郑红
- 作品数：7 被引量：40H指数：5
- 供职机构：第三军医大学全军烧伤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 趋化因子SDF-1β在大肠杆菌中的表达及其纯化被引量：9
- 2001年
- 目的 重组人SDF 1 β在大肠杆菌中表达并获得纯化的有生物学活性的SDF 1 β蛋白。 方法 以pET32a( + ) SDF 1为人SDF 1 β克隆基因的表达载体 ,以大肠杆菌AD494(DE3)pLysS为表达菌 ,在IPTG诱导下表达出一个由 2 30个氨基酸残基组成的硫氧还蛋白 (thioredoxin) SDF 1 β的融合蛋白 ( 2 6× 1 0 3)。经细菌裂解、金属离子螯合亲和层析、肠激酶消化以游离SDF 1 β、阳离子交换层析和逆向高效液相层析等步骤纯化目的蛋白。以蛋白印迹、纯化产物的N端氨基酸测序及配体结合试验、微生理监测术鉴定纯化产物的生化性质及生物学活性。结果 在经诱导的发酵菌中融合蛋白占总菌体蛋白的 1 0 %～ 1 5 %。从 1L发酵菌液中可获得高纯度目的蛋白约 40 0 μg。蛋白印迹实验及N端氨基酸测序皆证实纯化终产物为SDF 1 β(由 71个氨基酸残基组成 ,7.8× 1 0 3)。配体结合试验及Cytosensor表明 ,该产物能与CXCR4结合 [Kd =( 1 2 .2 0± 2 .99)nmol L]并引起CXCR4表达细胞的信号传导。结论 采用本方法可获得高表达的 ,高纯度的具有与天然SDF 1 β相似活性的重组人SDF 1 β。
- 郑红StephenCPeiper朱锡华
- 关键词：趋化因子趋化因子受体CXCR4
- 趋化因子受体CXCR4结构与功能的研究
- 该研究的目的在于加深对CXCR4受体结构与功能的认识,探讨SDF-1抑制HIV-1进入细 胞的机制.研究的主要内容及实验结果包括以下几方面:1、重组人SDF-1β的表达,纯化:为获得足够量的CXCR4之配体SDF-1β,...
- 郑红
- 关键词：趋化因子趋化因子受体配体结合辅助受体趋化因子受体CXCR4
- 文献传递
- 病毒趋化因子与病毒趋化因子受体被引量：10
- 2000年
- 趋化因子和趋化因子受体的生物学是目前生物学的研究热点之一。病毒趋化因子及病毒趋化因子受体的发现使我们能从新的视角研究病毒的致病机理 ,从而探寻新的预防和治疗方法。
- 郑红朱锡华
- 关键词：趋化因子趋化因子受体
- HIV疫苗的研究策略及其进展被引量：9
- 2000年
- 研制和发展 HIV疫苗是人类抑制和消灭 HIV感染的必要手段。对 HIV生物学和病理学的逐渐的深入认识为制定合理的疫苗研究策略 ,制备有效的 HIV疫苗奠定了依据。本文综述了作为制备 HIV疫苗的主要靶位—— HIV包膜蛋白结构的研究进展、用于疫苗研究的动物模型的发展状况和迄今所实施的各种 HIV疫苗的研究策略。
- 郑红朱锡华
- 关键词：HIV包膜蛋白疫苗中和抗体
- 异体皮肤移植后局部淋巴结内MIP-3β与树突状细胞的动态变化
- 目的观察异体皮肤移植后局部引流淋巴结内趋化因子MIP-3β含量与树突状细胞数量的动态改变。方法应用异基因大鼠皮肤移植模型,ELISA法测定移植后局部淋巴结内MIP-3β的含量变化,免疫组化及图像分析测定树突状细胞的数量改...
- 曹川李世荣王珍祥郑红吴军
- 文献传递
- 嗜酸粒细胞亲合素N端突变体重组腺病毒在小鼠变应性鼻炎中的作用被引量：9
- 2006年
- 目的获取人嗜酸粒细胞亲合素(Eotaxin)N端突变体(Met/Eotaxin)重组腺病毒,探讨其在小鼠变应性鼻炎中的作用。方法从人外周血单个核细胞总RNA中克隆人400bp的Eotaxin基因;通过N端点突变获取Met/Eotaxin基因,构建pAdtrack-CMV-Met/Eotaxin腺病毒穿梭质粒;将该质粒在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒基因组质粒进行同源重组;将Met/Eotaxin重组腺病毒载体在AD293细胞中包装、扩增获取Met/Eotaxin重组腺病毒(Ad-Met/Eotaxin);采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白印迹杂交(Western blot)对Met/Eotaxin重组腺病毒的正确性进行鉴定。采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发诱导小鼠变应性鼻炎,40只小鼠随机分为变应性鼻炎组和Ad-Met/Eotaxin组。Ad-Met/Eotaxin组在每次激发前30min予以每只小鼠2ml滴度为5×109pfu/ml的Ad-Met/Eotaxin腹腔注射。比较二组动物变应性鼻炎症状和鼻黏膜形态学改变,并在荧光显微镜下观察腺病毒转染效率标志物———绿色荧光蛋白在鼻黏膜等组织中的表达。结果PCR和Western blot结果显示Ad-Met/Eotaxin构建正确;Ad-Met/Eotaxin腹腔注射后可高效转染小鼠鼻黏膜;Ad-Met/Eotaxin可显著减轻小鼠变应性鼻炎症状以及鼻黏膜形态学改变。结论Ad-Met/Eotaxin具有阻断小鼠变应性鼻炎的作用。
- 朱瑾韩德民周锦川贺伟峰张小容郑红吴军
- 关键词：趋化因子突变体
- 趋化因子受体CXCR4的结构与功能被引量：9
- 2001年
- 目的 认识趋化因子受体CXCR4之结构与功能的关系。方法 分别建立野生型趋化因子受体CXCR4及CXCR2、5个CXCR4/CXCR2嵌合受体和 2个CXCR4突变受体的CHO稳定表达细胞株 ,以配体 -受体结合试验、细胞微生理监测术、体外细胞 -细胞融合实验为手段观察各变异受体与重组人SDF 1β的结合能力、在受刺激后的信号转导能力、以及作为HIV 1辅助受体的能力。结果 有 4个变异受体 (2 444a ,444 2 ,42 2 2 ,CXCR4 Tr)保持了程度不同的与SDF 1β的结合能力 ,其中 2个 (2 444a ,CXCR4 Tr)保留了程度不同的信号转导能力 ;除 1个变异受体 (42 2 2 )外 ,其它变异受体都程度不同的具有辅助受体功能。结论 CXCR4以多个结构区域参与与SDF 1β的相互作用。其N端胞外区足以具有与SDF 1β的高亲和性结合能力。第三环链对CXCR4的结合能力也有其特定的贡献。CXCR4的信号传导不仅需要保守结构DRY盒 ,而且还需要贯穿整个分子的 7个跨膜区域在受配体刺激后形成并维持一定的构象。CXCR4的辅助受体功能结构域与配体结合功能结构域间存在交叉重叠。
- 郑红Stephen C Peiper朱锡华
- 关键词：CXCR4嵌合体趋化因子受体
