李艳玲
- 作品数:17 被引量:110H指数:8
- 供职机构:湖南中医药大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 黄芪甲苷配伍三七总皂苷对脑缺血大鼠BMSCs移植后神经修复的影响被引量:10
- 2021年
- 目的探讨黄芪甲苷IV(astragalosideIV,ASTIV)与三七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)配伍联合骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenchymal stem cells,BMSCs)移植对脑缺血大鼠神经功能修复的影响。方法大鼠随机分为对照组、模型组、ASTIV(10 mg/kg)与PNS(25 mg/kg)低剂量组、ASTIV(20 mg/kg)与PNS(50 mg/kg)高剂量组、BMSCs输注组、BMSCs输注联合ASTIV(10 mg/kg)与PNS(25 mg/kg)低剂量组、BMSCs输注联合ASTIV(20 mg/kg)与PNS(50mg/kg)高剂量组。全骨髓贴壁法分离、纯化BMSCs,流式细胞术检测BMSCs表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45阳性表达率。各给药组给予药物进行干预,采用大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)建立局灶性脑缺血模型,采用Longa法测定各组大鼠神经功能缺损症状;采用苏木素-伊红(HE)染色与尼氏染色测定各组大鼠脑组织病理变化;采用免疫荧光法检测各组大鼠海马区BMSCs和神经元特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)阳性表达;采用Western blotting法测定各组大鼠脑组织脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)蛋白表达。结果成功分离培养BMSCs,表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45鉴定符合BMSCs特征。大鼠脑缺血后出现神经功能缺损症状及脑组织病理损伤,模型组大鼠神经功能缺损评分和脑组织细胞损伤率显著升高(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01);各给药组均能够不同程度减轻上述病理改变,其中效应最强为BMSCs输注联合ASTⅣ+PNS高剂量组(P<0.01),优于单用药物和单用BMSCs输注。大鼠脑缺血后神经元损伤,输注BMSCs后,细胞可在缺血侧脑组织增殖并分化为神经元,药物联合BMSCs输注能够增强BMSCs在大鼠脑内的增殖和分化。大鼠脑缺血后,BDNF和GDNF蛋白表达增加,各药物组均能够不同程度上调其表达,其中效应最强为BMSCs输注联合ASTⅣ+P
- 李艳玲丁煌傅馨莹唐三陆展辉杨芙蓉刘晓丹邓常清
- 关键词:黄芪甲苷三七总皂苷脑缺血神经分化
- 黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠脑微血管内皮细胞增殖、凋亡及线粒体功能的影响被引量:13
- 2021年
- 目的观察黄芪甲苷(AST IV)配伍三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)增殖、凋亡及线粒体功能的影响。方法差速密度梯度离心法提取BMECs,免疫荧光检测血管性血友病因子(vWF)表达对细胞进行鉴定,取第3代BMECs,采用AST IV与PNS高(100μmol/L+60μmol/L)、中(50μmol/L+30μmol/L)、低(25μmol/L+15μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立正常组和模型组。CCK8法测定细胞增殖情况,LDH漏出率检测细胞损伤,AnnexinⅤ/PI双染检测细胞凋亡,TraKineTMPro活细胞线粒体染色试剂盒对线粒体进行染色,激光共聚焦观察线粒体结构,JC1染色测定线粒体膜电位变化情况。结果成功培养分离BMECs,阳性表达vWF,与正常组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P<0.05),LDH漏出率显著增加(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01);与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMECs增殖、抑制LDH的释放和抑制细胞凋亡(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组线粒体荧光强度明显降低,分布不均;与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组深红色荧光强度有所增强。与正常组比较,模型组线粒体膜电位水平下降(P<0.01),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组线粒体膜电位明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论 AST IV配伍PNS在体外能促进缺血再灌注模型BEMCs细胞增殖,抑制细胞凋亡,降低LDH漏出率,其机制与保护线粒体,增加线粒体膜电位有关。
- 刘晓丹丁煌丁煌陆展辉李艳玲黄小平邓常清
- 关键词:脑微血管内皮细胞黄芪甲苷三七总皂苷凋亡增殖线粒体
- 常用类风湿关节炎动物模型研究概况及展望被引量:23
- 2015年
- 在类风湿关节炎(RA)的基础研究领域,构建和应用合适的动物模型是研究该疾病发病机制及治疗的基础,构建复制接近人RA疾病特征的动物模型尤为重要。近年来建立了不少RA动物模型,主要有单纯疾病动物模型和病证结合动物模型,但均存在各自的优势和劣势,本文对近几年常用的几种RA动物模型进行研究,从制备方法、模型特点、发病机制、使用情况等方面对比其优缺点,以期为今后研究更接近人RA疾病特征的动物实验模型提供参考。
- 李艳玲祁芳许明艾坤杨茜芸刘梨张泓
- 关键词:类风湿关节炎动物模型优劣势
- 药根碱靶向凝血因子Ⅻ发挥抗凝血作用的体外研究被引量:1
- 2021年
- 目的以凝血因子Ⅻ(coagulation factorⅫ,FⅫ)为靶点探讨药根碱抗血栓作用的机制。方法通过Ledock软件将药根碱分子与内源性凝血途径接触激活阶段关键靶蛋白FⅫ、活化凝血因子FⅫ(actived coagulation factorⅫ,FⅫa)、凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,FⅪ)和活化凝血因子Ⅺ(actived coagulation factorⅪ,FⅪa)进行分子对接,以结合能低于-5 kcal/mol作为阈值判断药根碱与接触激活因子的结合活性;采用体外凝血实验法检测血浆活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血浆凝血酶原时间(plasma prothrombin time,PT)、凝血酶时间(plasma prothrombin time,TT);乏因子血浆纠正试验检测FⅫ、FⅪ、凝血因子Ⅸ(coagulation factorⅨ,FⅨ)、凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ,FⅧ)、凝血因子Ⅹ(coagulation factorⅩ,FⅩ)和凝血因子Ⅶ(coagulation factorⅦ,FⅦ)的活性的抑制作用;Western blot法检测药根碱对FⅫ蛋白激活的抑制作用。结果(1)分子对接实验表明,药根碱与FⅫa、FⅪa结合能均低于-5 kcal/mol,结合活性良好。(2)体外实验中,0.2~0.8 mg/mL药根碱均可显著延长APTT(P<0.01),但不延长PT和TT(P>0.05)。(3)药根碱各剂量均显著降低FⅫ活性(P<0.01),药根碱高剂量(0.8 mg/mL)可降低FⅪ活性(P<0.05),但对FⅨ、FⅧ、FⅩ及FⅦ活性无显著影响(P>0.05)。(4)药根碱各剂量均显著抑制FⅫ蛋白的激活(P<0.01)。结论药根碱与FⅫa对接较好,显著延长APTT,抑制FⅫ蛋白激活,降低血浆FⅫ活性,提示其抗栓作用可能通过抑制FⅫ的活性而发挥。
- 刘惠娜李艳玲曹旺邓常清
- 关键词:药根碱分子对接
- 电针对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织凋亡抑制蛋白c-IAP1及c-IAP2的影响
- 目的:建立佐剂性类风湿关节炎大鼠模型,研究电针刺激“足三里”、“关元”、“阿是穴”对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜组织凋亡抑制蛋白c-IAP1、c-IAP2的影响,探讨电针治疗类风湿性关节炎的作用机理。方法:将60只雄性大鼠...
- 李艳玲
- 关键词:佐剂性关节炎凋亡抑制蛋白C-IAP1C-IAP2
- 文献传递
- 电针对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞胞浆内IκB磷酸化的影响被引量:2
- 2020年
- 目的探讨电针足三里、关元穴对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠踝关节滑膜细胞胞浆内核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的抑制蛋白IκB磷酸化的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX组)、电针组,每组15只。模型组、MTX组和电针组大鼠均于尾根部皮下注入完全弗氏佐剂复制AA模型。自造模后第1天开始,MTX组大鼠予以0.35 mg/kg剂量的MTX灌胃治疗,电针组大鼠每日予以电针关元、双侧足三里、阿是穴,共治疗3周,正常组和模型组正常饲养不作干预。治疗过程中每3天行1次体质量、足爪容积、关节炎指数测评;实验结束后对各组大鼠踝关节行HE染色切片,并运用Western blot法分别检测大鼠踝关节滑膜细胞胞浆内IκB磷酸化水平及其重要相关蛋白NF-κB的含量。结果与正常组比较,模型组大鼠踝关节滑膜细胞胞浆内IκB磷酸化水平显著升高(P<0.01),细胞核内NF-κB的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,电针组踝关节滑膜细胞胞浆内IκB磷酸化水平低于模型组(P<0.05),细胞核内NF-κB的含量显著降低(P<0.01)。结论电针AA大鼠能够有效抗炎,其抗炎机制可能与抑制关节滑膜细胞胞浆内IκB磷酸化,从而良性调控NF-κB炎症信号通路有关。
- 祁芳李艳玲艾坤蔡雄李鑫刘梨杨茜芸
- 关键词:佐剂性关节炎关元
- 黄芪甲苷配伍三七总皂苷对脑缺血大鼠BMSCs移植后血管新生的影响被引量:11
- 2021年
- 目的:探讨黄芪甲苷(ASTⅣ)与三七总皂苷(NTS)配伍联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血大鼠神经修复和血管新生的影响。方法:大鼠随机分为假手术组,模型组,ASTⅣ配伍NTS低、高剂量组,骨髓间充质干细胞(BMSCs)输注组,BMSCs输注联合黄芪甲苷和三七总皂苷低(10,25 mg·kg^(-1)),高(20,50 mg·kg^(-1))剂量组。全骨髓贴壁法分离、纯化BMSCs,流式细胞术检测BMSCs表面标志物CD29,CD90,CD34,CD45阳性表达率。采用大脑中动脉阻塞建立局灶性脑缺血模型。BMSCs输注组尾静脉注射PKH26标记的BMSCs(1次/d);联用组尾静脉注射BMSCs(1次/d)并灌胃给药(2次/d);其他组灌胃给药,2次/d;假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水。Longa法测定神经功能缺损症状,红四氮唑(TTC)染色测定脑梗死率、免疫荧光法观察BMSCs移植后的存活及向血管的分化[PKH26/血管内皮生长因子(VEGF)的双阳性表达],蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血管生成素1(Ang1)和转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))蛋白的表达。结果:成功分离培养BMSCs,表面标志物CD29,CD90,CD34,CD45鉴定符合BMSCs特征。脑缺血后出现神经功能缺损症状,模型组神经功能缺损评分显著升高(P<0.01),脑梗死率显著增高(P<0.01),各药物及细胞移植均能不同程度减轻上述病理改变,其中效应最强为BMSCs输注联合高剂量ASTⅣ+NTS组(P<0.01),优于单用药物和单用BMSCs输注。脑缺血后脑血管损伤,输注BMSCs后,细胞可在缺血侧脑组织存活并促进血管新生,药物联合可增强其效应。脑缺血后,Ang1和TGF-β_(1)的表达增加,效应最强为BMSCs输注联合ASTⅣ+NTS组(P<0.01),优于单用药物和单用BMSCs输注。结论:ASTⅣ配伍NTS能促进骨髓间充质干细胞移植的存活,靶向修复脑缺血后受损血管促进血管新生,机制可能与改善脑缺血后脑内局部微环境,促进移植干细胞的存活和分化有关。
- 李艳玲丁煌杨芙蓉陆展辉李煜雯刘晓丹邓常清
- 关键词:黄芪甲苷三七总皂苷脑缺血血管新生
- 基于fMRI技术探讨针灸中枢作用机制的研究进展被引量:4
- 2017年
- 通过收集f MRI相关的针灸文献,主要分析运用f MRI技术阐释针刺和艾灸中枢作用机制的研究进展。针刺f MRI研究较多,主要集中在腧穴特异性、穴位配伍、针感等方面,多数研究支持腧穴特异性,针感和穴位配伍能引起不同的脑功能响应,但针刺的中枢作用机制仍需进一步研究;而艾灸f MRI研究较少,以热敏灸为主,其他灸法研究稀少;针刺与艾灸比较效应的f MRI研究更少。
- 刘灿周芝根何晓婷陈乐李艳玲杨茜芸常小荣刘迈兰
- 关键词:FMRI针刺艾灸
- 黄芪甲苷与三七总皂苷配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的研究
- 2024年
- 目的观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)与三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的作用。方法采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,实验随机分为假手术组、模型组、单用冰片组、ASTⅣ配伍PNS(AP)组、ASTⅣ与PNS配伍冰片(APB)组,缺血2 h后再灌注48 h,神经功能评分、HE染色和尼氏染色检测脑组织功能和神经细胞损伤,HE染色检测肾脏损伤,通过肾脏质量指数和血肌酐以及血清中尿素氮含量评价肾脏功能,ELISA法检测血清IL-1β和IL-10含量,免疫组织化学检测肾组织NF-κB蛋白的表达,Western blot检测肾组织TLR4和MyD88蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能评分和神经细胞损伤率显著升高(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01),同时肾小管水肿、核固缩,肾脏质量指数降低(P<0.01),血清肌酐和尿素氮含量升高(P<0.01),提示脑缺血再灌注可诱发肾脏继发性损伤。与模型组比较,各药物组均能不同程度地降低神经功能评分(P<0.01),减少神经细胞损伤率(P<0.01或P<0.05),增加尼氏体数量(P<0.01),改善肾脏结构损伤,增加肾脏质量指数(P<0.01或P<0.05),降低血清肌酐和尿素氮含量(P<0.01或P<0.05),以ASTⅣ与PNS配伍冰片效果最佳。与假手术组比较,模型组血清IL-1β含量升高(P<0.01),肾组织NF-κB、TLR4和MyD88蛋白表达增高(P<0.01)。与模型组比较,各药物组血清IL-1β含量降低(P<0.01或P<0.05),血清IL-10含量升高(P<0.01或P<0.05),肾脏组织中NF-κB、TLR4和My D88的蛋白表达降低(P<0.01或P<0.05)。结论脑缺血后可诱发肾脏继发性损伤,ASTⅣ和PNS配伍冰片除可减轻脑缺血再灌注后脑组织损伤外,还可减轻脑缺血后继发性肾脏损伤,其作用与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路、抑制肾脏炎症有关。
- 欧典李艳玲刘晓丹刘晓丹张伟黄小平周峰张伟邓常清丁煌
- 关键词:黄芪甲苷三七总皂苷冰片脑缺血再灌注损伤肾脏损伤
- 一种针灸用大鼠固定器
- 本实用新型涉及一种针灸用大鼠固定器,所述大鼠固定器包括:两根垫板、带有四根支架的底槽、两根横条;两根横条分别固定在所述底槽的支架上,所述横条上间隔设置有多个卡扣,所述两根垫板分别通过所述卡扣固定在两根横条的中间,以使大鼠...
- 祁芳张泓艾坤李艳玲杨茜芸许明倪伟过灵香
- 文献传递