重组蛋白的生产是生物制药的重要部分。宿主细胞以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞用途最为广泛,近70%宿主细胞是用CHO细胞表达系统生产的。影响外源蛋白在CHO细胞中表达的因素很多,其中表达载体是重要因素之一。构建重组CHO细胞表达系统高效表达载体可以利用核基质附着区、泛在染色质开放元件,构建特定位点重组载体系统,以及选择合适的内部核糖体进入位点及弱化筛选标记等实现。CHO细胞表达高效载体构建涉及多个因素,需要进行不同元件的优化,才可达到高效表达。
- 孙秋丽王天云
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞核基质附着区内部核糖体进入位点
- 大豆异黄酮在制备CHO细胞无血清培养基中的应用
- 本发明属于无血清培养基技术领域，本发明提供了大豆异黄酮在制备CHO细胞无血清培养基中的应用。本发明将大豆异黄酮作为添加剂添加到CHO细胞无血清培养基中，所述大豆异黄酮在所述CHO细胞无血清培养基中的终浓度为0.25～3....
- 王小引郭潇杜秋杰孙秋丽赵春澎张俊河王耀坤
- MAR提高重组CHO细胞中转基因表达的分子特性分析
- 2016年
- 分析核基质结合区（matrix attachment region,MAR）调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5＇到3＇端分为6个分段（1-540,421-1 020,901-1 500,1 381-1 980,1 861-2 460,2 341-2 999位置）,分别采用PCR进行克隆,经测序证实正确后,分别连接到含有氯霉素乙酰转移酶（chloramphenicol acetyltransferase,CAT）报告基因的表达载体SV40启动子及上游,构建β-珠蛋白MAR渐次片段介导的表达载体,转染CHO细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,ELISA分析CAT报告基因的表达水平,生物信息学分析MAR序列特征。结果表明,β-珠蛋白MAR全长能显著提高转基因的表达,6个渐次片段相比较,421-1 020位的第2个分段和901-1 500位的第3个分段提高转基因表达作用显著。生物信息学分析结果显示,MAR-like motif有助于转基因表达提高。
- 孙秋丽张俊河赵春澎王小引王天云
- 关键词：核基质结合区CHO细胞转基因表达
