贾岚
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- CD40L对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗的免疫增强作用研究
- 2015年
- 目的研究重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力。方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pc DNA3-Kan/CD40L。(2)体外细胞实验:检测重组质粒p CD40L刺激小鼠外周血淋巴细胞增殖情况和脾细胞分泌IFN-γ的能力。(3)体内动物实验:48只雌性BALB/c小鼠随机分为4个免疫组p K组、pg D组、pc CD40L+pg D组和p K+pg D组。小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周。末次免疫3周后,每组随机取4只小鼠进行致死剂量攻毒实验验证疫苗的保护作用。ELISA检测小鼠血清抗HSV-2 Ig G抗体水平和趋化因子RANTES;流式细胞术检测全血中CD4+和CD8+T细胞百分率以及分泌IFN-γ和IL-4的T细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T细胞的增殖能力。结果 (1)体外实验结果:重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L对小鼠外周血淋巴细胞的增殖能力和刺激脾细胞分泌IFN-γ的能力均显著大于空质粒pc DNA3-Kan(P<0.05)。(2)体内实验结果:小鼠血清抗HSV-2 Ig G水平、趋化因子RANTES、脾淋巴细胞刺激指数和外周血CD4+T细胞数和分泌IFN-γ的Th1细胞数均高于其他免疫组(P<0.05)。pc DNA3-Kan/CD40L+pg D组预防小鼠感染HSV-2效果好于其他免疫组。结论 (1)重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L能够诱导外周血淋巴细胞增殖并刺激脾细胞分泌IFN-γ具有作为疫苗佐剂的潜力。(2)pc DNA3-Kan/CD40L可以辅助HSV-2 DNA疫苗诱导BALB/c小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫和细胞免疫,具备作为HSV-2 DNA疫苗免疫佐剂的能力。
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- 一种预防单纯疱疹病毒II型的疫苗
- 本发明公开了一种预防单纯疱疹病毒II型的疫苗。本发明通过分子生物学手段，将单纯疱疹病毒II型的糖蛋白D基因组合到含卡那抗性的真核表达载体pKan中，构建包括含全长的糖蛋白D基因的真核表达质粒pgD和含如SEQ ID NO...
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- 文献传递
- 霍乱毒素B亚单位作为免疫佐剂的研究进展被引量：1
- 2015年
- 霍乱肠毒素（CT）是霍乱弧菌重要的毒力因子，内含A和B两个亚单位。A亚单位（CTA）为毒性亚基，B亚单位（CTB）不具毒性。CTB因其独特的生理功能已成为重要的佐剂之一，近年来备受各国学者重视。深入探究CTB的免疫调节机制有助于更好地设计疫苗并优化其效果，此文将对CTB作为免疫佐剂在疫苗研究中的进展进行综述。
- 贾岚洪艳
- 关键词：霍乱毒素佐剂疫苗
- 检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立被引量：1
- 2016年
- 目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）DNA的实时荧光定量PCR方法，为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法。方法依据HSV-2糖蛋白D（gD）基因序列，使用序列比对软件，选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选；以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2gD作为标准模板，对该检测方法的反应条件进行优化，提高其检测特异性、敏感度和重现性。结果该检测方法特异性好，检测的最低拷贝数可达到2个拷贝，线性范围为2×10^0～2×10^8拷贝／反应，是普通PCR敏感度的10^3倍。该检测方法组间和组内变异系数均低于5％，说明该检测方法具有良好稳定性。结论本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点。
- 陶薇傅婷何卓晶洪艳胡如西贾岚
- 关键词：荧光定量PCRTAQMAN探针
- 霍乱病毒B亚单位作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗免疫效果的影响
- 2016年
- 目的研究霍乱病毒B亚单位(cholera toxin subunit B,CTB)作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)DNA疫苗pg D免疫效果的影响。方法将CTB片段克隆至真核表达质粒pc DNA3Kan(p Kan)中,构建基因佐剂pc DNA3Kan-CTB(p CTB)。将BALB/c小鼠随机分为p CTB无疫苗组、pg D/p CTB佐剂组、pg D/p Kan空载体组及PBS对照组,经后腿肌肉多点注射,共免疫3次,每次间隔2周。于末次免疫2周后,经小鼠眼球采血,分离血清,ELISA法检测HSV-2特异性Ig G水平及Ig G1、Ig G2a亚型抗体滴度;制备小鼠脾细胞,MTS法检测小鼠脾脏T细胞增殖能力;将病毒稀释后经腹腔接种小鼠,于免疫2周后,进行HSV-2致死剂量攻毒试验。结果p CTB经双酶切及测序鉴定证明构建正确;pg D/p CTB佐剂组小鼠血清中HSV-2特异性Ig G水平明显高于其他3组(P<0.001),Ig G1和Ig G2a滴度均明显高于pg D/p Kan空载体组(P<0.001),其中Ig G2a增幅更明显,Ig G2a/Ig G1比值与pg D/p Kan空载体组相比,由(1.176±0.11)增加至(1.316±0.07)(P<0.05);pg D/p CTB佐剂组小鼠脾细胞在HSV-2刺激下诱导的特异性T细胞增殖反应明显强于PBS对照组及pg D/p Kan空载体组(P<0.05);攻毒14 d内,pg D/p CTB佐剂组小鼠存活率高达100%。结论 p CTB作为基因佐剂能够显著提高pg D诱导小鼠产生抗原特异性Ig G抗体水平,增强HSV-2特异性T细胞增殖反应,并介导以细胞免疫为主的Th1/Th2混合型免疫反应。
- 贾岚傅婷陶薇何卓晶洪艳
- 关键词：DNA疫苗基因佐剂
