周向东
- 作品数:10 被引量:32H指数:3
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- 辛二酰苯胺异羟肟酸诱导人卵巢癌细胞OC3自噬作用被引量:2
- 2015年
- 目的探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)是否诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬。方法 SAHA0.05,0.25,1.25,6.25和31.25μmol·L-1处理OC3细胞24 h后,倒置显微镜吉姆萨和-瑞氏染色观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活;流式细胞术检测自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)的表达;AO/EB双染色观察红色酸性自噬囊泡的出现;电镜直接观察自噬囊泡的结构。结果不同浓度SAHA处理后,OC3细胞形态呈不规则梭形或多角形,细胞空泡化增多,折光性差。MTT结果表明,不同浓度SAHA处理对OC3细胞的存活具有明显的抑制作用,并存在时间和浓度效应关系,浓度相关系数分别为r12 h=0.898,r24 h=0.976和r48 h=0.952(P<0.05),SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25μmol·L-1时,时间相关系数分别为0.999,0.654,0.999,0.869和0.922(P<0.05)。SAHA与OC3细胞作用24 h后,AO/EB双染色可见红色酸性自噬囊泡出现;进一步电镜观察,可观察到自噬囊泡结构;流式细胞术检测结果表明,与正常对照组相比,SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25μmol·L-1处理OC3细胞24 h后,LC3B阳性细胞比率显著升高,分别为(19.4±2.4)%,(28.5±3.4)%,(34.6±3.9)%,(38.6±3.2)%和(61.8±1.0)%(P<0.05)。结论SAHA可能通过诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬而杀伤肿瘤细胞。
- 赵岳刘朝晖张思刘元林周向东王洋童英张毅
- 关键词:卵巢肿瘤自噬
- 肿瘤转移抑制基因1及Gli1基因在子宫内膜腺癌细胞系中的表达被引量:3
- 2016年
- 目的探讨肿瘤转移抑制基因1(metastasis suppressor 1,MTSS1)及Gli1基因在子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa和HEC-1A中的m RNA的转录及蛋白表达水平。方法体外培养子宫内膜高分化腺癌细胞系Ishikawa和中分化腺癌细胞系HEC-1A细胞,采用RT-PCR和Western blot法分别检测两株癌细胞系中MTSS1和Gli1基因m RNA的转录及蛋白的表达水平。结果子宫内膜高分化腺癌细胞系Ishikawa中MTSS1基因m RNA的转录及蛋白的表达水平显著高于中分化细胞系HEC-1A(P<0.05),Ishikawa细胞系中Gli1基因m RNA转录及蛋白表达水平显著低于HEC-1A细胞系(P<0.05)。结论 MTSS1可能作为转移抑制基因,通过调控Sonic hedgehog(Shh)信号通路参与子宫内膜腺癌的发生发展,为进一步研究子宫内膜腺癌的发生发展机制奠定了基础。
- 周向东李雪马彦张萍萍张思刘元林王洋童英张毅
- 关键词:子宫内膜腺癌ISHIKAWA细胞
- 宫颈癌中MTSS1基因的表达及其临床意义被引量:3
- 2016年
- 目的检测宫颈正常组织以及不同临床分期宫颈癌组织中转移抑制基因1(metastasis suppressor 1,MTSS1)的表达,分析该基因在各组织中的变化与临床病理因素的关系,并初步探讨该基因在宫颈癌发生发展及转移过程中的作用及分子机制。方法取2011年12月至2014年12月期间采集的103例宫颈组织,病理切片诊断患者宫颈组织类型,判断分化程度,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western印迹法检测不同宫颈组织中MTSS1基因及其蛋白的表达水平。结果 q-PCR结果提示,ⅡB-Ⅳ期宫颈癌组MTSS1基因表达量明显高于正常宫颈组及Ⅰ-ⅡA期宫颈癌组,3组间均有明显差异(P=0.000);Western印迹检测MTSS1蛋白在正常宫颈组织中的阳性表达率为23.3%,在宫颈癌组织中为53.3%,两组间差异明显(P=0.002);MTSS1在宫颈癌组织中的表达与年龄、分化以及有无淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05),而在临床分期中,ⅡB-Ⅳ期MTSS1蛋白表达率明显高于Ⅰ-ⅡA期的宫颈癌组织(P=0.005)。结论 MTSS1的表达与宫颈癌的临床分期呈正相关趋势,该基因可能在宫颈癌的发生发展中起着重要的作用。
- 张思刘元林周向东赵岳童英张毅
- 关键词:宫颈肿瘤基因表达
- 环巴胺对子宫内膜癌HEC-1A细胞存活与凋亡的影响
- 2017年
- 目的探讨环巴胺(cyclopamine,CYP)对人子宫内膜癌HEC-1A细胞存活及凋亡的影响。方法采用0,5,10,20,40μmol/L CYP处理HEC-1A细胞24 h,倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测细胞增殖,AO/EB双染法观察死亡细胞;流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI法检测细胞发生的凋亡率,Q-PCR法检测Bax和Bcl-2基因的表达水平。结果 CYP处理导致HEC-1A细胞形态发生明显改变,且具有CYP浓度依赖性;CCK-8结果显示,CYP可显著抑制HEC-1A细胞的增殖(P<0.05);AO/EB染色结果表明,CYP可诱发HEC-1A细胞大量死亡;流式细胞术检测发现CYP可导致HEC-1A细胞凋亡,且随CYP浓度的升高HEC-1A细胞发生凋亡的比例升高(P<0.05);Q-PCR检测凋亡相关基因表达。结果显示,CYP处理可诱导HEC-1A细胞上调表达Bax基因,下调表达Bcl-2基因。结论 CYP可抑制人子宫内膜癌细胞HEC-1A的存活并诱导其发生凋亡。
- 张萍萍李雪刘元林张思周向东童英张毅
- 关键词:子宫内膜癌环巴胺
- MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及意义被引量:8
- 2016年
- 目的探讨MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义。方法选取2010年5月—2015年7月我院妇产科收治的36例子宫内膜腺癌患者的病变内膜组织作为研究组,同时选取36例因子宫平滑肌瘤行全子宫切除术的患者的子宫内膜组织作为对照组,采用免疫组化法检测2组研究样本中MTSS1和Gli1蛋白的阳性表达情况。结果研究组患者的病变组织中MTSS1蛋白阳性表达率明显低于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05);Gli1蛋白阳性表达率明显高于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05)。结论 MTSS1蛋白在子宫内膜腺癌组织中低表达,Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中高表达,两种蛋白可能与子宫内膜癌的发生、发展存在密切关系,有可能成为子宫内膜腺癌诊断及病情监测的辅助参考指标。
- 周向东王红芳刘露姜博张思童英
- 关键词:子宫内膜腺癌GLI1蛋白
- 宫颈癌中MTSS1基因与Shh信号通路的关系研究被引量:1
- 2016年
- 目的初步探讨宫颈癌中转移抑制基因1(MTSS1)与Shh信号通路间的关系。方法取2011年12月至2015年10月期间采集的90例宫颈组织,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测正常宫颈组(A组)、早期宫颈癌组(B组)及中晚期宫颈癌组(C组)中MTSS1基因及Shh信号通路相关基因的表达水平;Western印迹法及免疫组化检测MTSS1及Gli1蛋白表达情况。结果 q-PCR结果显示,随着临床分期的升高,MTSS1、Ptch、Smo及Gli1基因表达水平逐渐升高,其中C组中4个基因mRNA表达量均最高(P<0.01);Western印迹结果显示,C组MTSS1蛋白表达率明显高于B组及A组(P<0.05);免疫组化检测MTSS1及Gli1蛋白在B和C组较A组中的表达增强,其中C组中两者多为强阳性表达。结论宫颈癌发生发展中MTSS1的表达与Shh信号调控相一致,均随癌症发展表达增强,可能同为预测宫颈癌发生发展的指标与潜在的治疗靶点。
- 张思李雪刘元林周向东张萍萍童英张毅
- 关键词:宫颈肿瘤HELA细胞SHH信号通路
- 腹腔镜与开腹手术治疗盆腔脓肿效果对比观察被引量:13
- 2016年
- 目的:观察比较腹腔镜与开腹手术治疗盆腔脓肿的效果。方法:选择盆腔脓肿66例,随机分为观察组31例和对照组35例。观察组行腹腔镜手术,对照组行开腹手术,比较两组手术时间、术中出血量、术后排气时间、白细胞复常时间、退热时间、住院时间及术后不良反应发生率、复发率等。结果:观察组手术时间、术中出血量、术后排气时间、白细胞复常时间、术后退热时间及住院时间均显著少(短)于对照组(P<0.05)。观察组术后不良反应发生率、复发率显著或非常显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:腹腔镜手术治疗盆腔脓肿效果优于开腹手术。
- 周向东刘露姜博童英
- 关键词:腹腔镜手术开腹手术盆腔脓肿
- 顺铂通过抑制转移抑制基因1-细胞外信号调节激酶及丝氨酸/苏氨酸激酶激活抑制HeLa细胞增殖被引量:1
- 2016年
- 目的研究顺铂(DDP)抑制He La细胞增殖的分子机制。方法用顺铂0.02~75μmol·L-1处理He La细胞24或48 h,CCK-8法检测细胞存活,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR(q-PCR)检测转移抑制基因1(MTSS1)基因的表达,Western蛋白质印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)和转移抑制基因1(MTSS1)蛋白水平。结果不同浓度DDP处理He La细胞24或48 h,可明显抑制He La细胞增殖(P〈0.05),细胞的半数抑制浓度(IC50)值分别为4.14和11.82μmol·L-1;DDP处理组He La细胞较对照组迁移能力下降(P〈0.05);DDP使He La细胞周期阻滞于S期;DDP抑制He La细胞MTSS1的基因表达,存在明显的浓度效应关系(r24 h=-0.965,P〈0.01;r48 h=-0.953,P〈0.01);p-ERK,p-AKT及胞内MTSS1蛋白表达水平均随DDP浓度增加显著下降(pERK:r24 h=-0.875,P〈0.01;r48 h=-0.966,P〈0.01;p-AKT:r24 h=-0.831,P〈0.01;r48 h=-0.863,P〈0.01;MTSS1:r24 h=-0.969,P〈0.01;r48 h=-0.988,P〈0.01)。结论 DDP可能通过下调MTSS1的表达水平并抑制ERK和AKT信号通路的激活而抑制宫颈癌He La细胞增殖和迁移。
- 张思刘元林李雪周向东赵岳张萍萍童英张毅
- 关键词:顺铂细胞外信号调节激酶
- 人子宫内膜腺癌来源间充质干细胞的分离鉴定及生物学特性研究
- 目的:分离培养并鉴定子宫内膜腺癌组织来源间充质干细胞( Endometrial adenocarcinoma derived Mesenchymal Stem Cells,ECMSCs),比较其与正常子宫内膜组织来源的间...
- 周向东
- 关键词:间充质干细胞子宫内膜腺癌生物学特性免疫调节功能