朱江
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 光敏剂MPPa介导光动力诱导人乳腺癌细胞MCF-7的内质网应激途径凋亡被引量：1
- 2015年
- 目的探讨光敏剂MPPa(pyropheophorbide-a methyl ester)介导的光动力作用于人乳腺癌细胞MCF-7,诱导内质网应激途径凋亡的机制。方法给予不同浓度光敏剂MPPa(0、0.5、1、2、4μmol/L),以及不同能量光照(0、0.9、1.8、2.7、3.6 J/cm2)处理MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞活力。确定2μmol/L MPPa及1.8 J/cm2光能量为实验剂量。激光共聚焦显微镜观察光敏剂MPPa(2μmol/L)内质网亚细胞器定位。将MCF-7细胞进行完全随机化分组,分为MPPa-PDT组(给予2μmol/L MPPa及1.8 J/cm2光能量)、空白对照组、单纯MPPa组(2μmol/L MPPa)和单纯光照组(1.8 J/cm2光能量)。应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞的凋亡率。Flou-3/MA流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度变化。Western blot检测内质网应激标志蛋白BIP和内质网应激途径相关凋亡蛋白caspase-12、CHOP的表达。结果 MPPa介导光动力对MCF-7细胞有显著杀伤作用,抑制其生长,且抑制作用呈明显的剂量效应关系(P<0.05);MPPa可富集在内质网上;MPPa-PDT组凋亡率显著高于各对照组(P<0.05);MPPa-PDT组细胞内Ca2+荧光强度较对照组增高(P<0.05);Western blot检测发现BIP、caspase-12、CHOP蛋白在MPPa-PDT组中各时间点表达升高,而在各对照组中表达较低。结论 MPPa介导的光动力可诱导MCF-7细胞发生内质网应激途径凋亡。
- 朱江陈青田思贾功伟白定群虞乐华
- 关键词：内质网应激凋亡光动力治疗
- 硫利达嗪诱导人卵巢癌细胞凋亡及其机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨多巴胺受体阻断剂硫利达嗪(thioridazine)对卵巢癌细胞株SKOV3、A2780增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法用不同浓度硫利达嗪(0、5、10、15、20μmol/L)作用SKOV3、A2780细胞,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪及DAPI染色检测细胞凋亡,DCFH-DA法染色检测ROS水平,彗星实验观察细胞核DNA损伤情况,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Western blot检测P53、Bax、Bcl-2、细胞色素C、active Caspase-3蛋白的表达。结果硫利达嗪可抑制人卵巢癌细胞SKOV3、A2780的增殖,呈一定的剂量效应关系(P<0.05),浓度为15μmol/L时,可产生明显增殖抑制效应;流式细胞仪检测显示处理组(15μmol/L硫利达嗪作用24 h)凋亡率明显高于对照组(P<0.05);DAPI染色结果:处理组出现明显细胞核固缩、碎裂及凋亡小体;DCFH-DA染色处理组ROS水平升高(P<0.05);彗星实验结果提示处理组出现明显的DNA损伤;JC-1染色发现处理组线粒体膜电位较对照组下降(P<0.05);Western blot实验发现处理组P53、Bax、胞质细胞色素C、active Caspase-3表达上调,Bcl-2、线粒体细胞色素C表达下调。结论硫利达嗪可能通过诱导细胞内ROS升高损伤DNA,激活线粒体凋亡途径而诱导人卵巢癌SKOV3、A2780细胞凋亡。
- 雍敏田思朱江胡丽娜于廷和
- 关键词：硫利达嗪活性氧物质DNA损伤线粒体凋亡途径
- Mppa介导的光动力疗法诱导人卵巢癌细胞凋亡
- 2015年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸甲酯(methyl pyropheophorbide-a,Mppa)介导的光动力疗法(Mppa-PDT)抑制人卵巢癌SKOV3细胞活性、触发其凋亡的机制。方法将处于对数生长期的人卵巢癌SKOV3细胞随机分为Mppa-PDT处理组(加光敏剂Mppa和LED光照处理)和对照组(空白对照、仅加光敏剂Mppa单药对照、仅接受LED单光对照)。Mppa-PDT作用于人卵巢癌SKOV3细胞后,CCK-8法检测细胞活性;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DAPI染色观察细胞凋亡的核的形态学改变;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)的产生;单细胞凝胶电泳观察DNA损伤情况;蛋白质印迹法检测p53、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达变化。结果 (1)Mppa-PDT能显著抑制人卵巢癌SKOV3细胞的活性,其抑制作用具有一定的剂量依赖性;(2)Mppa-PDT诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡率高于空白对照、单药对照和单光对照组(P<0.05),且空白、单药、单光3组对照组间凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);(3)Mppa-PDT作用于人卵巢癌SKOV3细胞后,DAPI细胞核荧光染色可见细胞核深染的凋亡细胞;DCFH-DA荧光染色发现Mppa-PDT组细胞内ROS水平高于3个对照组;单细胞凝胶电泳显示Mppa-PDT组的DNA损伤情况高于3个对照组;蛋白质印迹法检测发现p53、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论 Mppa介导的光动力疗法能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞活性并诱发其凋亡,且伴随有DNA损伤及线粒体凋亡途径的激活。
- 田思雍敏朱江陈青白定群虞乐华于廷和
- 关键词：光动力疗法活性氧DNA损伤线粒体凋亡途径
