曹金强 作品数:12 被引量:64 H指数:4 供职机构: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 更多>> 发文基金: 农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目 公益性行业(农业)科研专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
检测茄匍柄霉菌的成套试剂及应用 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的成套试剂及应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的成套试剂由名称为Stem14‑FIP的单链DNA、名称为Stem14‑BIP的单链DNA、名称为Stem14‑F3的单链DNA、名称为Stem14‑... 谢学文 李宝聚 曹金强 石延霞 柴阿丽检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的引物对由名称分别为Stem‑g7F和Stem‑g7R的单链DNA组成;Stem‑g7F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的单链DNA;St... 李宝聚 谢学文 曹金强 石延霞 柴阿丽我国不同地区番茄主要病毒病种类的分子检测与分析 被引量:19 2020年 为了检测和鉴定我国不同地区番茄上的病毒种类,2015-2018年,在不同蔬菜种植区采集431份番茄疑似感病样品。利用已报道侵染番茄的12种主要病毒的特异性引物对样品进行RT-PCR分子检测与鉴定,结果表明:TYLCV在番茄上普遍存在,检出率为65.20%;而ToCV、TMV、CMV、ToMV、TSWV和PVY侵染番茄相对较少,检出率分别为21.11%,20.19%,17.63%,15.31%,14.15%,11.37%;未检测到TICV、PVX、TYLCVNB和BBWV等病毒。通过对番茄病毒复合侵染现象进行分析发现,病毒复合侵染率达35.73%,其中2种病毒复合侵染现象最多,占复合侵染总比的52.60%;3种病毒复合侵染率占复合侵染总比27.92%;4种及5种病毒复合侵染率略低,分别占复合侵染总比0.65%和18.83%。通过对我国20个地区的番茄病毒进行检测,结果表明,在番茄上检出病毒种类最多的为北京地区,检测到7种病毒,其次是山东地区,检测到5种病毒;河南、甘肃及宁夏地区检测到4种病毒;西藏、河北、浙江、陕西、海南地区检测到3种病毒;四川、天津、黑龙江、山西、内蒙古等检测到2种病毒;其他地区只检测到单一番茄病毒种类。同时根据TYLCV和TSWV部分基因序列构建系统发育树,结果表明,TYLCV北京分离物(MK336782)与中国湖南分离物的亲缘关系最近,TSWV河南分离物(MK318839)与山东分离物的亲缘关系最近。 陈利达 石延霞 谢学文 曹金强 柴阿丽 李宝聚关键词:番茄 番茄黄化曲叶病毒 复合侵染 分子检测 抑制南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白P5-1的表达阻碍病毒在昆虫体内的增殖 被引量:3 2015年 为明确南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的非结构蛋白P5-1参于SRBSDV在介体白背飞虱体内侵染过程中的作用机制,通过原核表达蛋白制备SRBSDV编码的非结构蛋白P5-1的多克隆抗体,并应用Western blot和免疫荧光标记法检测抗体的特异性,以注射法将来源于P5-1基因的dsRNA(ds P5-1)注入获毒1 d的白背飞虱体内,5 d后通过免疫荧光标记法检测ds P5-1对SRBSDV在白背飞虱体内增殖的影响,同时以注射来源于GFP基因的dsRNA(ds GFP)为对照。结果显示,Western blot和免疫荧光标记分别检测到SRBSDV侵染水稻和白背飞虱表达的P5-1蛋白,表明所制备的P5-1抗体具有特异性。ds GFP处理的对照组白背飞虱带毒率高达81%,而ds P5-1处理的白背飞虱带毒率仅为21%,且P5-1蛋白的表达和SRBSDV在昆虫体内的增殖均受到抑制。表明P5-1蛋白是病毒在昆虫体内增殖的关键因子,可作为阻断病毒在昆虫体内增殖的理想靶标。 曹金强 王针针 陈红燕 毛倩卓 贾东升 魏太云关键词:南方水稻黑条矮缩病毒 抗体制备 RNA干扰 增殖 茄匍柄霉菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:4 2021年 为了准确检测病残体内茄匍柄霉菌(Stemphylium solani)DNA含量在土壤内的动态变化,本研究根据三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列,设计并筛选特异性引物Stem-g7F/Stem-g7R,能从靶标基因组DNA中特异性扩增出大小为150 bp的目的片段。建立的Stemphylium solani实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测体系的灵敏度比常规PCR高1 000倍,且特异性良好。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.992。利用所建立的qRT-PCR方法对病残体进行检测发现,病残体DNA初始拷贝数为3.69×10^(9)拷贝数/g,经过温度27℃、80%湿度下处理30 d病残体DNA含量下降至1.21×10^(6)拷贝数/g,而在温度27℃、20%湿度下含量为1.29×10^(10)拷贝数/g。因此,建立的S.solani的qRT-PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测病残体S.solani的含量,为番茄匍柄霉叶斑病的早期预防和流行监测提供有效的技术手段。 谢学文 陈利达 曹金强 韩道杰 石延霞 柴阿丽 李磊 李宝聚关键词:实时荧光定量PCR 病残体 检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的引物对由名称分别为Stem‑g7F和Stem‑g7R的单链DNA组成;Stem‑g7F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的单链DNA;St... 李宝聚 谢学文 曹金强 石延霞 柴阿丽李宝聚博士诊病手记(九十九) 番茄花叶病毒对番茄茎部和果实危害严重 被引量:5 2016年 番茄在我国乃至世界上都是种植范围最广的蔬菜之一,具有良好的营养价值和经济效益。然而番茄上的病害也有很多,对番茄的生产造成很大的危害。番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,To MV)寄主范围较广,不仅能侵染茄科、十字花科等蔬菜作物,还能侵染花卉和苗木等,对寄主尤其是番茄的危害十分严重。近年来,随着地域交流的加强、番茄品种的多样化以及天气的变化,番茄花叶病毒病的症状也呈现多样化,且危害不减。 曹金强 柴阿丽 谢学文 石延霞 李宝聚关键词:番茄花叶病毒 寄主范围 MOSAIC 番茄病毒病 番茄生产 北京地区南瓜病毒病病原种类鉴定 被引量:3 2018年 为明确北京地区南瓜病毒病种类及其主要侵染病原,2016~2017年在北京周边采集疑似感染病毒的南瓜病样84份,并根据南瓜上的6种病毒特异性引物对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测。结果表明:共有79份南瓜病样检测显示阳性,其中黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的检出率最高,为52.38%;其次是小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)和西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV),检出率分别为44.01%、14.29%,其他病毒暂未检出。此外,16.67%的样品受2种病毒复合侵染,CMV和ZYMV复合侵染占7.14%,ZYMV和WMV复合侵染占9.52%。北京地区南瓜上优势病毒种类为CMV,且存在病毒复合侵染现象。 陈利达 曹金强 石延霞 柴阿丽 谢学文 李宝聚关键词:南瓜 病毒病 利用RNAi技术鉴定SRBSDV在白背飞虱体内增殖的关键因子 南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus)的一个暂定种,由介体昆虫白背飞虱... 曹金强关键词:南方水稻黑条矮缩病毒 RNAI技术 白背飞虱 体内增殖 李宝聚博士诊病手记(九十三) 番茄斑萎病毒病在宁夏的发现与防治 被引量:24 2016年 番茄斑萎病最早于1915年在澳大利亚被发现,1930年确定由病毒引起,并将引发该病的病原命名为番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus, TSWV)(Samuel et al.,1930)。随后欧美许多国家也报道了番茄斑萎病毒的发生和危害,其中在19世纪八九十年代该病曾暴发流行,给美国夏威夷、意大利等地的番茄、莴苣等作物生产造成毁灭性危害(Soler et al.,2003)。番茄斑萎病毒属于布尼亚病毒(Bunyaviridae)番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的典型成员,番茄斑萎病毒的寄主范围非常广泛,能够侵染84个科1000多种双子叶和单子叶植物,番茄是其主要的寄主之一。蓟马是该病毒的主要传播媒介,其中西花蓟马的传毒率最高。由于该病毒寄主范围广、危害性极大,目前已被列为世界危害最大的十大植物病毒之一,且高居第二位(Scholthof et al.,2011)。 曹金强 谢学文 柴阿丽 李宝聚关键词:番茄斑萎病毒 单子叶植物 寄主范围 西花蓟马 VIRUS