杨蓉蓉
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：王宝恩肝纤维化研究基金国家自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制糖原合成酶激酶-3β活性减少肝细胞凋亡保护D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭损伤被引量：3
- 2015年
- 目的研究细胞信号分子糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)对D-氨基半乳糖/脂多糖(D-GalN/LPS)联合诱导的小鼠急性肝衰竭肝细胞凋亡的影响。方法腹腔注射D-GalN/LPS建立小鼠急性肝衰竭模型。实验动物分为对照组、模型组、SB216763干预组(建模前2 h腹腔注射)。检测血清ALT、AST,TUNEL法测定肝细胞凋亡,免疫荧光染色法及比色法检测Caspase-3活性,Western印迹检测Cleaved Caspase-3蛋白表达。多组样本均数的两两比较采用一步法ANOVA分析。结果 GSK-3β活性升高促进了在小鼠急性肝衰竭的发生和发展:抑制GSK-3β活性可以显著改善肝脏功能,血清ALT、AST水平明显下降。SB216763干预组ALT与AST水平分别为(961.1±356.0)IU/L和(2 709.9±423.9)IU/L,SB216763干预组与模型组相比,Caspase-3活性降低,TUNEL方法检测肝细胞凋亡减少,并且Cleaved Caspase-3的蛋白表达降低。结论在D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝衰竭中,抑制GSK-3β活性可能通过抑制肝细胞凋亡而改善肝损伤。因此,对信号分子GSK-3β活性进行干预有可能为急性肝衰竭的治疗提供一个新的靶点。
- 魏琳琳张莉杨蓉蓉张向颖温韬段钟平任锋
- 关键词：D-氨基半乳糖脂多糖急性肝衰竭糖原合成酶激酶-3Β凋亡
- 细胞自噬在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭中的表达被引量：8
- 2016年
- 目的利用D-氨基半乳糖／脂多糖（D—GalN／LPS）诱导的小鼠急性肝衰竭模型，研究细胞自噬在肝衰竭疾病进展过程中的表达及其作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射nGalN／uIS建立小鼠急性肝衰竭模型。动物实验分组：对照组、D—GalN／LPS诱导肝衰竭模型2h组、D-GalN／LPS诱导肝衰竭模型4h组和D-GalN／LPS诱导肝衰竭模型6h组。检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）评价肝脏功能，观察肝脏组织病理变化评价肝脏损伤情况，实时荧光定量PCR检测自噬相关基因表达，Westernblot测定小鼠肝组织中自噬相关蛋白表达，荧光显微镜观察肝衰竭进展过程中自噬体的表达情况。多组样本均数的两两比较采用One-wayANOVA分析（方差齐者用LSD—t检验，方差不齐者用Games-Howell法），尸〈0．05为差异有统计学意义。结果急性肝衰竭模型组肝功能随着D—GalN／I鹧刺激的进展逐渐受损：ALT、AST在4h后显著增高，肝脏组织病理损伤随时间逐渐加重，6h达到急性肝衰竭标准；自噬相关基因ATG-7、ATG-5、Beclin-1、Lamp-1和LC3amRNA和蛋白在急性肝损伤早中期（2h和4h）表达增高，而进展至肝衰竭（6h）后表达下降；荧光显微镜观察发现给予D—GalN／LPS在4h时间点自噬体的表达最多。结论在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导急性肝损伤早中期，自噬表达逐渐增强，而进展至肝衰竭后自噬表达下降，因此细胞自噬可能在急性肝衰竭的发病机制中发挥着重要作用。
- 魏琳琳张向颖张莉杨蓉蓉时红波温韬陈德喜段钟平任锋
- 关键词：自噬肝脏脂多糖类
- 过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）对脂多糖刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）对脂多糖刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其调节机制。方法通过小鼠的股骨分离骨髓干细胞，经过分化培养获得骨髓来源的巨噬细胞，再通过脂多糖刺激巨噬细胞诱导细胞炎症因子表达的细胞模型。利用PPARα选择性激动州Wy44643干预炎症细胞模型，3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA）和Atg7小干扰RNA（Atg7 siRNA）分别作为自噬抑制剂干预自噬。通过实时定量PCR方法检测炎症细胞因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6和自噬相关基因Atg5、Atg7、Beclin-1的mRNA表达水平；通过免疫印迹技术检测自噬相关蛋白Atg5、Ats7、Beclin-1和LC3的表达；质粒GFP-LC3转染并观察自噬点的形成。结果研究表明，不同浓度的PPARct选择性激动剂wy14643（10μmol／L、25μmol／L和50μmol／L）预处理LPS刺激的巨噬细胞，与单独LPS刺激巨噬细胞相比，细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达下降，并具有削量依赖性。此外，不同浓度Wy14643作用于巨噬细胞，也同时促进自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Beclin-1的mRNA水平表达升高；Western blot结果显示自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Beclin-1和LC3表达增加；荧光显微镜观察显示巨噬细胞中自噬点的形成增加。在Wy14643预处理的基础上，3-MA和Atg7siRNA分别抑制细胞自噬，结果显示炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平发生了逆转，重新表达升高。结论PPARα激活可抑制LPS刺激巨噬细胞诱导的促炎细胞因子的表达，并且PPARα通过促进细胞自噬而发挥抗炎作用。因此，PPARα-自噬分子途径是调控LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的信号通路之一。
- 杨蓉蓉张莉张向颖时红波陈德喜段钟平任锋王琦
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Α细胞自噬炎症反应巨噬细胞脂多糖
- Caspase-1介导糖原合酶激酶-3β促进D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭肝损伤被引量：2
- 2016年
- 目的研究半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶-1（caspase-1）在D-氨基半乳糖（D—GaIN）联合脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肝衰竭（ALF）中的作用及其可能机制。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，通过腹腔注射溶于生理盐水的D—GaIN（450rag／kg）联合LPS（10μg/kg）构建小鼠ALF模型；将小鼠分为对照组、氟甲基酮（easpase-1抑制剂，Z—WEHD—FMK）单独处理组、ALF组、Z—WEHD—FMK干预组。组织病理学分析及血清转氨酶活性测定观察肝组织损伤严重程度；Westernblot检测肝脏组织中easpase-1以及糖原合激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的表达；qRT—PCR检钡4细胞炎症因子基因表达。结果easpase-1mRNA和蛋白水平在急性肝衰竭疾病进展过程中活性升高。给予Z—WEHD—FMK抑制caspase-1活性后，可显著改善肝脏病例损伤并且降低血清ALT、AST水平[AIJT：z—wEHD—FMK干预组（479．2±39．5）U／L，ALF组（998．5±60．4）U／L，P〈0．05；AST：Z—WEHD—FMK干预组（478．5±28．6）U／L，ALF组（1180．7±91．4）U／L，P〈0．05]；此外，z—WEHD—FMK干预组炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18、IL-33的mRNA水平表达下调；Westernblot显示z—WEHD—FMK抑制caspase-1活性后，GSK-3β发生磷酸化而活性受抑制。结论急性肝衰竭疾病进展过程中，caspase-1活化提高了GSK-3β活性，促进炎症反应的发生并导致肝脏组织的损伤。
- 杨蓉蓉任锋张莉张向颖时红波陈德喜段钟平王琦
- 关键词：CASPASE-1糖原合酶激酶-3Β肝功能衰竭
