李琴
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRAIL逆转人胃腺癌SGC7901/ADR细胞多药耐药的机制探讨被引量：4
- 2017年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人胃腺癌阿霉素耐药细胞(SGC7901/ADR细胞)多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax表达的影响,以明确TRAIL逆转胃癌多药耐药的可能机制。方法 MTT法检测SGC7901/ADR细胞和其亲本细胞SGC7901对阿霉素、长春新碱、顺铂的药物敏感性。实时荧光定量PCR法检测SGC7901/ADR细胞和SGC7901细胞MDR1、MRP1、Bcl-2、Bax mRNA表达。不同浓度(10、50、100 ng/m L)TRAIL处理SGC7901/ADR细胞后,使用实时荧光定量PCR法、蛋白印迹法检测各处理细胞和空白对照(未加TRAIL)细胞MDR1、MRP、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白的表达。结果药物敏感试验显示,与亲本细胞SGC7901相比,长春新碱、阿霉素、顺铂对SGC7901/ADR细胞的IC50明显提高(P<0.01或<0.05)。SGC7901/ADR细胞中MDR1、MRP1、Bcl-2的mRNA表达量与亲本细胞SGC7901相比上升,Bax mRNA表达量降低(P均<0.01)。TRAIL处理细胞后,下调了SGC7901/ADR细胞的MDR1、MRP1、Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量,提高了Bax mRNA相对表达量,与空白对照相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 TRAIL可能通过下调MDR1、MRP1、Bcl-2和上调Bax的表达促进胃癌耐药细胞的凋亡,进而部分逆转胃癌的多药耐药。
- 孙海兵张开光李琴刘应玲陈思
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药
- 顺铂对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体逆转胃癌多药耐药现象的增敏作用及机制被引量：6
- 2015年
- 目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7901-VCR细胞的半数抑制浓度（ IC50）和细胞存活率。以不同浓度的DDP和TRAIL单独或联合处理SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR、荧光定量PCR和Western blot法检测不同处理组中多种基因的mRNA和蛋白表达。以c-myc-siRNA干扰、重组c-myc质粒转染SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR和Western blot法检测不同处理组SGC7901-VCR细胞中死亡受体（ DR）4、DR5、c-myc基因的mRNA和蛋白表达。结果与单用TRAIL组和空白对照组比较，联合DDP后，VCR、DDP、阿霉素和氟尿嘧啶对SGC7901-VCR细胞的IC50均明显降低（均P＜0．05）。 TRAIL联合DDP时，对SGC7901-VCR细胞中caspase-3的激活作用以及对DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路、耐药基因MDR1、MRP1的抑制程度明显高于TRAIL单独作用时（均P＜0．01）。以siRNA干扰沉默c-myc后，SGC7901-VCR细胞中c-myc、DR4和DR5的表达明显减低（均P＜0．01）；以重组 c-myc质粒转染高表达 c-myc后，SGC7901-VCR细胞中 c-myc、DR4和DR5的表达明显增加（均P＜0．01）。10 ng／ml TRAIL组、0．25μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组和0．5μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组c-myc蛋白的相对表达量分别为0．314±0．012、0．735±0．026和0．876±0．028，细胞色素C（cyt C）蛋白的相对表达量分别为0．339±0．036、0．593±0．020和0．735±0．031，差异有统计学意义（P＜0．05）；DR4、DR5、活性caspase-9和活性caspase-3蛋白的相对表达量也随着DDP 浓度的增加而增加。结论 SGC7901-VCR的多药耐药性与DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路的激活以及耐药基因MDR1和MRP1的高表达有关。与TRAIL 联合时，DDP能够通过增加c-myc的表达促进DR4和D
- 朱邢超张开光王巧民陈思苟雅雯崔喻芳李琴
- 关键词：顺铂肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药相关蛋白质类细胞系
- siRNA抑制Mcl-1基因表达对TRAIL诱导的人胃腺癌SGC7901/ADR细胞凋亡的影响
- 2016年
- 目的 :研究沉默髓样细胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因表达对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人胃腺癌耐多柔比星(adriamycin,ADR)SGC7901/ADR细胞凋亡的影响,并探讨胃癌耐药细胞株耐T RAI L凋亡效应的可能机制。方法 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)处理SGC7901/ADR细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞活力和细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表达水平。采用脂质体转染法将Mcl-1-si RNA转染至SGC7901/ADR细胞,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Mcl-1-si RNA对Mcl-1 m RNA及蛋白表达水平的影响。采用TRAIL(50 ng/m L)处理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR细胞,MTT法和FCM法分别检测Mcl-1基因沉默后TRAIL对细胞增殖及凋亡率的影响,并进一步用蛋白质印迹法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)的表达水平以及凋亡相关蛋白caspase 3和caspase 9的激活情况。结果 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)均能抑制人胃腺癌耐药株SGC7901/ADR细胞的增殖,并诱导其凋亡(P值均<0.05),但敏感性较低;TRAIL能明显提高SGC7901/ADR细胞中Mcl-1m RNA(P值均<0.001)和蛋白(P值均<0.05)的表达水平。Mcl-1-si RNA转染后,SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白表达均明显下调(P值均<0.001)。与阴性对照组(转染阴性对照-siR NA+TRAIL)相比,Mcl-1-siR NA转染后联合应用TRAIL组SGC7901/ADR细胞的增殖能力明显下降(P<0.001),细胞凋亡率明显增加(P<0.001),Cyt C、active-caspase 3和active-caspase 9蛋白的表达水平均明显增加(P值均<0.001)。结论 :TRAIL能上调胃癌耐药细胞株中抗凋亡蛋白Mcl-1表达,siR NA抑制Mcl-1表达可增强TRAIL对SGC7901/ADR细胞的致凋亡作用,提示胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR耐TRAIL致凋亡效应可能与Mcl-1高表达有关。
- 李琴张开光朱邢超孙海兵陈思王巧民
- 关键词：TNF相关凋亡诱导配体细胞凋亡
