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CXCL4基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定: 2016年; 目的饲养、繁殖并鉴定CXC趋化因子配体4[chemokine(C-X-C motif)ligand 4,CXCL4]基因敲除小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定基础。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,剪取繁殖成功的子代小鼠耳朵,提取其基因组DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型;比较野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的体重变化及结直肠的长度,通过HE染色观察野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的结直肠形态结构;采用ELISA法验证CXCL4野生型和纯合子小鼠血清中CXCL4的表达。结果繁殖成功的子代小鼠有3种基因型:野生型、杂合子及纯合子;4、10周龄雌性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05),6、10周龄雄性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05);6周龄雌性纯合子小鼠结直肠长度明显长于同周龄的野生型小鼠(P<0.05),但结直肠的形态结构无显著改变;纯合子小鼠血清中CXCL4的表达量明显低于WT小鼠(P<0.05)。结论成功获得了CXCL4基因敲除纯合子小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定了基础。; 宋杰胡云光胡雅洁王艳翠李嘉祺刘龙丁; 关键词：基因敲除小鼠基因型

EV71和CA16研究进展综述被引量：11: 2018年; 手足口病(hand-foot and mouth disease,HFMD)是一种全球性的传染病,其主要病原体为肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(cosackievirus A 16,CA16)。EV71与CA16同属于小核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus)肠道病毒A型(Human enterovirus A)的成员,两者在病原学、感染和复制特征以及感染导致的临床症状和免疫反应有相似的方面,但也有明显不同的方面。现将对EV71和CA16相关的病原学、感染和复制特征以及临床症状和免疫反应研究进行综述。; 宋杰胡雅洁董少忠; 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型手足口病免疫反应

CXCL5基因敲除小鼠的繁殖、基因型鉴定及与野生型小鼠的比较被引量：1: 2016年; 目的繁殖和鉴定CXC趋化因子配体5（CXCchemokineligand5，CxcL5）基因敲除小鼠，以获得CXCL5-／-纯合子小鼠并与野生型小鼠进行比较。方法将CXCL5＋/-杂合子小鼠繁殖后，剪取子代小鼠耳组织，提取基因组DNA，用PCR法鉴定子代小鼠的基因型。采用独立样本t检验比较同周龄同性别CXCL5基因敲除纯合子小鼠与野生型小鼠的体重和结直肠长度，并通过苏木素-伊红染色观察两种基因型小鼠的结肠形态结构。结果经繁殖，共获得60只CXCL5-/-纯合子小鼠和55只野生型小鼠。4、6、8、10周龄雌性CXCL5-/-小鼠的体重分别为（10．08±0．78）、（14．55±0．92）、（18．01±0．68）和（19．75±1．23）g，明显轻于同龄雌性野生型小鼠[（11．43±0．85）、（18．42±0．76）、（20．42±1．63）和（21．27±1．66）g]（t值分别为-2．622、-7．253、-3．042、-1．644，P值均〈0．05）；6、8周龄雄性CXCL5-／-小鼠的体重分别为（17．46±0．74）和（20．62±1．62）g，也明显轻于同龄雄性野生型小鼠[（20．47±1．66）和（23．33±1．67）g]（t值分别为-3．688、-2．885，P值均〈0．05）。6周龄雌性CXCL5-／-小鼠的结直肠长度为（6．86±0．17）cm，与同龄雌性野生型小鼠（7．66±0．11）cm的长度相比，明显较短（t=-8．835，P〈0．05），但结肠的形态结构无明显改变。结论成功获得了CXCL5基因敲除纯合子小鼠，为深入研究CXCL5的生物学功能奠定了基础。; 宋杰胡雅洁胡云光李嘉祺王艳翠刘龙丁; 关键词：基因敲除小鼠繁殖基因型

细胞自噬对甲型流感病毒H1 N1感染A549细胞过程中病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响被引量：3: 2017年; 目的通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对细胞凋亡的影响,激光共聚焦显微镜观察H1N1感染A549细胞后的自噬现象,利用real-time PCR检测自噬被抑制前后病毒拷贝数的变化以及Ⅰ型干扰素（typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ）产生通路各基因mRNA表达量的变化.分析细胞自噬对病毒复制及干扰素表达的影响.结果当H1N1感染A549细胞后可诱导细胞产生不完全自噬,导致自噬体积累.当自噬被3-MA抑制后,TLR3-TLR7-MyD88-IRF7-IFN-α/β信号通路各基因mRNA表达量上调,与此同时病毒拷贝数及血凝滴度下调.结论 H1N1可能通过诱导不完全自噬逃逸了机体的抗病毒固有免疫应答,促进了自身复制和存活.; 李嘉祺胡雅洁宋杰李洪哲王晶晶郭磊郑惠文宁若彤范海涛杨泽宁刘龙丁; 关键词：细胞自噬甲型流感病毒

人二倍体细胞对不同病毒感染过程的生物学效应比较分析被引量：2: 2016年; 目的分析人二倍体细胞对不同病毒感染的生物学反应差异性及相关分子生物学机制。方法用人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人二倍体细胞,光镜和电镜下观察感染细胞形态学特征;比较两种病毒在人二倍体细胞上的增殖动力学及两种病毒感染后细胞酶谱的变化;采用基因芯片检测两种病毒感染后人二倍体细胞基因反应的差异。结果感染细胞的光镜或电镜的超微结构观察均表现出许多相同的特点,包括细胞变圆、肿胀、折光性增强,以及细胞细微结构的受损,大多数细胞器的破坏等。两种病毒在人二倍体细胞上具有不同滴度峰值的增殖动力学过程;对细胞超氧化物歧化酶的动力学改变趋势有不同影响,但对乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶动力学变化趋势无明显影响;两种病毒感染引起人二倍体细胞出现不同的基因反应,其中与信号转导及与天然免疫反应有关的mRNA转录效率具有一定的差异。结论人二倍体细胞对EV71、HSV-1感染过程表现不同的生物学效应。; 王辉张莹刘龙丁廖芸王建斌胡雅洁王丽春赵婷王艳翠李琦涵; 关键词：二倍体细胞肠道病毒71型单纯疱疹病毒1型酶谱

CV-A16和EV-A71感染对肠道上皮细胞间连接分子排布和表达的影响被引量：1: 2017年; 柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CV-A16)与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV-A71)是引发手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)的两种主要病原体,然而两者的致病机理仍未完全被阐明。病毒感染对肠道上皮细胞间连接分子排布和表达直接与病毒感染造成的后果相关。本研究通过右旋糖苷穿透实验、免疫荧光以及蛋白免疫印迹等技术检测了CV-A16和EV-A71感染对肠道上皮细胞系(Intestinal epithelial cell)FHC后细胞通透性的变化以及细胞间连接分子排布和表达情况。研究结果表明,CV-A16和EV-A71感染FHC可导致其通透性显著增强、连接分子Nectin1、Claudin4、Claudin5、ZO-1以及E-Cadherin的排布被破坏,且表达量显著性降低。这一结果提示了CV-A16和EV-A71感染肠道FHC细胞并在细胞中复制引起肠道上皮细胞损伤,导致肠道上皮细胞间连接分子排布的改变和表达量的减少。; 宋杰胡雅洁黄星刘龙丁

病毒逃逸宿主免疫反应机制的研究进展被引量：3: 2016年; 先天性免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线,也是激活适应性免疫的基础,其在宿主清除病毒的免疫反应中发挥关键作用,成为当前免疫学研究的热点。在先天性免疫反应中,病毒感染细胞后主要通过模式识别受体识别病毒入侵,进而产生干扰素和一系列细胞因子来抵抗病毒入侵或清除病毒;而在适应性免疫中,机体主要通过T细胞和B细胞特异性识别入侵的病毒并将其清除。与此同时,病毒为了能够更好地在宿主细胞中获得生存,进化了多种可逃逸宿主免疫系统的机制。现将主要针对于病毒逃逸宿主免疫反应的一系列机制进行阐述。; 宋杰胡雅洁刘龙丁; 关键词：病毒先天性免疫适应性免疫免疫逃逸

单纯疱疹病毒Ⅰ型基因修饰突变株M3与野生型毒株Mckrae感染特征的比较分析被引量：1: 2017年; 目的通过系统比较观察一个利用CRISPR/Cas9系统构建的单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus,HSV-1)基因修饰减毒株M3和野生型毒株Mckrae感染BALB/c小鼠的感染特征,进一步确定M3毒株的减毒表型。方法利用基因修饰的减毒株M3和野生型毒株Mckrae,经角膜、滴鼻、肌内注射途径感染BALB/c小鼠,模拟急性感染模式;经足垫途径感染BALB/c小鼠,模拟慢性感染模式,观察感染小鼠的相应病理学指征。结果实验小鼠的观察结果表明,虽然Mckrae经不同途径感染的小鼠存活率存在差异,但这些小鼠所出现的弓背、倒毛、单侧眼失明、单侧后肢瘫痪等临床特征和一定的死亡比例等现象,在M3减毒株感染的小鼠中均未出现;q-PCR检测表明,M3不同途径感染小鼠的心、脑、肺、肾、肝组织病毒载量的增殖趋势均显著低于Mckrae感染的小鼠;组织病理学检查结果提示,Mckrae感染小鼠的肝、肺组织出现的病理损伤程度明显强于M3减毒株感染的小鼠。免疫组织化学结果提示,M3减毒株感染小鼠的肝组织病毒抗原表达和Mckrae感染小鼠存在明显差异。结论 HSV-1 M3基因突变株相较于Mckrae野生型毒株表现了明显的临床病理意义上的减毒表型。; 何玉凤何玉凤张勇徐兴丽胡雅洁胡雅洁王玺王丽春张莹; 关键词：BALB/C小鼠减毒株 Q-PCR

BALB/c小鼠在HSV-1不同条件感染下的临床与病理及病原差异分析被引量：2: 2017年; 目的探讨BALB/c小鼠模型在不同条件下感染HSV-1后的临床表现、病理现象及组织器官中的病毒分布特性，为HSV-1不同毒株感染模式小鼠的研究提供综合的参考指标体系。方法本研究利用HSV-1 17＋和McKrae毒株，经滴鼻和角膜途径感染不同周龄的BALB/c小鼠，建立急性感染模式；经皮下和足垫途径感染不同周龄的BALB/c小鼠，建立慢性感染模式。结果实验小鼠的临床、病理学、病原学指标的观察结果表明：虽然小鼠临床症状均表现为倒毛、弓背，但在不同条件下感染不同毒株的动物其体重和死亡率指标存在差异；定量PCR技术检测结果证实神经组织（脑、脊髓、三叉）内病毒载量的增殖趋势不同；病理学检查提示急性感染组仅脑组织中出现明显病理损伤，慢性感染组仅三叉神经中表现病理损伤。而慢性感染组动物的三叉神经组织，虽未检测到具有指标意义的潜伏相关转录本（latency associated transcript, LAT），但是其组织块与Vero细胞共培养却可导致细胞出现感染性病变。结论HSV-1不同毒株经不同攻毒途径感染小鼠后，小鼠在体重、死亡率，毒株在机体内的复制模式等方面存在明显差异。因此，基于不同感染模式的相关研究，其观察指标侧重点应该不同。; 汤贝贝张小龙何玉凤段永忠王丽春徐兴丽胡雅洁周巨民李琦涵; 关键词：单纯疱疹病毒1型小鼠

CXCL5对DSS诱导的小鼠炎症性肠病的影响被引量：3: 2018年; 目的本研究旨在探究CXC趋化因子配体5[chemokine （C-X-C motif） ligand 5, CXCL5]在葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DSS）诱导的炎症性肠病（inflammatory bowel disease, IBD）中的作用及其机制。方法使用3%DSS自由饮用构建小鼠IBD模型，分析CXCL5敲除对小鼠体重、临床症状、存活率、病理损伤和炎性因子分泌的影响。结果研究结果发现，DSS诱导的急性肠炎小鼠血清中的CXCL5明显高于正常对照组，敲除CXCL5后，DSS对小鼠的影响为体重减轻、存活期延长、病理损伤减轻、炎症减弱、炎症因子释放减少。结论以上结果说明，CXCL5可能在DSS诱导的小鼠急性肠炎中促进了炎症因子的释放从而加剧了病理损伤，这一研究结果初步提示CXCL5可能是肠炎治疗的一个重要候选靶标。; 宋杰胡雅洁李嘉祺胡云光郭磊梅俊杰刘龙丁; 关键词：炎症性肠病炎症因子

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胡雅洁

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