易威威
- 作品数：10 被引量：63H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- NF-κB抑制剂对脂多糖刺激的退变人椎间盘髓核细胞炎症因子表达的影响被引量：24
- 2017年
- 目的观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激退变人椎间盘髓核细胞前后,核因子kapp B(NF-κB)与炎症因子表达及相互关系。方法体外培养退变的人椎间盘髓核细胞,设立对照组、LPS(500μg/m L)刺激组、NF-κB抑制剂(BAY11-7082)+LPS(500μg/m L)刺激组。ELISA方法检测各组细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β的含量,免疫荧光法检测各组髓核细胞内p65的表达及定位,Western blot检测TNF-α、IL-1β、NF-κB结合蛋白p65以及磷酸化p-p65的表达,Real-time PCR检测TNF-α及IL-1β的表达。结果 LPS刺激髓核细胞后,p65入核增多,p-p65表达明显增加,ELISA实验结果表明LPS刺激组细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平升高(P<0.05),Western blot及Real-time PCR检测结果也表明其髓核细胞内炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平明显上升(P<0.05);而与LPS刺激组相比,NF-κB抑制剂+LPS刺激组p65入核减少,p-p65表达明显降低,细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平降低(P<0.05),Western blot及Real-time PCR检测结果也表明其髓核细胞内炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平明显下降(P<0.05)。结论 LPS能够通过激活人退变髓核细胞NF-κB信号通路,促进炎性因子TNF-α及IL-1β表达增多,抑制NF-κB信号通路后可明显减轻炎性因子的表达。
- 易威威温亚枫刘浠叶禾刘渤
- 关键词：脂多糖髓核细胞炎症
- 内质网应激对吸烟诱导的髓核细胞凋亡与炎性反应的影响研究被引量：4
- 2019年
- 目的探讨内质网应激对吸烟诱导的髓核细胞凋亡与炎性反应的影响。方法以2016年10月-2018年10月25例接受椎间盘摘除术的颈椎间盘突出症患者为研究对象,分为吸烟组(14例)和非吸烟组(11例)。两组患者年龄、性别、突出节段、Pfirrmann分级比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。将术中获取的髓核组织,行TUNEL染色和Western blot检测,观察细胞凋亡情况。然后,采用酶序贯消化法分离培养髓核细胞并传代,取第3代细胞行ELISA检测炎性因子IL-1β和TNF-α含量,免疫荧光染色观察细胞中P65核转移情况,Western blot检测内质网应激相关蛋白GRP78和CHOP表达,透射电镜观察细胞内质网超微结构。最后,为验证内质网调控作用,采用特异性抑制剂4-PBA处理吸烟组髓核细胞后,Western blot检测GRP78、CHOP、IL-1β、TNF-α及P65蛋白相对表达量,流式细胞术检测细胞凋亡率;并以吸烟组未作处理的髓核细胞作对照。结果髓核组织观测显示,吸烟组细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP相对表达量均明显高于非吸烟组(P<0.05)。髓核细胞观测显示,吸烟组髓核细胞分泌IL-1β、TNF-α水平以及GRP78、CHOP蛋白相对表达量均明显高于非吸烟组(P<0.05);免疫荧光染色示吸烟组细胞P65主要表达在细胞核,而非吸烟组在细胞质;透射电镜观察显示,与非吸烟组相比,吸烟组内质网处于应激损伤状态。吸烟组髓核细胞经4-PBA处理后,GRP78、CHOP、IL-1β、TNF-α及P65蛋白相对表达量以及细胞凋亡率均较处理前明显降低(P<0.05)。结论吸烟可通过内质网应激导致髓核细胞凋亡和炎性反应加剧,抑制内质网应激有望成为延缓吸烟导致椎间盘退变的新靶点。
- 侯孝忠徐林飞徐林飞易威威陈艳阳
- 关键词：吸烟椎间盘退变细胞凋亡炎性反应内质网应激
- 经皮椎体后凸成形术与经皮椎弓根螺钉内固定术对骨量减少型胸腰椎压缩性骨折的疗效对比研究被引量：19
- 2021年
- 目的比较经皮椎体后凸成形术(PKP)与经皮椎弓根螺钉内固定术(PPSF)治疗骨量减少型胸腰椎压缩性骨折的疗效。方法回顾性研究2018年1月—2019年3月重庆医科大学附属第一医院骨科收治的66例骨量减少型压缩性骨折患者的临床及影像学资料,根据手术方式不同分为经皮椎体后凸成形术组35例(PKP组),男性12例,女性23例;年龄55~65岁,平均60.0岁;高处坠落伤13例,跌倒伤18例,无诱因4例;腰椎骨密度T值-2.5~-1.0SD,平均-1.73SD。经皮穿刺椎弓根螺钉内固定术组31例(PPSF组),男性11例,女性20例;年龄54~63岁,平均59.5岁;高处坠落伤14例,跌倒15例,无诱因2例。腰椎骨密度T值-2.4~-1.2 SD,平均-1.75SD。记录并比较两组术中的出血量、手术时间等围手术期指标,术前、术后及末次随访的视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)、椎体前缘高度(AH)、椎体前缘高度比(AHR)、椎体前缘高度恢复度(HR)、后凸角(KA)。记录PPSF组的骨性融合时间。结果PKP组术中出血量、手术时间、术后卧床时间、住院周期均低于PPSF组(12.8±6.0)mL vs.(67.2±6.0)mL、(30.2±2.8)min vs.(93.5±8.5)min、(1.3±0.5)d vs.(1.7±0.8)d、(4.1±0.6)d vs.(5.0±0.8)d。两组患者术后VAS、ODI及AH均较术前显著改善,PKP组(2.4±0.9)分vs.(5.2±0.9)分、(21.00±2.58)%vs.(67.61±4.30)%、(22.1±1.8)mm vs.(13.7±2.6)mm;PPSF组(2.8±0.9)分vs.(4.9±0.9)分、(28.67±2.89)%vs.(69.31±3.27)%、(21.4±1.0)mm vs.(13.8±2.6)mm。PPSF组术后3d VAS和ODI均高于PKP组(2.8±0.9)分vs.(2.4±0.9)分、(28.67±2.89)%vs.(21.00±2.58)%,但末次随访两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术前、术后及末次随访时两组间AH和HR差异无统计学意义(P>0.05)。PPSF组术后及末次随访AHR高于PKP组(92.15±3.77)%vs.(88.37±6.61)%、(91.17±4.16)%vs.(87.33±6.98)%。PPSF组患者术后及末次随访时KA低于PKP组(6.4±1.7)°vs.(8.2±2.4)°、(6.6±1.7)°vs.(8.3±2.5)°。两组并发症发生率比较差异无�
- 张野夏辉强易威威蓝海洋杨智杰韩非刘渤
- 关键词：胸腰椎压缩性骨折骨量减少经皮椎体后凸成形术疗效
- 内毒素诱导退变人椎间盘髓核细胞凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的观察内毒素(LPS)刺激退变人椎间盘髓核细胞前后,核因子kapp B(NF-κB)的活化与细胞凋亡的相互关系。方法体外培养退变的人椎间盘髓核细胞,采用CCK-8法测定LPS在不同浓度下(100、200、500和1 000μg/m L)对髓核细胞增殖影响,并筛选合适的刺激浓度;设立空白对照组,单纯LPS(500μg/m L)刺激组,NF-κB抑制剂(BAY11-7082)+LPS(500μg/m L)刺激组,以Hochest33258染色以及Annexin V-PI双标法检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、PARP、NF-κB结合蛋白P65以及磷酸化P-P65的表达。结果 CCK-8实验结果显示当LPS浓度为500μg/m L能明显降低细胞的活力。与空白对照组相比,单纯LPS刺激组细胞凋亡率上升(P<0.05),P-P65表达明显增加,其凋亡蛋白活化型caspase-3和PARP降解产物表达也增高(P<0.05)。而与单纯LPS刺激组相比,NF-κB抑制剂+LPS刺激组细胞凋亡率下降(P<0.05),P-P65表达明显降低,其凋亡蛋白活化型caspase-3和PARP降解产物表达也降低(P<0.05)。结论 NF-κB信号通路可能与椎间盘退变时髓核细胞凋亡的发生密切相关,值得进一步研究。
- 易威威刘浠温亚枫叶禾陈滔刘渤
- 关键词：核因子-ΚB脂多糖髓核细胞
- NF-κB抑制剂减低LPS致兔腰椎间盘髓核细胞锌指蛋白A20表达升高被引量：1
- 2017年
- 目的观察脂多糖(LPS)刺激退变兔椎间盘髓核细胞前后,锌指蛋白A20(A20)、NF-κB及相关炎性因子的表达及其相互关系。方法获取正常和退变兔腰椎间盘髓核细胞,分为正常组、退变组、LPS刺激组和NF-κB抑制剂组,HE染色观察椎间盘髓核及纤维环的形态,免疫组化检测椎间盘A20、NF-κB p65蛋白及Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)的表达。Real-time PCR分别检测各组A20、IL-1β、TNF-α、NF-κB和COL-ⅡmRNA的表达。Western blot观察A20、p65和COL-Ⅱ的表达。ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α的表达。结果退变组髓核细胞数量明显减少,髓核细胞聚集成团,COL-Ⅱ表达下降,A20和p65蛋白表达升高;与正常组相比,退变组A20、TNF-α、IL-1β和p65表达在mRNA及蛋白水平均明显升高,COL-Ⅱ表达降低(P<0.05);LPS刺激组中A20、TNF-α、IL-1β和p65表达较退变组更显著,COL-Ⅱ降低明显(P<0.05);NF-κB抑制剂组较LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β和p65表达回降,COL-Ⅱ表达回升(P<0.05)。结论髓核细胞炎性反应与兔椎间盘退变的发生和发展密切相关,其中A20可能发挥了重要作用。
- 温亚枫易威威刘浠叶禾刘渤
- 关键词：椎间盘退变锌指蛋白A20NF-ΚB
- 康复医学带教在骨科住院医师规范化培训中的实践及探讨
- 2023年
- 住院医师规范化培训是医学生毕业后教育的重要组成部分。重庆医科大学附属第一医院骨科专业住院医师规范化培训均需进行为期1月的康复医学科轮转,进行骨科康复相关知识及技能培训。文章结合骨科康复带教实践经验,对骨科住院医师住培进行骨科康复轮转教学进行探讨,提出应重视小讲座学习,着重讲授常见骨折肢体运动功能的康复评定及康复治疗原则,以及颈肩腰腿痛等退行性疾病的非手术治疗适应证及治疗方法;高质量的临床教学培训,尤其是针对颈肩腰腿痛病例、肩峰撞击综合征及肩袖损伤等病例,可将医疗查房与教学查房相结合,通过骨科住院住培医师患者收治及亲自参与各种临床治疗及效果反馈过程,切身体会及感受讲授手术治疗与非手术治疗的各自适应证、各自优势及不足;优化出科考核内容,提高骨科住院医师规范化培训的骨科康复带教质量。
- 王大武李开庭吴丹冬易威威江维沈皆亮张晓军郝杰
- 关键词：住院医师规范化培训骨科骨科康复康复医学康复医学科
- 锌指蛋白A20对兔腰椎间盘退变影响的实验研究被引量：2
- 2021年
- 目的探讨锌指蛋白A20对兔腰椎间盘退变的影响。方法取3月龄新西兰大白兔26只,体质量2.0~2.5 kg,经腹细针穿刺法制备L3、4、L4、5、L5、6椎间盘退变模型,其中24只术后4周MRI检查明确造模成功,随机分为4组(n=6),于目标椎间盘中分别注射锌指蛋白A20过表达腺病毒(过表达A20组)、空载体腺病毒(空载体组)、PBS液(对照组)、锌指蛋白A20干扰腺病毒(干扰A20组)。于注射前1 d及注射后1、2、3、6 d行生物反应综合评分;注射后2、4、8周,各组行MRI检查并测量T2弛豫时间(T2信号值)后,取材行阿利辛蓝染色观察椎间盘髓核细胞退变情况,免疫组织化学染色检测锌指蛋白A20以及椎间盘退变相关指标(Ⅱ型胶原、蛋白聚糖)的表达,Western blot检测锌指蛋白A20、NF-κB结合蛋白[P65、磷酸化P65(phosphate P65,P-P65)、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖]、自噬相关蛋白[LC3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、P62]以及炎症因子(TNF-α、IL-1β)的表达。结果各组注射后各时间点生物反应综合评分均明显低于注射前1 d(P<0.05);注射后6 d干扰A20组评分明显低于其他组(P<0.05),其他组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。MRI检测提示,注射后2、4、8周过表达A20组T2信号值均最高(P<0.05),2、4周时干扰A20组最低(P<0.05),其余组间差异均无统计学意义(P>0.05)。阿利辛蓝染色显示,注射后4周过表达A20组蛋白聚糖含量最高(P<0.05)、干扰A20组最低(P<0.05);8周时过表达A20组蛋白聚糖含量显著高于其他组(P<0.05),其他组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色示,锌指蛋白A20、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达过表达A20组最高(P<0.05),干扰A20组上述蛋白表达最低(P<0.05)。Western blot检测示锌指蛋白A20、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、LC3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)蛋白相对表达量过表达A20组最高、干扰A20组最低,而P-P65、TNF-α、IL-1β、P62蛋白相对表达量过表达A20组最低、干扰A20组最高,与其他组比较差
- 张野夏辉强易威威蓝海洋杨智杰韩非唐盼刘渤
- 关键词：椎间盘退变基因治疗锌指蛋白A20NF-ΚB通路炎症反应
- YAP通过促进自噬抑制髓核细胞胞外基质分解代谢
- 2024年
- 目的探讨YAP对椎间盘髓核细胞的作用及其可能机制。方法收集重庆医科大学附属第一医院2021年3月至2022年7月接受腰椎手术患者的相对正常和退变的椎间盘组织,采用免疫组化和Western blot检测YAP在人椎间盘髓核组织中的表达差异。体外培养人原代髓核细胞,通过IL-1β处理诱导髓核细胞退变,将实验分为对照组、IL-1β组、IL-1β+LV-YAP组、IL-1β+YAP-siRNA组和IL-1β+LV-YAP+3-MA组。采用Western blot检测细胞外基质分解代谢及自噬水平变化。最后建立大鼠椎间盘退变模型,利用MRI、阿利新蓝染色及免疫组化检测YAP和LC3的表达及椎间盘退变情况。结果YAP在退变椎间盘组织的表达水平明显低于相对正常的椎间盘组织(P<0.05)。体外细胞实验结果显示,IL-1β+LV-YAP组显著提高IL-1β诱导的髓核细胞中CollagenⅡ、Aggrecan和LC3-Ⅱ的蛋白表达(P<0.05),降低MMP-3和MMP-13的蛋白表达(P<0.05),而IL-1β+YAP-siRNA组则表现出完全相反的作用。而予以自噬抑制剂3-MA预处理后明显降低IL-1β+LV-YAP组中GFP-LC3阳性颗粒数量和CollagenⅡ、Aggrecan、LC3-Ⅱ蛋白表达(P<0.05),且提高MMP-3和MMP-13的蛋白表达(P<0.05)。进一步在体内构建大鼠椎间盘退变模型,YAP过表达促进LC3表达和抑制椎间盘退变。结论YAP过表达通过促进人髓核细胞自噬抑制细胞外基质降解,从而延缓椎间盘退变。
- 易威威唐秋雨陶白龙李开庭王大武
- 关键词：椎间盘退变自噬细胞外基质髓核细胞
- 锌指蛋白A20及其相关炎症因子在椎间盘髓核细胞退变前后的表达变化被引量：11
- 2016年
- 目的检测椎间盘髓核细胞退变前后锌指蛋白A20及其相关炎症因子的表达变化。方法获取我院骨科患者术中切除的椎间盘组织,分为正常组和退变组,采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况,免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及NF-κB p65蛋白的表达。体外培养胚胎小鼠髓核细胞,分为对照组(只加入等量的PBS)、内毒素(LPS)刺激组和NF-κB抑制组,分别以Real-time PCR检测LPS刺激细胞和加入NF-κB抑制剂后,A20、TNF-α、IL-1β、I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;Western blot检测A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化。结果退变组髓核细胞数量显著少于正常组,并有明显的聚集现象;退变组髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65蛋白表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13mRNA与蛋白的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P<0.05),A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论髓核细胞炎症反应与椎间盘退变的发生、发展密切相关,A20可能通过NF-κB信号通路对抑制髓核细胞退变时炎症反应起到关键作用。
- 刘浠易威威温亚枫叶禾谭富强刘渤
- 关键词：椎间盘退变髓核细胞锌指蛋白A20炎症反应
- 骨形态发生蛋白-9对兔骨髓间充质干细胞诱导分化作用被引量：4
- 2015年
- 目的 分离、培养并鉴定新西兰兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）,观察BMSCs经腺病毒重组人骨形态发生蛋白-9（AdBMP-9）诱导后的成骨分化及其在明胶海绵上的生长.方法 采用全骨髓培养分离提取兔BMSCs,噻唑蓝（MTT）检测第2、3、4、5代细胞的增殖.流式细胞仪检测兔BMSCs表面抗原CD44和CD34.利用AdBMP-9转染第3代BMSCs,分别于诱导后7、14 d行碱性磷酸酶（ALP）染色、茜素红S染色和免疫荧光染色检测早期和晚期成骨标志物碱性磷酸酶、钙结节及骨钙素（OC）的表达.同时在14 d行油红O染色观察其成脂分化能力,荧光显微镜下观察BMSCs与明胶海绵复合生长.结果 成功分离提取兔BMSCs,经传代,细胞由长梭形变为短梭形,第3代形态、大小趋于稳定.MTT检测发现第2、3、4、5代细胞均呈对数生长,生长曲线近似“S”型,第2代细胞生长最慢,第4代生长最快（P＜0.05）.流式细胞仪检测显示,CD44和CD34的阳性率分别为94.38％和2.63％.AdBMP-9诱导后,可检测到早期和晚期成骨标志物及脂滴的生成,转染后的BMSCs可较好地与明胶海绵复合生长.结论 采用全骨髓培养法可分离得到较纯的兔BMSCs,在AdBMP-9诱导下,其可向成骨、成脂分化,且能较好地与明胶海绵复合生长.
- 谭富强刘渤刘浠欧东易威威温亚枫
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化
