李士伟
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 针对骨髓移植病患中铁过载的去铁治疗研究进展被引量：4
- 2015年
- 骨髓移植是临床上治疗恶性造血系统疾病的常见手段。而铁过载是临床上常见的并发症之一,对病患的造血功能和治疗后恢复有极大的抑制作用。了解铁过载产生的分子或遗传机制能帮助优化去铁化方案,提高去铁化治疗的效率。本文总结了骨髓移植前后铁过载现象发生机制的最新研究进展,并阐述了临床上多种去铁治疗的方案,以期为该类病患铁过载的预防和治疗提供参考。
- 李士伟李想关锋
- 关键词：骨髓移植铁过载去铁治疗
- 铁过载引发人肝细胞HH4N-糖链表达差异研究被引量：1
- 2015年
- 肝脏铁过载是血液系统疾病患者进行骨髓移植后的典型并发症之一,长期铁过载可引发肝脏细胞凋亡和器官损坏,然而铁过载的分子调控机理迄今仍不清楚。以培养的枸橼酸铁铵过载人肝细胞HH4和正常人肝细胞HH4为研究对象,细胞裂解提取总蛋白,分子筛超滤管分离获得总糖肽,PNGase F酶解释放出N-糖链,Sepharose 4B除盐纯化N-糖链,再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术比较N-糖链变化情况。同时,采用荧光细胞凝集素免疫组化方法验证糖链分析结果。结果在铁过载人肝细胞和正常细胞中均检测到16种N-糖链,但糖链丰度存在明显差异。与正常人肝细胞相比,铁过载人肝细胞中高甘露糖型糖链的含量降低,而杂合型、复杂型、平分型、岩藻糖化和唾液酸化糖链的含量明显升高。凝集素免疫组化结果显示铁过载后细胞对凝集素Con A的亲和作用减弱,而对PHA-E、AAL、LCA和MAL-II的亲和作用增强,与糖链质谱分析结果相一致。研究为进一步探索人肝细胞铁过载模式下N-糖链表达差异的分子机理提供了技术支持。
- 李士伟关锋李想
- 关键词：铁过载N-糖链
- NF-κB参与枸橼酸铁铵过载诱导的人肝细胞hepcidin基因表达被引量：1
- 2015年
- 目的:研究核因子κB(NF-κB)在枸橼酸铁铵过载诱导人肝细胞铁调素(hepcidin)基因表达中的调控作用。方法:依据前期不同浓度枸橼酸铁铵抑制人肝细胞HH4增殖实验结果,选取0.1、1、5和10 mmol/L枸橼酸铁铵处理人肝细胞HH4 48 h,半定量PCR法检测胞内hepcidin的表达水平;利用染色质免疫共沉淀(Ch IP)、电泳迁移率实验(EMSA)和双萤光素酶报告基因检测系统,并结合胞内NF-κB活性抑制实验,确定NF-κB对人hepcidin转录活性的影响。结果:5 mmol/L和10 mmol/L浓度的枸橼酸铁铵处理细胞后,hepcidin表达水平显著增强;Ch IP和EMSA实验证实NF-κB能够与hepcidin基因启动子结合;重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-p Hepcidin相对萤光素酶活性明显高于对照组;与重组质粒TOPFlash-p Hepcidin相比,突变重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-p Hepcidin-mut相对萤光素酶活性显著降低;NF-κB抑制剂BAY 11-7082显著降低了hepcidin基因的表达。结论:NF-κB参与了铁过载诱导的人hepcidin基因表达。这为进一步深入研究肝细胞铁过载模式下多因子协同调控hepcidin基因表达的具体分子机理奠定了基础。
- 李士伟李想关锋
- 关键词：核因子ΚB铁调素
