方玉莲 作品数:24 被引量:100 H指数:7 供职机构: 天津市儿童医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市应用基础与前沿技术研究计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
急性腹泻患儿艰难梭菌感染检测与临床分析 被引量:6 2019年 目的了解疑似病毒感染的急性腹泻患儿中是否合并艰难梭菌(CD)感染,并分析其临床特点。方法收集急性腹泻患儿大便标本1590例份,筛查其诺如病毒(NoV)感染情况,并采用聚合酶链反应方法检测艰难梭菌毒素A/B(Tcd-A/B)基因。结果1590例份大便标本中,NoV阳性410例份,阳性率25.79%;Tcd阳性79例份,阳性率为4.97%;二者合并感染21例份,混合感染率为26.58%(21/79)。在79例份Tcd阳性标本中,CD毒素A、B均阳性(A+B+)16例份,仅毒素B阳性(A-B+)63例份,未检测到仅毒素A阳性(A+B-)标本;CD阳性检出率在性别、年龄、季节等方面差异均无统计学意义。在Tcd检测阳性的患儿标本中,65例(82.28%)患儿入院前后曾使用抗生素,同时伴有呕吐的患儿38例(48.10%)、发热70例(88.61%)、贫血31例(39.24%)、C反应蛋白(CRP)增高27例(34.18%)、白蛋白降低10例(12.66%)、粒细胞减低29例(36.71%),将阳性患儿分为A+B+组16例与A-B+组63例,两组在性别、年龄、病程、腹泻次数、抗生素使用比例、发热患儿比例、贫血患儿比例、CRP、白细胞等方面比较差异均无统计学意义。79例Tcd检测阳性患儿标本中,检测到腺病毒阳性4例(5.06%),轮状病毒阳性11例(13.93%),NoV阳性21例(26.58%),博卡病毒阳性0例。结论急性腹泻患儿中存在致泻病毒及CD的合并感染,且Tcd阳性以A-B+为主,阳性患儿多有抗生素使用史,同时可伴有发热、呕吐、贫血、低蛋白血症、CRP增高、粒细胞减低等症状。 范超萌 林书祥 李璇 王维 王维 彭林关键词:艰难梭菌 诺如病毒 儿童 神经管缺陷3家系DNA甲基化研究 被引量:2 2017年 目的 探讨神经管缺陷(NTDs)家系中全基因组DNA甲基化改变情况及其意义。方法 收集3个NTDs家系,共12例研究对象纳入本研究,以NTDs患者作为病例组,家系中表型正常的成员为对照组。抽取12例研究对象的外周血,提取基因组DNA。使用重亚硫酸盐处理基因组DNA,全基因组扩增方式扩增片段化,置Illumina Infinium人类甲基化450k芯片上,进行杂交、洗脱、延伸、成像,使用iScan软件扫描芯片,Genome Studio读取扫描图像结果。使用Illumina甲基化分析器软件进行数据分析。结果 基因差异甲基化分析显示:差异性甲基化基因位点仅占检出CpG位点的0.2%,617个差异性DNA高甲基化的位点(P〈0.05),其中63个DNA甲基化位点P〈1×10-4,包括E盒结合锌指蛋白2基因、5,10-亚甲基四氢叶酸脱氢酶1基因等;104个差异性DNA低甲基化的位点(P〈0.05),其中65个DNA甲基化位点P〈0.01,包括同源异型盒B7基因、runt相关的转录因子3基因等。聚类分析显示:NTDs患儿呈DNA高甲基化改变的趋势较一致,而对照组呈DNA低甲基化改变的趋势较一致。结论 在NTDs家系中,DNA甲基化异常可能是NTDs发生的危险因素之一。 张瑞苹 方玉莲 王懿征 曹丽荣 支秀芳 蔡春泉关键词:神经管缺陷 DNA甲基化 家系研究 天津地区急性腹泻患儿肠道病毒感染临床特征和流行病学分析 被引量:3 2023年 目的了解天津地区可引起儿童腹泻的常见肠道病毒的临床和流行病学特征,为指导儿童病毒性腹泻的防治提供参考。方法收集2019年8月—2020年7月天津市儿童医院1102例急性腹泻住院患儿临床资料和粪便样本,患儿男680例、女422例,年龄1~148个月。采用胶体金免疫层析技术检测轮状病毒和肠道腺病毒,采用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测诺如病毒。分析病毒检测结果和临床资料信息。结果1102例粪便样本中,有421例(38.2%)检出病毒阳性,诺如病毒、轮状病毒、腺病毒的检出率分别为24.9%、11.0%、2.4%。诺如病毒和轮状病毒冬、春季检出率较高,腺病毒夏、秋季检出率较高。不同年龄患儿3种肠道病毒检出率差异有统计学意义(P<0.05),不同性别患儿诺如病毒和腺病毒检出率差异有统计学意义(P<0.05)。不同肠道病毒引起的发热、咳嗽、呕吐、腹痛等急性腹泻伴随症状发生率不同(P<0.05);腺病毒感染患儿水、电解质和酸碱平衡紊乱的发生率更高(P<0.05);轮状病毒感染患儿粪便常规脂肪滴检出率和外周血白细胞下降发生率更高(P<0.05)。结论诺如病毒和轮状病毒是天津地区儿童腹泻的主要病原,婴幼儿多发,且具有明显的季节性。患儿感染不同病毒引发的主要临床症状和实验室检验结果有差异,临床可根据不同病毒引发的腹泻特点有针对性地进行治疗。 武晋英 方玉莲 王维 侯梦珠 王露 赵煜关键词:肠道病毒 急性腹泻 流行病学 儿童 中国北方汉族人群神经管缺陷患儿DACT1基因突变分析 2017年 目的探讨中国北方汉族人群神经管缺陷(NTDs)患儿与DACT1基因的相关性,为疾病的诊断及遗传咨询提供依据。方法收集163例NTDs患者和480例无亲缘关系健康个体的外周血标本,采用聚合酶链反应和DNA直接测序的方法检测DACT1基因的突变情况,并对突变位点进行生物信息学分析。结果在NTDs患者中发现6个突变位点,有4个突变位点为错义突变,分别为p.R45W、p.D142G、p.N356K、p.V702G,在正常对照中未检测到这些突变位点。其中3个位点的氨基酸残基(p.45R、p.142D、p.356N)在进化上高度保守,且这3个位点突变携带者均为女性,同时存在无脑畸形。结论中国北方汉族人群NTDs患者存在DACT1基因突变,且可能为该病风险因素之一。 方玉莲 赵林胜 张瑞苹 支秀芳 王懿征 曹丽荣 蔡春泉关键词:神经管缺损 突变 汉族 BHMT和RFC1多态性与中国北方汉族儿童神经管缺陷的易感性研究 被引量:5 2018年 目的研究中国北方汉族儿童中甜菜碱同型半胱氨酸甲基转移酶基因(BHMT)和还原叶酸载体1基因(RFC1,又称SLC19A1)的单核苷酸多态性(SNPs)与神经管缺陷(NTDs)易感性的关系。方法以中国北方汉族152例NTDs患儿和169例正常对照为研究对象,采用Sequenom Mass-ARRAY分型技术对BHMT和RFC1两个基因的9个SNPs位点进行基因分型,Haploview4.2软件进行单体型分析。结果 BHMT基因rs3733890位点等位基因频率与NTDs的发病存在显著关联,且携带A等位基因儿童发生NTDs风险高于G等位基因的儿童(OR=1.408,95%CI:1.013~1.956);RFC1基因rs1051266位点等位基因和基因型频率分布与NTDs的发病存在显著关联,且携带G等位基因和GG基因型的儿童患NTDs风险分别高于A等位基因和AA基因型儿童(OR=1.492,95%CI:1.089~2.044;OR=2.020,95%CI:1.081~3.780);RFC1基因rs3788200位点等位基因频率与NTDs发病存在显著关联,携带G等位基因的儿童患NTDs风险高于携带A等位基因儿童(OR=1.368,95%CI:1.002~1.868)。同时,单体型分析结果显示BHMT基因单体型C-A-A-A(rs567754-rs3733890-rs558133-rs585800)和RFC1基因单体型G-G-G-T(rs1051296-rs3788200-rs1051266-rs4819130)可使NTDs发病风险增加,而BHMT基因单体型C-G-A-A可使NTDs发病风险降低。结论BHMT基因rs3733890和RFC1基因rs1051266、rs3788200多态性与中国北方汉族儿童NTDs的易感性相关。 王懿征 舒剑波 方玉莲 蔡春泉关键词:神经管缺损 疾病遗传易感性 儿童 汉族 GeneXpert MTB/RIF粪便检测在儿童结核病中的研究进展 2024年 儿童活动性结核病存在标本获取困难和病原学诊断阳性率低等问题,而利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Mycobacterium tuberculosis and rifampin-resistant,简称“Xpert”)作为一种快速检测结核分枝杆菌(MTB)和利福平耐药性的方法,以较高的敏感度和特异度为结核病的诊断提供了可靠的依据。目前,该方法已广泛应用于痰液或胃液检测,关于粪便样本对诊断肺结核的应用价值基本得到肯定,但肺外结核应用仍需要大量研究验证。笔者就该方法用于检测儿童结核病粪便样本中的MTB进行综述,为Xpert用于儿童粪便检测在临床中的应用提供参考。 李晓迎 方玉莲 宁静 徐勇胜关键词:结核 粪便 分子诊断技术 儿童 天津地区儿童感染肺炎支原体基因型特征分析及其临床特点 被引量:17 2021年 目的:了解天津地区儿童感染肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)的基因分型、亚型的流行状况及其临床特点。方法:以2017年12月—2019年12月天津市儿童医院收治住院的肺炎患儿作为研究对象,行纤支气管镜术取支气管肺泡灌洗液(BALF)。采用实时荧光定量PCR技术检测Mp培养成功后的阳性标本,进行限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)分型。所有病例均搜集详细临床资料和实验室数据。结果:经实时荧光定量PCR和分离培养方法确认后共得到Mp阳性菌株175例,RFLP分型结果显示,Ⅰ型138例(78.9%),Ⅱ型37例(21.1%);MLVA分型结果显示,M3-5-6-2型37例,有B、G、M、S、V、Y这6个亚型;检出M4-5-7-2138例,有E、J、P、U、X、Z和a这7个亚型。M3-5-6-2型中有P1-Ⅰ型1例(2.7%),P1-Ⅱ型36例(97.3%);M4-5-7-2型中有P1-Ⅰ型137例(99.2%),P1-Ⅱ型1例(0.7%)。不同基因型在不同年龄组间分布差异无统计学意义。M3-5-6-2基因型中的B、G、M、S、V、Y型与M4-5-7-2基因型中的E、J、P、U、X、Z、a型共13个基因型在四季分布中有统计学差异。所有Mp感染患儿均有发热和咳嗽的症状。P1-Ⅰ/M4-5-7-2型肺炎患儿在住院时长、发热时长、高热(>39℃)、咳嗽时长、皮肤改变、消化系统症状、肝功能损伤发生率等方面均高于P1-Ⅱ/M3-5-6-2型肺炎患儿,但差异没有统计学意义。P1-Ⅱ型及M3-5-6-2型白细胞计数高于Ⅰ型及M4-5-7-2型;P1-Ⅰ型及M4-5-7-2型乳酸脱氢酶高于Ⅱ型及M3-5-6-2型,且差异有统计学意义。不同基因型患儿在炎性实变、肺不张、胸膜增厚和胸腔积液的发生率差异无统计学意义。结论:天津地区肺炎患儿感染Mp以P1-Ⅰ型/M4-5-7-2型为主,P1-Ⅱ型有上升趋势;P1-Ⅰ型及M4-5-7-2型与临床发热、重症表现等存在一定相关性。 王维 林书祥 王露 张同强 王朝 方玉莲 侯梦珠 武晋英 徐勇胜关键词:肺炎支原体 儿童 基因分型 天津地区急性胃肠炎患儿诺如病毒分子流行病学分析 被引量:8 2019年 目的了解2017年天津地区急性胃肠炎患儿诺如病毒(NoV)分子流行病学特征。方法收集2017年1~12月天津市儿童医院疑似由病毒感染引起的急性胃肠炎患儿的粪便标本758份,采用荧光定量RT-PCR方法对NoV进行初筛,运用传统RT-PCR方法对阳性标本的衣壳蛋白VP1区进行基因扩增、基因测序和鉴定基因型别。结果 758份粪便标本中检出GII型NoV 241份,阳性率为31.8%。对阳性标本进行衣壳蛋白VP1区测序,发现GII型标本中以GII.4亚型为主,占28.6%(69/241);其次为GII.3亚型,占21.2%(51/241);GII.2亚型占10.0%(24/241);其他亚型占7.5%(18/241)。不同年龄组间NoV检出率差异有统计学意义(P=0.018),其中1~<4岁组阳性检出率最高(37.3%)。不同季节的NoV检出率差异具有统计学意义(P<0.001),其中冬季为高发季节(48.1%)。27份(3.6%)标本存在NoV和轮状病毒(RtV)的混合感染。结论 NoV是2017年天津地区该组急性胃肠炎患儿的主要病原体之一;GII基因型特别是GII.4亚型是流行优势毒株;NoV感染在4岁内儿童更为常见;冬季为流行高峰;存在与RtV混合感染的情况。 方玉莲 王维 王萍 赵煜 张同强 李璇 范超萌 林书祥关键词:急性胃肠炎 诺如病毒 基因型 儿童 天津地区住院患儿鼻病毒感染的流行病学和临床特征分析 被引量:6 2021年 目的了解鼻病毒在天津地区急性呼吸道感染患儿中的检测情况、基因的遗传进化特征、流行趋势和临床特征,为临床诊疗提供理论依据。方法收集2017年7月至2019年12月在天津市儿童医院住院的急性呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物标本2945份,采用聚合酶链反应的方法筛选出鼻病毒阳性样本,VP4/VP2序列分析分型。将所获得的序列与已知的鼻病毒基因序列进行比对分析,并收集整理相关临床病例资料。采用SPSS 19.0比较不同季节和分型鼻病毒的检出结果。结果住院患儿鼻病毒阳性检出率为8.15%(240/2945),其中74.78%(86/115)被诊断为肺炎,40.83%(98/240)存在与其他常见病原菌混合感染;鼻病毒感染率冬季较低(4.14%,29/700),春秋季较高,分别为11.00%(66/660)和9.29%(81/872);分型以A型(50.00%,78/156)、C型(41.67%,65/156)居多,且10、11月检出率占C型阳性病例的46.15%(30/65);鼻病毒A型检出的主要分型依次为A12(11.54%,9/78),A49(6.41%,5/78),A22、A101、A66(均为5.13%,4/78)等;C型检出分型依次为C2(20.00%,13/65),C22(9.23%,6/65),C26、C43、C54、C53(均为4.62%,3/65)等;鼻病毒A型感染发热症状较C型常见(χ^(²)=5.411,P<0.05)。结论婴幼儿鼻病毒感染率高,有明显的季节流行趋势,常与其他病原菌混合感染,具有遗传多样性。 侯梦珠 王维 翟佳 方玉莲 王露 武晋英 林书祥关键词:儿童 呼吸道感染 序列同源性 2018年天津市儿童GⅡ型诺如病毒感染的分子流行病学分析 被引量:7 2020年 目的分析2018年天津市儿童医院患儿GⅡ型诺如病毒(NoV)感染的分子流行病学特征。方法单中心研究。2018年1至12月就诊于天津市儿童医院疑似病毒感染引起急性胃肠炎患儿粪便标本2185份,采用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NoV,对阳性标本的衣壳蛋白VP1(VP1)区进行基因扩增并测序,分析基因型并运用MEGA5.05作系统进化树分析。结果2185份粪便标本中检出NoV阳性标本610份,阳性率为27.9%(610/2185),全部为GⅡ型,共发现7个基因型,以GⅡ.3型和GⅡ.4型为主,分别占46.2%(151/327)和40.1%(131/327),GⅡ.2型占4.6%(15/327),其他亚型占9.1%(30/327)。不同年龄组间NoV检出率差异有统计学意义(χ2=17.050,P=0.002),其中阳性标本中以≤3岁年龄组检出率最高,占阳性标本总数的89.2%,不同月份NoV检出率差异有统计学意义(χ2=225.153,P<0.001),其中11、12月为高发月份。GⅡ.3型和GⅡ.4型NoV感染的患儿在伴随粒细胞减少症方面,两种亚型差异有统计学意义(χ2=11.270,P=0.001),在伴随呼吸道症状方面,两种亚型差异有统计学意义(χ2=7.257,P=0.007)。结论2018年天津地区儿童NoV感染主要以GⅡ.3型和GⅡ.4型为主,基因型呈现多样性,提示本地区在今后应继续加强监测和预防儿童的NoV感染。 何菲 方玉莲 林书祥 侯梦珠 王维 沈永明 司萍 彭林关键词:诺罗病毒 胃肠炎 分子流行病学 儿童