- 链霉亲和素-自噬相关基因融合蛋白的原核表达及纯化被引量:1
- 2014年
- 目的构建链霉亲和素(streptavidin,SA)和自噬相关基因(Beclin 1)重组质粒,并对融合蛋白SA-Beclin 1进行表达和纯化。方法利用基因重组技术将核心SA与Beclin 1序列连接,克隆入pQE80形成pQE80-SA-Beclin 1重组载体,IPTG诱导融合蛋白原核表达,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,Western blot鉴定。结果 PCR成功扩增核心SA活性中心,酶切鉴定和测序均证实重组载体pQE80-SA-Beclin 1构建成功;IPTG诱导后SA-Beclin 1融合蛋白(含His标签)在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE分析表达的融合蛋白以包涵体为主,经镍亲和凝胶层析柱纯化得到融合蛋白,Western blot鉴定其相对分子量约为72000kD,与预期相符。结论本文成功构建了重组质粒并表达纯化了SA-Beclin 1融合蛋白,为进一步研究SA-Beclin 1的功能及临床应用奠定了基础。
- 张志平刘家云刁艳君马越云苏明权郝晓柯
- 关键词:自噬相关基因融合蛋白原核表达基因重组技术PCR
- Bio-Rad VARIANTII TURBO与Bio-Rad D10糖化血红蛋白分析仪的比对分析被引量:1
- 2017年
- 目的将以高压液相色谱法为原理的分析系统Bio-Rad VARIANTII TURBO与Bio-Rad D10糖化血红蛋白分析仪所得结果进行比对分析与偏倚评估。方法分别使用Bio-Rad VARIANTII TURBO与Bio-Rad D10糖化血红蛋白分析仪检测40份全血样本的糖化血红蛋白(Hb A1c),两台分析仪原理均为离子高压液相色谱法,对两台检测系统的结果进行比对分析,进行相关性比较及偏倚评估。结果线性回归方程为Y=0.972X+0.291(n=40,R2=0.996),两个检测系统测定Hb A1c结果有恒定偏倚,随着Hb A1c浓度的增高而减小。结论 Bio-Rad VARIANTII TURBO与Bio-Rad D10糖化血红蛋白分析仪检测结果有良好的相关性,结果存在恒定正偏倚,偏倚均在允许误差范围之内,满足临床要求。
- 任丽芬张志平吴晓坤徐蓓徐焰
- 关键词:糖化血红蛋白高压液相色谱法偏倚糖尿病