王璐
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程轻工技术与工程化学工程更多>>
- 兽疫链球菌中与透明质酸合成相关新基因的高通量筛选及克隆被引量：1
- 2015年
- 【目的】兽疫链球菌(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中透明质酸主要的生物合成途径和相关基因已经被研究得比较透彻,探究一种挖掘与透明质酸合成相关新基因的策略。【方法】利用自杀质粒p SET4s::sac B在宿主基因组中的随机整合作用,筛选具有表型差异突变菌株构建突变体库,进一步利用连接介导PCR(Ligation mediated PCR,LM-PCR)方法和全基因组重测序,检测质粒整合位点,通过基因无痕敲除和回补实验验证插入位点。【结果】构建了包含150株具有表型差异突变株的突变体库;以荚膜合成能力缺失的1号突变株(M1)作为基础研究对象,检测到自杀质粒整合到基因组458 960位点上,破坏了编码塔格糖-6-磷酸激酶的lac C基因;无痕敲除lac C基因得到Δlac C,表型分析发现Δlac C表现为粘性荚膜特性;进一步全基因组重测序发现,除了lac C基因位点存在插入突变,206 613位点存在碱基G缺失,导致编码透明质酸合成酶的has A基因发生移码突变,且回补has A基因后,M1恢复粘性荚膜合成能力。【结论】M1突变株粘性荚膜合成能力的缺失由has A基因功能缺失引起,与lac C基因功能缺失无关。初步建立了兽疫链球菌中高通量筛选与透明质酸合成相关新基因的策略,为今后挖掘新基因奠定了基础。
- 毕亚丽王震王璐刘浩
- 关键词：透明质酸兽疫链球菌突变体库整合位点
- 一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法
- 本发明提供了一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法，其中，所述生物气溶胶收集方法包括以下步骤：(1)向收集瓶中加入收集液，将所述收集瓶放置在磁力搅拌器上并通过所述磁力搅拌器使所述收集液形成旋转液腔；其中，所述收集瓶包括瓶体...
- 付钰许添顺卢维来王璐李焓菲
- 文献传递
- 玫瑰孢链霉菌中mureidomycin隐性基因簇的激活及其产物鉴定
- 链霉菌是抗生素等活性次级代谢产物的重要来源。随着测序技术的发展,链霉菌基因组的数量不断增多,序列分析发现链霉菌基因组中蕴含了大量的次级代谢产物生物合成基因簇,这些基因簇中除了少部分的产物被分离鉴定外,还有大量的活性产物资...
- 江玲娟王璐牛国清谭华荣
- BT1整合酶介导的链霉菌次级代谢产物基因簇的克隆
- 链霉菌是一类高G+C含量的革兰氏阳性细菌,具有无与伦比的合成次级代谢产物的能力.负责这些活性物质生物合成的基因一般以成簇的形式排列,其大小从几kb 到100 kb 不等.为了研究这些活性物质的生物合成及其调控,克隆其完整...
- 杜德尧王璐牛国清谭华荣
- 一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法
- 本发明提供了一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法，其中，所述生物气溶胶收集方法包括以下步骤：(1)向收集瓶中加入收集液，将所述收集瓶放置在磁力搅拌器上并通过所述磁力搅拌器使所述收集液形成旋转液腔；其中，所述收集瓶包括瓶体...
- 付钰许添顺卢维来王璐李焓菲
- 文献传递
- apsamycin隐性基因簇的激活及其产物分析
- 王璐江玲娟牛国清谭华荣
- 尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达被引量：3
- 2015年
- 【目的】异源表达尼可霉素生物合成基因簇,为尼可霉素核苷和肽基缩合机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素的组合生物合成奠定基础。【方法】以含有尼可霉素生物合成基因簇的pNIK为出发质粒,通过PCR-targeting的方法,将基因簇中san G和san F的启动子替换为组成型hrd B启动子,构建重组质粒pNIKm。通过接合转移的方法分别将pNIK和pNIKm导入天蓝色链霉菌M1146中,获得异源表达菌株M1146-NIK和M1146-NIKm,并通过RT-PCR检测基因簇的表达情况。最后通过抗菌活性实验和产物的分离鉴定,比较M1146-NIK和M1146-NIKm的抗菌活性和尼可霉素的产生情况。【结果】pNIK和pNIKm在异源宿主天蓝色链霉菌M1146成功表达;M1146-NIK和M1146-NIKm均有明显的抗菌活性;M1146-NIK和M1146-NIKm均能产生少量的尼可霉素X、Z和假尼可霉素Z;M1146-NIK大量积累尿苷,而M1146-NIKm大量积累尿苷、核糖基-4-甲酰-4-咪唑-2-酮和吡啶同型苏氨酸。【结论】尼可霉素生物合成基因簇成功异源表达,并分离鉴定了尼可霉素产物及其生物合成中间体。本研究将为尼可霉素核苷和肽基缩合的酶学机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素组合合成新型杂合抗生素提供理论依据和指导。
- 王璐杜德尧李金娥田宇清刘浩牛国清谭华荣
- 关键词：圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇异源表达抗菌活性
