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雷云: 作品数：24 被引量：73H指数：6; 供职机构：贵州大学更多>>; 发文基金：贵州省科技计划项目贵州省科学技术基金贵州省科技厅重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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鸭源H6N6禽流感病毒贵州株NS基因的克隆及序列分析: 2016年; 为明确贵州地区鸭群中H6N6亚型禽流感病毒(AIV)中非结构蛋白基因(NS)系统进化情况,试验于2014年从贵州省健康三穗鸭体内分离鉴定出的一株H6N6亚型禽流感病毒A/duck/Guizhou/013/2014(DK/GZ/14),对其禽流感病毒NS基因进行扩增,并克隆到p MD-18T载体中测序,获得NS蛋白的完整编码序列;同时将NS核苷酸序列与Gen Bank中已有的参考序列作比对。结果表明:DK/GZ/14的NS基因与江西毒株2009年鸭源H6N6亚型禽流感病毒同源性最高,达99.5%;由遗传进化树可知,NS基因在遗传进化关系上与2009年广西分离株位于同一分支,而与2005年分离的汕头毒株不处于同一分支,DK/GZ/14与邻省的H6N6毒株亲缘关系较近。; 嵇辛勤陈佳琪段志强阮涌雷云陈强周标彭郁霖武露娟; 关键词：NS基因克隆进化分析

鸭疫里默氏杆菌贵州分离株的耐药性及致病性分析: 引言鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）病是由鸭疫里默氏杆菌感染的一种急性、高度接触性传染病,易侵害2～8周龄的雏鸭、鹅等禽类。由于引起雏禽的发病率和死亡率高,造成的经济损失巨大,因此...; 雷云嵇辛勤段志强陈佳琪陈强万彪胡焱龙丹丹; 关键词：鸭疫里默氏杆菌分离株心包液耐药性

共表达RA OmpA与鸭IL-2重组质粒的构建及免疫研究: 鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer;RA）病是由鸭疫里默氏杆菌感染引起的一种急性、高致病性传染病。目前已呈世界性流行，是严重危害养鸭业的主要细菌性传染病之一。RA的血清型众多，且不同血清型之...; 雷云; 关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A 白介素-2 免疫增强

1株H6N6亚型禽流感病毒贵州分离株HA和NA基因克隆与序列分析被引量：1: 2016年; 为了解H6亚型禽流感病毒(AIV)在贵州地区的流行情况,本研究对2014年从贵州省三穗鸭体内分离鉴定出的1株H6N6亚型AIV(A/duck/Guizhou/013/2014)HA和NA基因进行了克隆和序列分析。结果显示,A/duck/Guizhou/013/2014的HA基因与华东地区2009年鸭源H6N6亚型AIV同源性最高,达97.5%,HA蛋白裂解位点的氨基酸序列为P-Q-I-E-T-R-G,符合低致病性AIV的分子特征;而NA基因则与福建2007年鸭源H6N6亚型AIV同源性最高,达98.2%;由遗传进化树分析结果可知,HA和NA基因在遗传进化关系上,与湖南毒株位于同一分支,而与2007年贵州分离的3株H6N6亚型AIV不处于同一分支,说明A/duck/Guizhou/013/2014与本地区的H6N6亚型AIV亲缘关系较远。本研究结果表明当前贵州地区H6N6亚型AIV存在明显的遗传多样性。; 陈佳琪嵇辛勤段志强文明阮涌雷云侯萍; 关键词：禽流感病毒血凝素基因神经氨酸酶基因

鸭消化道寄生虫感染的初步调查研究: 鸭消化道寄生虫是指寄生于鸭胃肠道内的一类低等动物。由于鸭消化道寄生虫种类繁多,当鸭体受寄生虫侵害后,会引起机体组织损伤,营养吸收不良等,严重危害鸭群的生长发育和繁殖,给养鸭业造成巨大的经济损失。本研究针对贵州省三穗地区养...; 万彪嵇辛勤雷云胡焱陈强陈佳琪; 关键词：消化道寄生虫感染率

不同新城疫疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果比较被引量：1: 2017年; 为探讨不同新城疫(ND)疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果,选用NDⅠ系活疫苗(CS2株)、Ⅳ系灭活疫苗(La Sota株)和重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)分别对三穗麻鸭进行免疫实验,检测疫苗最小免疫剂量、免疫鸭的抗体滴度和消长规律,以及病毒感染免疫鸭后的排毒情况。结果显示,活疫苗CS2株、灭活疫苗La Sota株、灭活疫苗A-Ⅶ株的最小免疫剂量分别为1.0 m L/只、0.5 m L/只和0.2 m L/只;3种疫苗2次免疫要高于1次免疫产生的抗体滴度,但各免疫组不同免疫次数鸭的抗体滴度均在第60天达到高峰,其中以灭活疫苗A-Ⅶ株1次或2次免疫诱发的抗体滴度最高(分别为7.5log2和8.1log2),并且抗体持续期长,在免疫后第150天抗体水平仍能达到免疫保护要求;对免疫鸭的排毒检测发现,活疫苗CS2株免疫后的鸭持续排毒,灭活疫苗La Sota株免疫后的鸭排毒量少且时间短,而灭活疫苗A-Ⅶ株免疫后的鸭未检测到排毒。试验结果表明,重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)在免疫剂量、免疫次数、免疫鸭的抗体滴度和持续时间,以及抑制免疫鸭排毒方面均明显优于传统ND疫苗。; 胡焱嵇辛勤阮涌赵佳福雷云段志强刘秀梵; 关键词：新城疫病毒新城疫疫苗免疫效果

鸭疫里默氏杆菌贵州分离株OmpA及16S rRNA基因序列分析被引量：3: 2016年; 为了解鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）贵州分离株外膜蛋白A（Omp A）和16 S r RNA基因序列的相关性以及与RA血清型之间的关系,对12株RA贵州分离株通过PCR分别扩增Omp A和16 S r RNA基因,并对其构建系统进化树和分析其系统进化关系。结果显示,12株RA分离株Omp A基因分为2个群,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.9%-100.0%和98.4%-100.0%;Omp A蛋白中有规律的变异位点为100（R/G）、143（S/P）、145（T/I）和268（S/P）。12株RA分离株16 S r RNA基因同属1个群,其核苷酸序列同源性为99.4%-100.0%。结果表明,12株RA贵州分离株Omp A基因和16 S r RNA基因序列所属的基因群无明显相关性,并且与RA血清型的分型也无直接关联。; 雷云嵇辛勤段志强阮涌万香萍陈强万彪胡焱龙丹丹; 关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A RRNA

鸭源大肠杆菌β-内酰胺类耐药基因的检测被引量：7: 2015年; 为了解鸭源大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性情况,以及β-内酰胺酶类耐药基因的携带情况,从贵州省三穗县部分规模鸭场的患鸭内脏器官中分离的大肠杆菌中随机选取15株,采用药敏纸片法对其进行8种β-内酰胺类药物敏感试验,采用PCR方法对SHV型、CTX-M型、TEM型β-内酰胺酶类耐药基因进行检测,并对耐药基因序列与Gen Bank中的相关序列进行比对。结果显示,15株鸭源大肠杆菌对8种β-内酰胺类抗生素均存在严重耐药,耐药率高达100%。TEM型和CTX-M型耐药基因均有检出,检出率分别为46.7%和100%,而SHV型耐药基因未检出,其中有7株细菌同时带有两种耐药基因。耐药基因序列比对结果显示,所测菌株序列与数据库中相应耐药基因序列相似性均高达90%以上。; 嵇辛勤李世静文明张人俊刘廷江陈佳琪雷云陈强; 关键词：大肠杆菌 Β-内酰胺类药物耐药基因

犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化被引量：8: 2018年; 为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900bp左右的载体条带和1 755bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0mmol/L IPTG、诱导5h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。; 龙丹丹嵇辛勤段志强阮涌陈强雷云万彪胡焱; 关键词：VP2基因原核表达

贵州省鸭疫里默氏杆菌血清2型灭活疫苗制备及免疫研究被引量：9: 2016年; 为控制贵州省鸭疫里默氏杆菌(RA)的流行,本研究以实验室分离保存的血清2型RA地方优势流行株为菌种,制备了稳定性和安全性较好的甲醛油乳剂灭活疫苗,以其免疫麻鸭后对其抗体滴度进行检测,并于免疫后以RA分离株进行免疫保护攻毒试验。结果显示,该灭活疫苗诱导麻鸭产生的抗体滴度可达1∶3 200,免疫保护率达87.5%,高于商品化的同类灭活疫苗(62.5%)。结果表明利用贵州地区流行的优势血清型RA菌株所制备的疫苗,对防治RA病效果明显。; 嵇辛勤傅心亮阮涌段志强张人俊主性陈佳琪雷云胡炎; 关键词：鸭疫里默氏杆菌血清2型灭活疫苗免疫保护

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