李和 作品数:9 被引量:13 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人凝血因子Ⅸ∶Ag酶联免疫测定法的建立 1997年 采用抗人凝血因子Ⅸ单克隆和多克隆两种抗体,建立了人凝血因子Ⅸ抗原(FⅨ∶Ag)酶联免疫测定法(ELISA)。标准曲线相关系数为0.993(P=0.001,n=5),测定范围(6.25~100)U/L,最低检测量1.5U/L;批内及批间变异系数分别为7.25%和4.73%,回收率99.7%;与人血浆中其它蛋白质未见交叉反应。测得20人份正常人血浆中FⅨ∶Ag为(1027±172)U/L,与FⅨ促凝活性(FⅨ∶C)测得值比较,差异无显著性(P>0.5)。重症乙型血友病人血浆FⅨ∶Ag测得值与临床诊断相符。 丁卫 肖小璞 李和 闻欣 周宇 王海龄关键词:凝血因子IX 酶联免疫法 单克隆抗体 抗人血浆蛋白C单克隆抗体研制的初步报告 被引量:2 1995年 用物理化学方法纯化的人血浆蛋白C(HPC)免疫小鼠,制备了8株分泌抗HPC单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为PC01~PC08。各株杂交瘤细胞都具有长期稳定的抗体分泌能力,其中PC03为构象特异性单克隆抗体,二价金属离子对其与HPC的结合有明显影响;PC02和PC03对活性蛋白C的酶活性有促进作用;而PC04具有抑制作用。 王海龄 李和 于劼 肖小璞 钟峻关键词:单克隆抗体 缺凝血因子Ⅸ血浆的质量考察 1997年 缺凝血因子Ⅸ血浆*的质量考察610081中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所肖小璞于李和丁卫闻欣周宇赵建阳周红1王海龄过去我国不能普遍开展凝血因子Ⅸ促凝活性(FⅨ∶C)检测的主要原因是,从重症乙型血友病人体内采集血浆非常不易,故难以获得缺凝血因... 肖小璞 李和 丁卫 闻欣 周宇 赵建阳 周红 王海龄关键词:血友病 单克隆抗体 血浆 免疫亲和层析法纯化蛋白C 被引量:5 1993年 研制一种蛋白 C(PC)的特异单克隆抗体(McAb),它可以识别在钙离子存在与否的条件下呈现不同构象的 PC 抗原,将其偶联至 Sepharose 4B 凝胶上,组成亲和层析柱。凝胶上的 McAb 能连接无钙离子血浆中的 PC,这种免疫纯化法一步即可达到12000倍的纯化。PC 成品的比活性为180~230U/mg,在非还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现两条带(α-PC 和β-PC),在还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现5条带(α-SC-PC,β-SC-PC,α-HC,β-HC 和 LC)。 王海龄 钟峻 肖小璞 李和 于劼关键词:蛋白C 单克隆抗体 镁钙离子诱导的人凝血因子Ⅸ、蛋白C的构象变化及其与相应特异单抗的连接状态 1996年 用圆二色光谱、荧光光谱及紫外差光谱研究镁钙离子诱导的FⅨ、PC的构象变化并通过蛋白负染电镜及荧光偏振实验观察了各构象与FⅨ、PC特异单抗的连接状况。FⅨ、PC在镁钙离子诱导下,其3种光谱均发生显著变化,并且与缓冲液中的金属离子浓度有关。FⅨ、PC的特异单抗仅与FⅨ、PC的某种特定构象发生连接反应。 王海龄 赵建阳 肖小璞 于 李和关键词:蛋白C 蛋白构象 单克隆抗体 单克隆抗体免疫亲和层析法制备缺凝血因子Ⅸ人基质血浆的初步报告 被引量:1 1990年 本文报告在 Mg^(++)存在下,将一种能特异地连接凝血因子Ⅸ的单克隆抗体偶联至 Affi-Gell5凝胶上,组成亲和层析柱,新鲜血浆通过该柱时, 唯独因子Ⅸ被吸附,流出液即为成品,以此制备缺因子Ⅸ基质血浆。成品内残余的因子Ⅸ极少(<1%),而其他凝血因子的活性基本末变。分别用本成品和重症乙型血友病病人血浆测定因子Ⅸ活性,再将两者的结果进行比较,相关系数 r=0.93(n=26),表明本成品可作为重症乙型血友病病人血浆之代用品。本法制备缺因子Ⅸ基质血浆快速、简便,仅需一步即可完成。 王海龄 肖小璞 丁卫 李和关键词:血友病 血浆 缺蛋白C血浆的研制 被引量:1 1995年 选择一种可识别有含Ca^(2+)或无Ca^(2+)条件下呈现不同构象蛋白C(Protein C,PC)的特异单克隆抗体(McAb),将其与Sepharose 4B凝胶偶联制成亲和层析柱。新鲜人血浆通过该柱时,仅PC被吸附,流出液即为缺蛋白C血浆(Protein C Deficient Plasma,PCDP)。经检测,PCDP内残余的PC<1%,其它凝血因子含量或活性基本未变。用含Ca^(2+)缓冲液清洗层析柱后(洗脱物Pc为另一重要产品),该柱可反复使用。 肖小璞 李和 于劼 赵建阳 周宇 闻欣 王海龄关键词:蛋白C 单克隆抗体 人血浆蛋白C的酶联免疫测定法的建立 被引量:4 1995年 人血浆蛋白C(Human protein C,HPC)是维生素K依赖蛋白的一种,在调节血凝和纤溶过程中起着重要作用。HPC的缺乏,可以导致多种血栓性疾病,如静脉血栓、脑栓塞、新生儿突发性紫癜、严重中风和播散性血管内凝血(DIC)等。因此,在研究HPC缺乏的临床生理病理,以及在HPC制剂的制备和临床应用方面,HPC抗原(HPC:Ag)水平的检测都有着重要的意义。 国外目前采用3种方法测定HPC:Ag,即ELISA法、放射免疫测定法和火箭电泳法。放射免疫测定法所需仪器设备复杂,一般实验室难以开展;火箭电泳法特异性差,敏感性低,并且受抗血清制备规模的限制。 李和 于劼 肖小璞 王海龄关键词:酶联免疫测定 单克隆抗体 凝血因子Ⅸ促凝活性测定方法的条件选择 被引量:3 1994年 凝血因子Ⅸ促凝活性测定方法的条件选择610081中国医学科学院输血研究所肖小璞,丁卫,李和,于,钟峻王海龄(指导)人血浆凝血因子Ⅸ促凝活性(FⅨ:C)的测定在出凝血疾病的诊断中具有重要的意义。过去在我国不能普遍开展一期法FⅨ:C检测,主要是难以得到缺... 肖小璞 丁卫 李和 于 钟峻关键词:凝血因子 血浆 生化检验