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湖南省仔猪PCV2流行病学调查及其病理学研究: 猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type Ⅱ, PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus associated disease, PCVAD)的主要病原。PCV2对环...; 朱哲; 关键词：猪圆环病毒流行病学病理学免疫组化; 文献传递

黑豚C群兽疫链球菌病的诊断被引量：1: 2015年; 湖南省长沙市某黑豚养殖场发生疫情,通过对发病黑豚临床和病理学检查,从病料中分离到成链状的革兰氏阳性细菌,通过鲜血琼脂平板培养菌落具β溶血,PCR扩增和测序结果显示与C群兽疫链球菌有很高同源性,在小鼠致病性试验中,发病致死的小鼠组织内可再次分离到该菌。临床与实验室检测结果表明:该黑豚确系C群兽疫链球菌感染。; 朱哲申艳辉吴先潮袁安文王乃东邓治邦; 关键词：黑豚

杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用: 本发明提供了一种杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用。本发明通过创造性地采用PCV2病毒样颗粒作为免疫原，由于PCV2病毒样颗粒是更接近于正常PCV2病毒的蛋白组装而成的空壳结构，能够通过和正常病毒感染一样的途径递呈给...; 王乃东杨毅邓治邦王爱兵朱哲蔡杰雷昕诺张颜湛洋; 文献传递

杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用: 本发明提供了一种杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用。本发明通过创造性地采用PCV2病毒样颗粒作为免疫原，由于PCV2病毒样颗粒是更接近于正常PCV2病毒的蛋白组装而成的空壳结构，能够通过和正常病毒感染一样的途径递呈给...; 王乃东杨毅邓治邦王爱兵朱哲蔡杰雷昕诺张颜湛洋

猪圆环病毒2型湖南分离株HNLYYA1全基因组的多引物滚环扩增和序列分析被引量：3: 2016年; 首先采用常规PCR法对7份湖南省某地区猪病料进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测,然后对1份PCV2阳性病料的总DNA进行多引物滚环扩增(MPRCA)反应,最后利用限制性内切酶(Eco RⅠ和NcoⅠ)酶切MPRCA产物。结果显示,酶切后的MPRCA产物条带与PCV2基因组或片段的大小一致。将回收的目的条带与Psp72载体连接,转化DH5α菌,最后对提取的重组质粒进行测序和序列比对。获得的PCV2分离株HNLYYA1提交于Gen Bank(登录号KJ867555),其全基因组大小为1 767 bp,基因型为PCV2b-1C。该株PCV2 Cap蛋白与其他毒株进行比对,发现其具有独特的氨基酸突变,NLS区34位组氨酸(H)突变为酪氨酸(Y)、LOOP GH区169位精氨酸(R)突变为甘氨酸(G)、LOOP HI区206位赖氨酸(K)突变为异亮氨酸(I)。本研究揭示了湖南PCV2分离株HNLYYA1的全基因组特征,并为环状病毒的全基因组分离研究提供新的技术途径。; 王占锋朱哲湛洋邓治邦王爱兵杨毅王乃东; 关键词：猪圆环病毒2型

基于体外滚环复制的PCV2毒株感染性克隆构建试剂盒及方法: 本发明公开一种基于体外滚环复制的PCV2毒株感染性克隆构建试剂盒及方法。所述基于体外滚环复制的PCV2毒株感染性克隆构建试剂盒中含有如下引物：PCV2特异性上游引物：5’‑CCATATGAAATAAATTACTGAG‑3...; 王乃东王占峰杨毅王爱兵邓治邦杨林张颜朱哲; 文献传递

杆状病毒介导猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在PK15细胞中的表达与鉴定被引量：2: 2016年; 以pFastBac I为载体骨架,通过PCR从pcDNA3.3-TOPO载体引入巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV3.3)强启动子及不同功能调控元件,构建成含有双启动子,能在PK15细胞(porcine kidney cell)中表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的昆虫杆状病毒转移(穿梭)载体pFastBac I-CMV3.3-eGFP。收获重组杆状病毒,侵染PK15细胞。倒置荧光显微镜下验证该重组转移载体构建成功,根据荧光水平筛选出重组杆状病毒侵染PK15细胞的最佳MOI(multiplicity of infection)和最佳表达强度时间。另将PRRSV(porcine reproductive and respiratory syndrome virus)GP5蛋白基因克隆到pFastBac I-CMV3.3载体。获得的重组杆状病毒以MOI=100侵染PK15细胞48h后收获细胞产物。Western blot鉴定目的蛋白的表达。结果表明,成功构建了重组杆状病毒介导PRRSV GP5蛋白在PK15细胞表达系统。因此,建立的重组杆状病毒在PK15细胞中高效表达GP5蛋白的方法,将为研究PRRSV吸附机制,GP5蛋白与宿主细胞互作蛋白的筛选和针对PRRSV基因工程疫苗的开发奠定了坚实的基础。; 呼高伟余婉婷朱哲王占锋邹亚文王乃东王爱兵邓治邦杨毅; 关键词：PK15细胞 WESTERN BLOT

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朱哲